nur für Forschungszwecke

MLN4924 (Pevonedistat) NAE-Inhibitor

Kat.-Nr.S7109

MLN4924 ist ein niedermolekularer Inhibitor des NEDD8 aktivierenden Enzyms (NAE) mit einem IC50 von 4 nM.

MLN4924 (Pevonedistat) E1 Activating Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 443.52

Springe zu

Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.99%

99.99

Verwandte Ziele	Proteasome E3 Ligase DUB SUMO p97 E2 conjugating
Weitere E1 Activating Inhibitoren	TAK-243 (MLN7243) PYR-41 ML792 Pevonedistat hydrochloride TAS4464 COH000 DKM 2-93 NEDD8 inhibitor M22 PYZD-4409

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Zelllinien	Assay-Typ	Konzentration	Inkubationszeit	Formulierung	Aktivitätsbeschreibung	PMID
K562	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human K562 cells after 72 hrs by CellTiter-Glo assay, EC50 = 0.108 μM.	24900352
U2OS	Antitumor assay		72 hrs		Antitumor activity against human U2OS cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 0.16 μM.	28388520
HCT116	Antitumor assay		72 hrs		Antitumor activity against human HCT116 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 0.19 μM.	28388520
Caco2	Function assay		16 hrs		Inhibition of NAE-mediated Ubcl2-NEDD8 conjugation in human Caco2 cells after 16 hrs by Western blot analysis, EC50 = 3.4 μM.	29232579
Caco2	Function assay		16 hrs		Inhibition of NAE-mediated Ubcl2-NEDD8 conjugation in human Caco2 cells after 16 hrs by Western blot analysis, EC50 = 3.4 μM.	29232579
Caco2	Cytotoxicity assay		72 hrs		Cytotoxicity against human Caco2 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 4.4 μM.	29232579
Klicken Sie hier, um weitere experimentelle Daten zu Zelllinien anzuzeigen

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht	443.52	Formel	C₂₁H₂₅N₅O₄S	Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)	3 Jahre-20°CPulver
CAS-Nr.	905579-51-3	SDF herunterladen		Lagerung von Stammlösungen	1 Jahr-80°Cin Lösungsmittel 1 Monat-20°Cin Lösungsmittel

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 89 mg/mL (200.66 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 22 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 89 mg/mL (200.66 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 89 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 89 mg/mL (200.66 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 89 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 89 mg/mL (200.66 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 45 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 89 mg/mL (200.66 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 22 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse	Konzentration	Volumen	Molekulargewicht
=	×	×

Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo Charge:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5% DMSO 1 30% PEG 300 2 5% Tween 80 3 ddH2O Von Selleck Labs validiert. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, kontaktieren Sie unser Verkaufsteam für kundenspezifische Tests.	4.000mg/ml (9.02mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 80 mg/ml clarified DMSO stock solution to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween-80 to the above system, mix evenly to clarify it; Then continue to add 600 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

Dosierung: mg/kg Durchschnittsgewicht der Tiere: g Dosiervolumen pro Tier:μL Anzahl der Tiere:

