Pimasertib (AS-703026)

Katalog-Nr.S1475 Charge:S147503

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Technische Daten

Formel

C15H15FIN3O3
Molekulargewicht 431.20 CAS-Nr. 1236699-92-5
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 86 mg/mL (199.44 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Pimasertib (AS-703026, MSC1936369B, SAR 245509) ist ein hochselektiver, potenter, ATP-nicht-kompetitiver allosterischer Inhibitor von MEK1/2 mit einem IC50 von 5 nM-2 μM in MM-Zelllinien. Phase 2.
Ziele
MEK1/2 (MM cell line)
(Cell-free assay)
5 nM-2 μM
In vitro AS703026 ist ein neuartiger, selektiver, oral bioverfügbarer MEK1/2-Inhibitor, der an die charakteristische allosterische MEK-Bindungsstelle bindet und daher eine exquisite Kinase-Selektivität aufweist. AS703026 hemmt das Wachstum und Überleben menschlicher Multiples Myelom (MM)-Zellen, einschließlich U266 und INA-6, mit IC50-Werten von 5 nM bzw. 11 nM. Ein solcher Hemmeffekt von AS703026 wird durch einen G0-G1-Zellzyklusarrest vermittelt und geht mit einer reduzierten Expression des MAF-Onkogens einher. AS703026 induziert ferner die Apoptose über Caspase-3- und PARP-Spaltung in MM-Zellen, sowohl in Anwesenheit als auch in Abwesenheit von Knochenmark-Stromazellen (BMSCs). AS703026 könnte eine wirksame Therapie bei Darmkrebs sein, der durch eine K-Ras-Mutation verursacht wird. AS703026 (10 μM) hemmt effektiv den ERK-Signalweg, die Proliferation und die Transformation in menschlichen DLD-1-Darmkrebszellen, die ein mutiertes K-Ras-Allel (D-MUT) tragen.
In vivo AS703026 (15 und 30 mg/kg) hemmt signifikant das Tumorwachstum in einem humanen Plasmozytom-Xenograftmodell von H929 MM-Zellen. Dies korreliert mit einer herunterregulierten pERK1/2, induzierter PARP-Spaltung und verringerten Mikrogefäßen. AS703026 (10 mg/kg) hemmt das Tumorwachstum und verringert den p-ERK-Spiegel in einem Xenograft-Mausmodell eines humanen K-Ras-mutierten (D-MUT) kolorektalen Tumors deutlich.
Merkmale Ein neuartiger, hochselektiver und potenter allosterischer Inhibitor von MEK1/2.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[3]
  • MEK1-Enzymassays

    AS703026 wird in 2,5% DMSO gelöst. Aktivierte diphosphorylierte MEK (pp-MEK)-Assays enthielten 40 μM 33P-γATP (AppKm 8,5 μM), 0,5 nM human-aktiviertes MEK1 oder MEK2, 1 μM Kinase-inaktives ERK2 (AppKm 0,73 μM). Alle Assays wurden in einem Puffer durchgeführt, der 20 mM HEPES (pH 7,2), 5 mM 2-Mercaptoethanol, 0,15 mg/mL BSA und 10 mM MgCl2 enthielt. Die Endkonzentration von 33P-ATP betrug 0,02 μCi/μL für alle Assays. pp-MEK-Kinase-Reaktionen wurden nach 40 min gestoppt, indem 30 μL der Reaktionsmischung auf Durapore 0,45-μm-Filterplatten mit 12,5% TCA überführt wurden. Filter wurden getrocknet und mit Flüssigszintillator auf einem TopCount ausgelesen. Konzentrations-Wirkungsdaten wurden zur Bestimmung des IC50 analysiert. 0,2 nM rekombinantes humanes MEK1 oder MEK2 wurde 40 Minuten lang mit Vehikel oder mit AS703026 in Reaktionspuffer vorinkubiert, um den IC50 von anfänglich unphosphoryliertem MEK (u-MEK) zu bestimmen. Die Phosphorylierung/Aktivierung wurde durch Zugabe einer Endkonzentration von 20 nM B-RafV600E und 30 μM ATP für 10 Minuten eingeleitet. Die B-Raf-Aktivität wurde dann durch Zugabe des B-Raf-Inhibitors SB590885 (Endkonzentration 100 nM) gelöscht, und die MEK-Kinase-Aktivität wurde durch Zugabe von 1 μM KD-ERK2 und 0,02 μCi/μL 33P-ATP in Reaktionspuffer bestimmt. Die Kinase-Reaktionen wurden nach 90 Minuten gestoppt, indem 30 μL der Reaktionsmischung auf eine Durapore-Filterplatte überführt und wie oben ausgelesen wurden.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    U266 and INA-6 cells

