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Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel
LAnti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel est un anticorps monoclonal IgG2b murin purifié par la protéine A, lié de manière covalente au sépharose 4B.
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Comparaison de produits
Description
LAnti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel est un anticorps monoclonal IgG2b murin purifié par la protéine A, lié de manière covalente au sépharose 4B.
Propriétés
| Clone danticorps | 1E6 |
|---|---|
| Isotype danticorps | IgG2b de souris |
| Purification de lanticorps | Purifié par la protéine A |
| Anticorps lié | NLT 7,5 grammes danticorps/litre de gel |
| Application | Purification des protéines, Immunoprécipitation |
| Composition du produit | Ce produit est une suspension de gel à 50 % préparée dans une solution mère de 10 mM Na3PO4, 150 mM NaCl, 50 % de glycérol, pH 7,4, contenant 0,02 % (p/v) dazide de sodium |
| Volume recommandé | IP : 5 μl de gel pour 500 μl de solution protéique brute |
| Capacité de liaison | Minimum 1,1 mg dune protéine de fusion DYKDDDDK Tag éluée par ml de résine compactée |
| Caractéristiques de liaison | Protéine de fusion Met-N-terminal DYKDDDDK Tag : Met-DYKDDDDK Tag–Protéine Protéine de fusion N-terminal DYKDDDDK Tag : DYKDDDDK Tag–Protéine Protéine de fusion C-terminal DYKDDDDK Tag : Protéine-DYKDDDDK Tag |
Stockage (à partir de la date de réception)
Le produit non ouvert est stable à -20°C pendant 2 ans. Après utilisation, la résine doit être nettoyée et stockée dans 50 % de glycérol avec 10 mM de phosphate de sodium, 150 mM de chlorure de sodium, pH 7,4, contenant 0,02 % dazide de sodium pour protéger le produit. Ne pas congeler en labsence de glycérol.
Protocole
Ce protocole déchantillon est recommandé pour limmunoprécipitation des protéines marquées DYKDDDDK (DYKDDDDK-tagged).
| Préparation du gel daffinité |
1. Suspendre soigneusement le gel daffinité Anti-DYKDDDDK Tag dans le flacon, pour obtenir une suspension uniforme de la résine. Transférer rapidement 10 μl de la suspension de gel (environ 5 μl de volume de gel compacté) dans un nouveau tube. 2. Ajouter 0,5 ml de TBS. Suspendre soigneusement le gel daffinité Anti-DYKDDDDK Tag par pipetage. Centrifuger la résine à 5000 tr/min pendant 30 secondes et retirer délicatement le surnageant. Assurez-vous de retirer tout le tampon de lavage sans jeter la résine. Répéter 3-4 fois. 3. Ajouter 500 μl dextraits périplasmiques de cellules à la résine lavée. 4. Agiter délicatement les échantillons pendant 2 heures à 4°C. 5. Centrifuger la résine pendant 30 secondes à 5000 tr/min. Transférer les surnageants dans un nouveau tube. 6. Laver la résine avec 0,5 ml de TBS jusquà ce que lOD280 du surnageant soit < 0,05. 7. Une condition de pH extrême ou un excès de peptide poly DYKDDDDK Tag peut être appliqué à la résine pour éluer la protéine marquée DYKDDDDK. Choisir les méthodes délution en fonction des caractéristiques de la protéine cible et de lapplication en aval. 8. Pour la détection directe de la protéine cible, ajouter 2x le tampon de chargement déchantillon SDS-PAGE dans un rapport de 1:1 à 20 μl de suspension de gel. Faire bouillir léchantillon pendant 5 minutes. Centrifuger à 5000 tr/min pendant 30 secondes. Transférer délicatement le surnageant dans un nouveau flacon pour le SDS-PAGE. |
| Liaison de léchantillon | |
| Lavage de la résine | |
| Élution et détection |
Selleck fournit Poly DYKDDDDK Tag Peptide lyophilized powder pour lélution du produit protéique.
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Support technique
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