Semagacestat (LY450139)

Catalogusnr.S1594 Batch:S159401

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C19H27N3O4
Molecuulgewicht 361.44 CAS-nr. 425386-60-3
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 72 mg/mL (199.2 mM)
Ethanol 43 mg/mL (118.96 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Semagacestat (LY450139) is een γ-secretase blokker voor Aβ42, Aβ40 en Aβ38 met een IC50 van respectievelijk 10,9 nM, 12,1 nM en 12,0 nM. Het remt ook de Notch signalering met een IC50 van 14,1 nM in H4 humane glioomcellen. Deze verbinding heeft fase 3 klinische proeven bereikt.
Doelen
Aβ42
(H4 human glioma cells)		 Aβ38
(H4 human glioma cells)		 Aβ40
(H4 human glioma cells)		 Notch
(H4 human glioma cells)
10.9 nM 12.0 nM 12.1 nM 14.1 nM
In vitro Semagacestat (LY450139) vermindert de secretie van Aβ42, Aβ40 en Aβ38 uit H4 humane glioomcellen die stabiel humaan wild-type APP overexpressen in het kweekmedium, met IC50 van respectievelijk 10,9 nM, 12,1 nM en 12,0 nM, zonder de cellevensvatbaarheid te beïnvloeden. Het verhoogt ook β-CTF in celysaten met ECmax van 16,0 nM, en de toename kan onverwacht worden afgezwakt bij hoge concentraties. Deze verbinding remt Notch signalering met IC50 van 14,1 nM, en vertoont minimale Notch-sparende selectiviteit met Notch IC50/Aβ42 IC50 slechts 1,3. Het veroorzaakt een concentratieafhankelijke afname van Aβ40 afgescheiden in het medium met IC50 van 111 nM uit muizen CTX die endogeen muizen APP expresseren, maar de vorming van muizen Aβ42 in CTX is ruwweg 12-voudig minder dan Aβ40 in overeenstemming met gegevens voor neuronen van wild-type muizen.
In Vivo Orale toediening van Semagacestat (LY450139) (1 mg/kg) aan 5,5 maanden oude APP-transgene Tg2576 muizen verbetert significant geheugentekorten op het ruimtelijk werkgeheugen met behulp van de Y-maze taak, wat verdwijnt na 8 dagen subchronische dosering. Het verlaagt hippocampale niveaus van zowel Aβ42 als Aβ40 bij 10 mg/kg (22-23% reductie) en 30 mg/kg (36-41% reductie) en verhoogt β-CTF bij 0,3-10 mg/kg op een dosisafhankelijke manier zonder remming van de verwerking van andere γ-secretase substraten, zoals Notch, N-cadherin of EphA4, in de hersenen, maar schaadt de normale cognitie bij wild-type muizen en 3 maanden oude Tg2576 muizen die er niet in slagen cognitieve tekorten in de Y-maze test te herstellen.
Functies De best gekarakteriseerde γ-secretase remmer die de kliniek heeft bereikt.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Cellulaire APP verwerkingsassay en Notch signaleringsassay

    H4 humane glioomcellen die stabiel humaan wild-type APP695 overexpresseren, worden 24 uur lang behandeld met Semagacestat (LY450139) in verschillende concentraties. De niveaus van Aβ42, Aβ40 en Aβ38 in de media worden gemeten met afzonderlijke ELISA-kits. De expressievector van de constitutief actieve vorm van Notch (NotchΔE), die basen 1-60 en 5193-6657 van de humane Notch1 coderende regio (NM_017617) codeert, wordt geconstrueerd in een pcDNA3.1 vector met een sequentiemodificatie van muis naar mens. De Notch signaalactiviteit wordt geëvalueerd met behulp van de Cignal RBP-Jk Reporter Assay kit. RBP-Jk-eiwit [CSL/CBF1/Su(H)/Lag1] is een transcriptiefactor die geactiveerd wordt met het Notch intracellulaire domein geproduceerd door γ-secretase. H4-cellen worden transient getransfecteerd met de humane NotchΔE expressievector en de RBP-Jk-responsieve luciferaseconstructie met behulp van Lipofectamine 2000, en vervolgens 16 uur lang blootgesteld aan verschillende concentraties van deze verbinding. Notch signalering wordt gemeten op basis van luciferaseactiviteit in het celysaat met behulp van het Dual-Glo Luciferase Assay System.
Celassay:[2]
  • Cellijnen