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH₂O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Merkmale	A mechanism-based inhibitor of NAE, and creates a covalent NEDD8-MLN4924 adduct catalyzed by the enzyme.
Targets/IC₅₀/Ki	NAE (Cell-free assay) 4 nM
In vitro	Pevonedistat (MLN4924) ist strukturell verwandt mit Adenosin-59-Monophosphat (AMP) – einem stark bindenden Produkt der NAE-Reaktion. Es (3 μM) hemmt selektiv NAE in HCT-116-Zelllysaten und hemmt den gesamten Proteinumsatz um <9% in HCT-116-Zellen. Diese Verbindung führt zu einer dosisabhängigen Abnahme von Ubc12–NEDD8-Thioester und NEDD8–Cullin-Konjugaten mit einer IC50 < 0,1 μM in HCT-116-Zellen, was zu einem reziproken Anstieg der Häufigkeit der bekannten CRL-Substrate CDT1, p27 und NRF2, aber nicht von Nicht-CRL-Substraten, führt. Es (3 μM) führt dazu, dass sich Zellen bereits nach 8 Stunden in der S-Phase ansammeln und nach 24 Stunden in HCT-116-Zellen ein signifikanter Anteil der Zellen 4N-DNA-Gehalt aufweist. Bei gleicher Konzentration führt es zu einer schnellen Akkumulation von pIkappaBalpha, einer Abnahme des nuklearen p65-Gehalts, einer Reduktion der transkriptionellen Aktivität des nukleären Faktors-kappaB (NF-kappaB) und einem G(1)-Arrest, was letztendlich zur Apoptose-Induktion führt, Ereignisse, die mit einer potenten NF-kappaB-Signalweg-Hemmung in ABC-DLBCL-Zellen übereinstimmen. Bei 1 μM löst es die DNA-Replikation aus und hemmt die Zellproliferation durch Stabilisierung des DNA-Replikationsfaktors Cdt1, einem Substrat der Culline 1 und 4. Diese Konzentration, die ausreicht, um Cdt1 für 4-5 Stunden zu erhöhen, ist ausreichend, um die DNA-Replikation zu induzieren und Apoptose- und Seneszenz-Signalwege zu aktivieren. Die Behandlung mit dieser Verbindung induziert die Merkmale von Seneszenz-Phänotypen, wie durch vergrößerte und abgeflachte zelluläre Morphologie und positive Färbung von Seneszenz-assoziiertem β-Gal belegt. MLN4924-induzierte Seneszenz ist mit der zellulären Reaktion auf DNA-Schäden verbunden, ausgelöst durch die Akkumulation der DNA-Lizenzierungs-Proteine CDT1 und ORC1, als Folge der Inaktivierung von CRL/SCF E3s. Sie ist irreversibel und gekoppelt mit persistierender Akkumulation von p21 und anhaltender Aktivierung der DNA-Schadensreaktion.
Kinase-Assay	In vitro E1 Activating Enzymtests
Kinase-Assay	Ein zeitaufgelöster Fluoreszenz-Energie-Transfer-Assay-Format wird verwendet, um die In-vitro-Aktivität von NAE zu messen. Die enzymatische Reaktion, enthaltend 50 μL 50 mM HEPES, pH 7,5, 0,05 % BSA, 5 mM MgCl₂, 20 μM ATP, 250 μM Glutathion, 10 nM Ubc12–GST, 75 nM NEDD8–Flag und 0,3 nM rekombinantes humanes NAE-Enzym, wird 90 Min. lang bei 24 ℃ in einer 384-Well-Platte inkubiert, bevor sie mit 25 μL Stopp-/Detektionspuffer (0,1 M HEPES, pH 7,5, 0,05 % Tween20, 20 mM EDTA, 410 mM KF, 0,53 nM Europium-Cryptate-markiertem monoklonalem Flag-M2-spezifischem Antikörper und 8,125 μg/mL PHYCOLINK Allophycocyanin (XL-APC)-markiertem GST-spezifischem Antikörper) beendet wird. Nach 2-stündiger Inkubation bei 24 ℃ wird die Platte mit dem LJL Analyst HT Multi-Mode Instrument unter Verwendung einer zeitaufgelösten Fluoreszenzmethode abgelesen. Ein ähnliches Assay-Protokoll wird verwendet, um andere E1-Enzyme zu messen.
In vivo	Pevonedistat (MLN4924) (60 mg/kg) führt zu einer dosis- und zeitabhängigen Abnahme der NEDD8–Cullin-Spiegel bereits 30 Minuten nach der Verabreichung bei HCT-116-Tumor-tragenden Mäusen, mit maximaler Wirkung 1–2 Stunden nach der Dosis. Es führt auch zu einem dosis- und zeitabhängigen Anstieg der Steady-State-Spiegel von NRF2 und CDT1 bei HCT-116-Tumor-tragenden Mäusen. Diese Verbindung führt zu DNA-Schäden im Tumor, angezeigt durch erhöhte Spiegel von phosphoryliertem CHK1 bei HCT-116-Tumor-tragenden Mäusen. Bei BID-Verabreichung von 30 mg/kg und 60 mg/kg hemmt es das Tumorwachstum mit T/C-Werten von 0,36 bzw. 0,15 bei Mäusen mit HCT-116-Xenografts. Es (60 mg/kg) blockiert NAE-Signalweg-Biomarker und führt zu einer vollständigen Tumorwachstumshemmung bei Mäusen mit humanen Xenograft-Tumoren von ABC- und GCB-DLBCL. Diese Verbindung (60 mg/kg) führt zu einer NF-kappaB-Signalweg-Hemmung, begleitet von Tumorregressionen in primären humanen Tumormausmodellen von ABC-DLBCL.
Literatur	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19360080/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20525923/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21159650/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21677879/

