Home Protein Tyrosine Kinase EGFR Inhibitor Poziotinib (NOV120101, HM781-36B)

nur für Forschungszwecke

Poziotinib (NOV120101, HM781-36B) EGFR Inhibitor

Kat.-Nr.: S7358

Poziotinib ist ein irreversibler Pan-HER-Inhibitor mit IC50 von 3,2 nM, 5,3 nM und 23,5 nM für HER1, HER2 bzw. HER4. Poziotinib induziert auch apoptosis und G1-Zellzyklus-Arrest. Phase 2.
Poziotinib (NOV120101, HM781-36B) EGFR Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 491.34

Springe zu

Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.37%
99.37

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
A431 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human A431 cells expressing wild type EGFR incubated for 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.0009 μM. 28754471
SKBR3 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human SKBR3 cells expressing wild type HER2 incubated for 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.001 μM. 28754471
Ba/F3 Function assay Inhibition of human EGFR T790M/L858R mutant expressed in mouse Ba/F3 cells, IC50 = 0.0022 μM. 28754471
insect cells Function assay Inhibition of GST-tagged human EGFR catalytic domain expressed in insect cells, IC50 = 0.0032 μM. 28754471
Ba/F3 Function assay Inhibition of human EGFR T790M mutant expressed in mouse Ba/F3 cells, IC50 = 0.0042 μM. 28754471
insect cells Function assay Inhibition of GST-tagged human HER2 catalytic domain expressed in insect cells, IC50 = 0.0053 μM. 28754471
NCI-H1975 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human NCI-H1975 cells expressing EGFR T790M/L858R mutant incubated for 72 hrs by MTS assay, IC50 = 0.0057 μM. 28754471
HS27 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HS27 cells expressing wild type HER2 incubated for 72 hrs by MTS assay, GI50 = 3.83 μM. 28754471
SKBR3 Anticancer assay 72 hrs Anticancer activity against Erb-B2 overexpressing human SKBR3 cells assessed as cell growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, ID50 = 0.0003 μM. ChEMBL
A431 Anticancer assay 72 hrs Anticancer activity against EGFR overexpressing human A431 cells assessed as cell growth inhibition after 72 hrs by SRB assay, ID50 = 0.0004 μM. ChEMBL
Sf21 Function assay 10 mins Inhibition of N-terminal GST-tagged human EGFR (696 to end residues) expressed in baculovirus infected Sf21 cells using poly (Glu,Tyr)4:1 as substrate preincubated for 10 mins followed by substrate addition measured after 1 hr by fluorescence polarization, IC50 = 0.0013 μM. ChEMBL
NCI-H1975 Anticancer assay 48 hrs Anticancer activity against human NCI-H1975 cells assessed as cell growth inhibition after 48 hrs by celltiter one shot solution assay, IC50 = 0.0027 μM. ChEMBL
Sf21 Function assay 10 mins Inhibition of N-terminal GST-tagged recombinant human EGFR T790M mutant expressed in baculovirus infected Sf21 cells using poly (Glu,Tyr)4:1 as substrate preincubated for 10 mins followed by substrate addition measured after 1 hr by fluorescence polarizat, IC50 = 0.0044 μM. ChEMBL
Klicken Sie hier, um weitere experimentelle Daten zu Zelllinien anzuzeigen

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 491.34 Formel

C23H21Cl2FN4O3

 Lagerung (Ab dem Eingangsdatum)
CAS-Nr. 1092364-38-9 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme HM781-36B, NOV120101 Smiles COC1=C(C=C2C(=C1)N=CN=C2NC3=C(C(=C(C=C3)Cl)Cl)F)OC4CCN(CC4)C(=O)C=C

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 98 mg/mL (199.45 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewichtsrechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie die untenstehenden Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier zur Berücksichtigung von Verlusten während des Experiments)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, keine Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn es im Abschnitt "Löslichkeit" keine In-vivo-Formulierung gibt.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammlösung: mg Wirkstoff vorgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammlösung mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügenμL PEG300, mischen und klären, dann hinzufügenμL Tween 80, mischen und klären, dann hinzufügen μL ddH2O, mischen und klären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammlösung, dann hinzufügen μL Maisöl, mischen und klären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, das/die Lösungsmittel der Reihe nach hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die bei der vorherigen Zugabe erhaltene Lösung eine klare Lösung ist, bevor Sie mit der Zugabe des nächsten Lösungsmittels fortfahren. Physikalische Methoden wie Vortex, Ultraschall oder ein heißes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösens verwendet werden.

