SB202190

SB202190 remt significant zowel de basale als de anti-Fas antilichaam-geïnduceerde MAPKAPK 2 activiteit op een dosisafhankelijke manier. Deze verbinding alleen is voldoende om celdood te induceren in Jurkat en HeLa cellen door activering van CPP32-achtige caspasen, wat geblokkeerd kan worden door expressie van bcl-2. De Apoptosis related wordt afgezwakt door p38β maar versterkt door p38α. [2] De chemische stof remt sterk UVB-geïnduceerde COX-2 eiwitexpressie in HaCaT cellen, en remt aanzienlijk UVB-geïnduceerd cox-2 mRNA. [3] Behandeling met deze remmer remt de expressie van albumine-geïnduceerde pro-inflammatoire (monocyt chemoattractant proteïne-1) en transforming growth factor (TGF)-beta1-geïnduceerde profibrotische (procollageen-Ialpha1) genen met meer dan 50% in renale tubulaire cellen (normale rattennier-52E). [4] Het induceert fosforylering van JNK op een dosis- en tijdsafhankelijke manier in A549 cellen, induceert fosforylering van ATF-2 transcriptiefactor, en verhoogt AP-1 DNA-binding. [6] Dit middel versterkt de groei van THP-1 en MV4-11 cellen. Het verhoogt de fosforylering van c-Raf en ERK, wat suggereert dat Ras-Raf-MEK-mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway activering betrokken is bij de leukemie celgroei geïnduceerd door deze verbinding. [7]

Het remmen van p38 door toediening van SB202190 remt PV IgG-geïnduceerde blaarvorming in het passieve transfer muismodel. [5] In het endotoxinemodel van sepsis leidt behandeling met deze verbinding tot een statistisch significant overlevingsvoordeel in vergelijking met de controle. [8]

• In vitro kinase testen

  De p38α en p38β worden geanalyseerd in 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, met 0.1 mM EGTA, en myeline basisch proteïne (0.33 mg/mL) als substraat. De analyses worden handmatig uitgevoerd gedurende 10 minuten bij 30 °C in incubaties van 50 μL met [γ-³³P]ATP, of met een Biomek 2000 Laboratory Automation Workstation in een 96-well formaat gedurende 40 minuten bij kamertemperatuur in incubaties van 25 μL met [γ-³³P]ATP. De concentraties van ATP en magnesiumacetaat zijn respectievelijk 0.1 mM en 10 mM. Alle analyses worden gestart met MgATP. Handmatige analyses worden beëindigd door aliquots van de incubatie op fosfocellulosepapier te druppelen, gevolgd door onderdompeling in 50 mM fosforzuur. Robotanalyses worden beëindigd door de toevoeging van 5 μL 0.5 M fosforzuur voordat aliquots op P30-filtermatten worden gedruppeld. Alle papieren worden vervolgens vier keer gewassen in 50 mM fosforzuur om ATP te verwijderen, eenmaal in aceton (handmatige incubaties) of methanol (robotincubaties), en daarna gedroogd en geteld op radioactiviteit.

• Cellijnen

  Jurkat, and HeLa

• Concentraties

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~50 μM

• Incubatietijd

  24 hours

• Methode

  Cells are serum-starved and then treated with different concentration of SB 202190 for 24 hours. Cell viability is assayed by either trypan blue exclusion or propidium iodide exclusion followed by flow cytometry analysis. The apoptotic nuclei are visualized by H33258 staining.

• Dierlijke modellen

  C57BL/6J mice injected i.d. with a sterile solution of either control IgG or PV IgG

• Doseringen

  12.5 μg

• Toediening

  Administered via i.d.