    Murine cortical neurons and cerebellar granule cells

  • Concentraties

    Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM

  • Incubatietijd

    24 hours

  • Methode

    Cells are incubated with Semagacestat (LY450139) for 24 hours. For detection of cell viability, the percentage of viable cells is quantified by their capacity to reduce 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) following incubation with 0.5 mg/mL MTT for 60 minutes. For the detection of sAPP species, cells are lysed and analysed by western blotting.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    Female Tg2576 mice expressing human APP695 with the Swedish mutation (K670N/M671L)

  • Doseringen

    ~30 mg/kg

  • Toediening

    Orally administered once daily

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22323718/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19519664/

Klantproductvalidatie

<p>HEK/APPswe cells were either left non-treated (-) or exposed to the γ-secretase inhibitor (GSI) semagacestat (+) for 19 h prior to cell harvesting and membrane preparation (Substrate accumulation). Exposure of cells with GSI prior to membrane preparation results in higher Aβ1-42 and Aβx-42 signals as compared to membranes derived from non-GSI treated cells. Direct addition of semagacestat to the membranes in the novo Aβ production assay inhibited Aβ production (Semagacestat (1 µM)). The amount of Aβx-42 is higher than Aβ1-42 suggesting that C83 is the major substrate for the Aβ42 signal detected.</p>

Gegevens van [ J Biol Chem , 2014 , 289(3), 1540-50 ]

<p>None of the AZ GSMs (square, triangle, and ×) or E2012 (O) affect Notch processing, whereas the GSIs L685458, DBZ, MRK-560, and Semagacestat do, as measured by quantifying the amount of nuclearly trans- located NICD in HEK293 cells stably transfected with △ENotch using immunocytochemistry. % NICD translocation is set relative to 0.5% DMSO (100%) and 0.5 μM L685458(0%)controls(mean±S.E., n＝2).</p>

Gegevens van [ J Biol Chem , 2012 , 287(15), 11810-9 ]

Cultures were assessed in A for TRAP by enzyme histochemistry 5-8 days following exposure to Rankl. Values are means ± S.D.; n = 6 for all data sets except for Notch2Q2319X DMSO at day 5 where n = 5; the right upper panel shows representative culture fields of TRAP-stained multinucleated cells 8 days after the addition of Rankl.

Gegevens van [ , , J Biol Chem, 2016, 291(4):1538-51. ]

Sellecks Semagacestat (LY450139) Is geciteerd door 23 Publicaties

A patient-derived T cell lymphoma biorepository uncovers pathogenetic mechanisms and host-related therapeutic vulnerabilities [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00102-8] PubMed: 40147445
Impaired ciliogenesis in small airway epithelial cells involves in the development of idiopathic pulmonary fibrosis [ Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis, 2025, 1871(8):167992] PubMed: 40712987
Simultaneous Inhibition of Ceramide Hydrolysis and Glycosylation Synergizes to Corrupt Mitochondrial Respiration and Signal Caspase Driven Cell Death in Drug-Resistant Acute Myeloid Leukemia [ Cancers (Basel), 2023, 15(6)1883] PubMed: 36980769
Establishment and characterization of immortalized sweat gland myoepithelial cells [ Sci Rep, 2022, 12(1):7] PubMed: 34997030
LY450139 Inhibited Ti-Particle-Induced Bone Dissolution via Suppressing Notch and NF-κB Signaling Pathways [ Calcif Tissue Int, 2022, 111(2):211-223] PubMed: 35588014
TrkA-mediated endocytosis of p75-CTF prevents cholinergic neuron death upon γ-secretase inhibition [ Life Sci Alliance, 2021, 4(4)e202000844] PubMed: 33536237
Treatment-Induced Tumor Dormancy through YAP-Mediated Transcriptional Reprogramming of the Apoptotic Pathway. [ Cancer Cell, 2020, 13;37(1):104-122e12] PubMed: 31935369
Amyloidogenic Processing of Alzheimer's Disease β-amyloid Precursor Protein Induces Cellular Iron Retention [ Mol Psychiatry, 2020, 10.1038/s41380-020-0762-0] PubMed: 32444869
A novel human colon signet-ring cell carcinoma organoid line: establishment, characterization and application [ Carcinogenesis, 2020, 41(7):993-1004] PubMed: 31740922
In Vitro Evaluation of Clinical Candidates of γ-Secretase Inhibitors: Effects on Notch Inhibition and Promoting Beige Adipogenesis and Mitochondrial Biogenesis [ Pharm Res, 2020, 37(10):185] PubMed: 32888109

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.