Wirkmechanismus (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
HER1
(Cell-free assay)
3.2 nM
HER2
(Cell-free assay)
5.3 nM
HER4
(Cell-free assay)
23.5 nM
In vitro
Poziotinib hemmt spezifisch das Zellwachstum in HER2-amplifizierten Magenkrebszellen und hemmt die Phosphorylierung von EGFR und Schlüsselkomponenten nachgeschalteter Signalkaskaden wie STAT3, AKT und ERK. Diese Verbindung induziert auch Apoptose und G1-Zellzyklusarrest durch Aktivierung des mitochondrialen Signalwegs in HER2-amplifizierten Magenkrebszellen. Darüber hinaus übt es synergistische Effekte mit chemotherapeutischen Mitteln sowohl in HER2-amplifizierten als auch in HER2-nicht-amplifizierten Magenkrebszellen aus.
Kinase-Assay
Enzymaktivitäts-Assay
Zur Bestimmung der IC50-Werte von Poziotinib für die Kinasehemmung werden die Enzyme von EGFR, HER2 und HER4 als rekombinante Proteine in Sf9-Insektenzellen exprimiert. Anschließend wird ein Enzymselektivitätsscreening mit einem Tyrosinkinase-Assay-Kit durchgeführt. Kurz gesagt, die Reaktionen werden in 96-Well-Polystyrol-Rundbodenplatten durchgeführt, die Kinasepuffer bestehend aus 100 mM HEPES (pH 7,4), 25 mM MgCl2, 10 mM MnCl2 und 250 μM Na3VO4 enthalten. Die Reaktionen werden durch Zugabe von 100 ng/Assay-Enzym, 100 μM ATP und 10 ng/mL Poly(Glu, Tyr) initiiert. Nach 1 Stunde Inkubation bei Raumtemperatur werden die Reaktionen durch Zugabe von 6 mM EDTA-Lösung und anschließend Anti-Phosphotyrosin-Antikörper, PTK Green Tracer und FP-Verdünnungspuffergemischen beendet. Die Fluoreszenzpolarisationswerte werden dann nach 30 Minuten bei Raumtemperatur mit einem Victor3-Mikroplattenlesegerät gemessen. Schließlich wurden die IC50-Werte mit der folgenden Gleichung berechnet: Y = bottom + (top–bottom)/(1 + 10(X-logIC50)).
In vivo
Bei Nacktmäusen mit N87-Xenotransplantaten für menschlichen Magenkrebs hemmt Poziotinib (0,5 mg/kg p.o.) allein das Tumorwachstum signifikant, und die Koadministration dieser Verbindung und 5-FU führt zu einer effektiveren Tumorhemmung. Darüber hinaus zeigt diese Verbindung eine ausgezeichnete Antitumoraktivität in einer Vielzahl von EGFR- und HER-2-abhängigen Tumor-Xenotransplantatmodellen, einschließlich erlotinib-sensitiver HCC827 NSCLC-Zellen, erlotinib-resistenter NCI-H1975 NSCLC-Zellen, HER-2-überexprimierender Calu-3 NSCLC-Zellen, NCI-N87 Magenkrebszellen, SK-Ov3 Eierstockkrebszellen und EGFR-überexprimierender A431 Plattenepithelkarzinomzellen.
Literatur

Anwendungen (Applications)

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot Cleaved caspase-3 / Cleaved caspase-9 / PARP / Bcl-2 pEGFR / EGFR / pHER2 / HER2 / BMX / pERK / ERK / pAKT / AKT
S7358-WB1
25761479
Growth inhibition assay Cell viability
S7358-viability1
25761479

Klinische Studieninformationen (Clinical Trial Information)

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2024-05-22)

NCT-Nummer Rekrutierung Erkrankungen Sponsor/Kooperationspartner Startdatum Phasen
NCT04436562 Completed
Healthy
Spectrum Pharmaceuticals Inc
 May 29 2020 Phase 1
NCT03804515 Terminated
Solid Tumor
Spectrum Pharmaceuticals Inc
 June 25 2019 Phase 1