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LDN-193189 Dihydrochloride BMP-Signalweg-Inhibitor

Kat.-Nr.S7507

LDN-193189 (DM3189) 2HCl ist ein selektiver BMP-Signalweg-Inhibitor, der ALK1, ALK2, ALK3 und ALK6 mit IC50-Werten von 0,8 nM, 0,8 nM, 5,3 nM bzw. 16,7 nM im Kinase-Assay hemmt. LDN-193189 hemmt die transkriptionelle Aktivität der BMP-Typ-I-Rezeptoren ALK2 und ALK3 mit IC50-Werten von 5 nM bzw. 30 nM in C2C12-Zellen und zeigt eine 200-fache Selektivität für BMP gegenüber TGF-β.
LDN-193189 Dihydrochloride TGF-beta/Smad Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 479.4

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.59%
99.59

Produkte, die oft zusammen verwendet werden mit LDN-193189 Dihydrochloride

SB431542

When used together with SB43154, it promotes scalable generation of hPSC-derived nociceptors.

K02288

Treatment with this compound and K02288 significantly compromises trophoblast trans-differentiation induced by Cited1 overexpression in E14T ESCs.

IWP-2

It and IWP2 are used to verify the function of WNT and BMP signaling, during 3D culture of human embryos from E6–14.

ML347

It and ML347 target the BMP receptors ALK2/3/6 and inhibit SMAD1/5/8 phosphorylation without affecting the type I TGF-beta receptor ALK5 or the SMAD2/3 pathway.

SB505124

It completely abolishes BMP12-triggered phosphorylation of Smad1/5/8, but not by the ALK4/5 and 7 inhibitor SB-505124.

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
EOC216 Cell viability assay 0.1, 1, 2, 5, 10 μM 1, 3, 5, 7, 9 days exhibited a dose dependent LDN-induced decrease in viability 25227893
PC3 Function assay 500 nM LDN-193189 repressed activation of Smad1/5/8, and also repressed P-Smad3 levels 22452883
C2C12 Function assay 0.5 μM 1 day LDN-193189 promotes myogenesis 25368322
C2C12 Function assay 30 mins Inhibition of BMP6-induced ALK2 transcriptional activity in mouse C2C12 cells expressing BRE-Luc after 30 mins by luciferase reporter gene assay, EC50 = 0.014 μM. 30227946
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
fibroblast cells qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for control Hh wild type fibroblast cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
C2C12 Function assay 0.1 uM Inhibition of ALK5 in mouse C2C12 cells assessed as decrease in TGFbeta1-induced Smad1/5 phosphorylation at 0.1 uM by Western blot method 28103025
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 479.4 Formel

C25H24Cl2N6

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 1435934-00-1 -- Lagerung von Stammlösungen

Synonyme DM-3189 2HCl Smiles C1CN(CCN1)C2=CC=C(C=C2)C3=CN4C(=C(C=N4)C5=CC=NC6=CC=CC=C56)N=C3.Cl.Cl

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

Water : 24 mg/mL

DMSO : 12 mg/mL (25.03 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Merkmale
Selective BMP type I receptor inhibitor.
Targets/IC50/Ki
ALK1
(Cell-free assay)
0.8 nM
ALK2
(Cell-free assay)
0.8 nM
ALK3
(Cell-free assay)
5.3 nM
ALK6
(Cell-free assay)
16.7 nM
In vitro

LDN193189 hemmt potent die BMP4-vermittelte Smad1-, Smad5- und Smad8-Aktivierung mit einer IC50 von 5 nM und hemmt effizient die transkriptionelle Aktivität der BMP-Typ-I-Rezeptoren ALK2 und ALK3 mit einer IC50 von 5 nM bzw. 30 nM. Darüber hinaus zeigt LDN193189 auch eine hemmende Wirkung auf die transkriptionelle Aktivität, die entweder durch konstitutiv aktive ALK2R206H- oder ALK2Q207D-Mutantenproteine induziert wird.

Eine aktuelle Studie zeigt, dass LDN-193189 die Produktion reaktiver Sauerstoffspezies blockiert, die durch oxidiertes LDL während der Atherogenese in menschlichen aortalen Endothelzellen induziert wird.

Kinase-Assay
Alkalische Phosphatase-Aktivität
C2C12-Zellen werden in 96-Well-Platten mit 2.000 Zellen pro Well in DMEM, ergänzt mit 2 % FBS, ausgesät. Die Wells werden in Vierfachbestimmung mit BMP-Liganden und LDN-193189 oder Vehikel behandelt. Die Zellen werden nach 6 Tagen in Kultur in 50 μL Tris-gepufferter Salzlösung und 1 % Triton X-100 gesammelt. Die Lysate werden für 1 Stunde zu p-Nitro-phenylphosphat-Reagenz in 96-Well-Platten gegeben und dann die Aktivität der alkalischen Phosphatase (Absorption bei 405 nm) evaluiert. Die Zellviabilität und -quantität werden mit Cell Titer Aqueous One (Absorption bei 490 nm) gemessen, wobei replizierte Wells verwendet werden, die identisch zu denen für die alkalische Phosphatase-Messungen behandelt wurden.
In vivo

Bei konditionalen caALK2-transgenen Mäusen mit Ad.Cre am postnatalen Tag 7 (P7) führt LDN-193189 (3 mg/kg i.p.) zu milden Verkalkungen um Tibia und Fibula links, die erstmals an P13 sichtbar sind, und verhindert radiologische Läsionen an P15, ohne Gewichtsverlust oder Wachstumsverzögerung, spontane Frakturen, verringerte Knochendichte oder Verhaltensauffälligkeiten zu verursachen.

LDN193189 dorsalisiert Zebrafisch-Embryonen durch Hemmung von Signalwegen, die durch Knochenmorphogenetisches Protein (BMP)6 induziert werden, ohne Auswirkung auf die Gefäßentwicklung.

In PCa-118b-Tumor-tragenden Mäusen attenuieren LDN-193189-Behandlung das Tumorwachstum und reduziert die Knochenbildung in den Tumoren.

Bei LDL-Rezeptor-defizienten (LDLR-/-) Mäusen hemmt LDN-193189 potent die Entwicklung von Atheromen. Darüber hinaus zeigt LDN-193189 auch hemmende Wirkungen auf die damit verbundene vaskuläre Entzündung, osteogene Aktivität und Verkalkung.

Literatur
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22223731/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23646137/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23646137/

Anwendungen (Applications)

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot pSmad Smad / ID1 / PARP / Cleaved PARP
S7507-WB1
19029982