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AT7867 Akt inhibitor

Kat.-Nr.: S1558

AT7867 is a potent ATP-competitive inhibitor of Akt1/2/3 and p70S6K/PKA with IC50 of 32 nM/17 nM/47 nM and 85 nM/20 nM in cell-free assays, respectively; this compound shows little activity outside the AGC kinase family.
AT7867 Akt inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 337.85

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.97%
99.97

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 337.85 Formel

C20H20ClN3

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 857531-00-1 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles C1CNCCC1(C2=CC=C(C=C2)C3=CNN=C3)C4=CC=C(C=C4)Cl

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 68 mg/mL (201.27 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 5 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Akt2
(Cell-free assay)
17 nM
PKA
(Cell-free assay)
20 nM
Akt1
(Cell-free assay)
32 nM
Akt3
(Cell-free assay)
47 nM
p70 S6K
(Cell-free assay)
85 nM
RSK1
(Cell-free assay)
>100 nM
In vitro
AT7867 hemmt auch die strukturell verwandten AGC-Kinasen p70S6K und PKA mit IC50 von 20 nM bzw. 85 nM. Diese Verbindung zeigt ATP-kompetitive Aktivität gegenüber Akt2 mit einem Ki von 18 nM. Sie zeigt eine Antiproliferation in Zelllinien mit PTEN- oder PIK3CA-Mutationen und ist sehr potent gegenüber MES-SA, MDA-MB-468, MCF-7, HCT116 und HT29 mit IC50 von 0,94 μM, 2,26 μM, 1,86 μM, 1,76 μM bzw. 3,04 μM. Diese Chemikalie unterdrückt auch das Zellwachstum von U87MG-, PC-3- und DU145-Zellen mit IC50 von 8,22 μM, 10,37 μM bzw. 11,86 μM. Sie unterdrückt die Akt-Aktivität durch Hemmung der Phosphorylierung von GSK-3β in menschlichen Tumorzellen mit IC50 von 2-4 μM. Diese Verbindung induziert auch die Phosphorylierung der folgenden direkten Akt-Substrate, einschließlich der proapoptotischen Transkriptionsfaktoren FKHR (FoxO1a), FKHRL1 (FoxO3a) und des nachgeschalteten Ziels S6RP in U87MG-Zellen.
Kinase-Assay
In-vitro-Kinase-Assays
Kinase-Assays für Akt2, PKA, p70S6K und CDK2/Cyclin A werden alle in einem radiometrischen Filterbindungsformat durchgeführt. Die Assay-Reaktionen werden in Gegenwart von AT7867 angesetzt. Für Akt2 werden das Akt2-Enzym und 25 μM Aktide-2T-Peptid (HARKRERTYSFGHHA) in 20 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-Glycerophosphat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM Natriumorthovanadat, 1 mM DTT, 10 μg/mL Rinderserumalbumin und 30 μM ATP (1,16 Ci/mmol) 4 Stunden lang inkubiert. Für PKA werden das PKA-Enzym und 50 μM Peptid (GRTGRRNSI) in 2 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-Glycerophosphat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM Orthovanadat, 1 mM DTT und 40 μM ATP (0,88 Ci/mmol) 20 Minuten lang inkubiert. Für p70S6K werden das p70S6K-Enzym und 25 μM Peptidsubstrat (AKRRRLSSLRA) in 10 mM MOPS (pH 7), 0,2 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 0,01% β-Mercaptoethanol, 0,1 mg/mL Rinderserumalbumin, 0,001% Brij-35, 0,5% Glycerin und 15 μM ATP (2,3 Ci/mmol) 60 Minuten lang inkubiert. Für CDK2 werden das CDK2/Cyclin A-Enzym und 0,12 μg/mL Histon H1 in 20 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-Glycerophosphat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM Natriumorthovanadat, 1 mM DTT, 0,1 mg/mL Rinderserumalbumin und 45 μM ATP (0,78 Ci/mmol) 4 Stunden lang inkubiert. Die Assay-Reaktionen werden durch Zugabe eines Überschusses an Orthophosphorsäure gestoppt, und die gestoppte Reaktionsmischung wird dann auf Millipore MAPH-Filterplatten übertragen und filtriert. Die Platten werden dann gewaschen, Szintillationsmittel wird hinzugefügt, und die Radioaktivität wird durch Szintillationszählung auf einem Packard TopCount gemessen. Die IC50-Werte werden aus Replikationskurven mit der GraphPad Prism-Software berechnet. Akt1- und Akt3-Enzymassays werden durchgeführt.
In vivo
AT7867 zeigt eine Bioverfügbarkeit von 44% bei Mäusen über den p.o.-Weg. Diese Verbindung konnte das gespaltene PARP in MES-SA-Xenotransplantaten bei 20 mg/kg i.p. oder 90 mg/kg p.o. erhöhen. Sie hemmt signifikant das Tumorwachstum in MES-SA-Xenotransplantaten oder U87MG-Xenotransplantaten mit T/C von 0,37 bzw. 0,51.
Literatur