Anwendungen (Applications)

Methoden	Biomarker	Bilder	PMID
Western blot	Culin 3 / CDT2 / CDT1 / SET8 / p21 / p-p53 / p-CHK1 / p-CHK2 / CHK2 / γH2AX / H2AX / PARP / c-PARP Culin 1 / WEE1 / p27 / p-H3 / cyclin B1 Cleaved caspase-3 / Cleaved PARP pro-apoptotic and anti-apoptotic proteins p-c-Jun / c-Jun p-H2A / p-CHK2 p-AKT / p-mTOR / p-70S6K		28838998
Immunofluorescence	RhoB / VE-cadherin / F-actin		29358211
Growth inhibition assay	Cell viability		27333051

Klinische Studieninformationen (Clinical Trial Information)

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2024-05-22)

NCT-Nummer	Rekrutierung	Erkrankungen	Sponsor/Kooperationspartner	Startdatum	Phasen
NCT04985656	Withdrawn	Myelodysplastic Syndromes (MDS)	Takeda	October 1 2021	Phase 2
NCT04800627	Terminated	Locally Advanced Malignant Solid Neoplasm\|Metastatic Malignant Solid Neoplasm\|Unresectable Malignant Solid Neoplasm	M.D. Anderson Cancer Center	March 29 2021	Phase 1\|Phase 2
NCT04266795	Active not recruiting	Acute Myeloid Leukemia (AML)	Takeda	October 13 2020	Phase 2
NCT03770260	Completed	Recurrent Multiple Myeloma\|Refractory Multiple Myeloma	National Cancer Institute (NCI)	February 10 2020	Phase 1
NCT04172844	Active not recruiting	Acute Myelogenous Leukemia	Medical College of Wisconsin	January 13 2020	Phase 1

product.CellLines}	product.AssayType}	product.Concentration}	product.IncubationTime}	product.Formulation}	product.ActivityDescription}	PMID

Verdünnungsrechner

Berechnen Sie die erforderliche Verdünnung zur Herstellung einer Stammlösung. Der Selleck-Verdünnungsrechner basiert auf der folgenden Gleichung:

Konzentration _(Start) x Volumen _(Start) = Konzentration _(Ende) x Volumen _(Ende)

Diese Gleichung wird üblicherweise abgekürzt als: C1V1 = C2V2 ( Eingabe Ausgabe )

*Verwenden Sie bei der Herstellung von Stammlösungen immer das chargenspezifische Molekulargewicht des Produkts, das auf dem Etikett des Vials und im MSDS / COA (online verfügbar) angegeben ist.

Die Gleichung des Seriellen Verdünnungsrechners

Serielle Verdünnungen

Konzentration (Start):

Verdünnungsfaktoren:

Berechnetes Ergebnis

C1=C0/X	C1:		LOG(C1):
C2=C1/X	C2:		LOG(C2):
C3=C2/X	C3:		LOG(C3):
C4=C3/X	C4:		LOG(C4):
C5=C4/X	C5:		LOG(C5):
C6=C5/X	C6:		LOG(C6):
C7=C6/X	C7:		LOG(C7):
C8=C7/X	C8:		LOG(C8):