  • Konzentrationen

    2 nM - 20 μM (stock: 10 mM in DMSO)

  • Inkubationszeit

    48 hours

  • Methode

    Cytotoxicity assays for AS703026 are assessed by measuring both [3H]thymidine incorporation and MTT dye absorbance. Cells (1 × 104 per well) are cultured in 96-well plates for 3 days. For the [3H]thymidine incorporation assay, cells are pulsed with 18.5 kBq/well [3H]thymidine for 6 hours, harvested onto glass fibre filters, and counted in a β-scintillation counter. Cell cycle analysis is assessed by propidium iodide (PI) staining using flow cytometry. AS703026-induced apoptosis is determined by annexin-V/PI staining and flow cytometric data analysis.

Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    H929 MM xenografts are established in CB17 (SCID) mice

  • Dosierungen

    15 or 30 mg/kg

  • Verabreichung

    Oral gavage twice daily

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20331454/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21118963/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21245089/

Kundenproduktvalidierung

Western blot analysis showing HSP27 up-regulation on treatment of MKN-45 cells with the 2 indicated MEK1/2 kinase inhibitors (AS703026: 0.5 uM; PD98059: 10 uM) for the indicated time. Inset: effectiveness of the inhibitors in reducing Erk1/2 phosphorylation.

Daten von [ FASEB J , 2014 , 10.1096/fj.13-247924 ]

GH+E2-induced ERK phosphorylation was examined by Western Blot in T47D cells pre-treated with increasing doses of AS703026.

Daten von [ Endocrinology , 2013 , 154(9), 3219-27 ]

<p>After starved in serum-free medium for 24h, T47D cells incubated with the indicated concentrations of AS703026 for 3h,followed by 20-minute stimolation of 100ng/ml EGF.</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Western blot of brains of mice (WT mice received p.o. administration of 1, 2, or 5 mg/kg pimasertib. Data are means±SD; n54; *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001.

Daten von [ , , Int J Cancer, 2018, 142(2):381-391 ]

Sellecks Pimasertib (AS-703026) Wurde zitiert von 48 Publikationen

Anthrax ET activates Rac1 and RTK signaling to induce F-actin reorganization and endothelial permeability [ iScience, 2025, 28(11):113682] PubMed: 41158867
Therapeutic Potential of Glutaminase Inhibition Targeting Metabolic Adaptations in Resistant Melanomas to Targeted Therapy [ Int J Mol Sci, 2025, 26(17)8241] PubMed: 40943167
Changes in Melanoma Cell Morphology Following Inhibition of Cell Invasion by Third-Generation mTOR Kinase Inhibitors [ Int J Mol Sci, 2025, 26(16)7770] PubMed: 40869090
ATP1A1 is a promising new target for melanoma treatment and can be inhibited by its physiological ligand bufalin to restore targeted therapy efficacy [ Cancer Cell Int, 2024, 24(1):8] PubMed: 38178183
Salmonella effector SopB reorganizes cytoskeletal vimentin to maintain replication vacuoles for efficient infection [ Nat Commun, 2023, 14(1):478] PubMed: 36717589
ETS1 phosphorylation at threonine 38 is associated with the cell of origin of diffuse large B cell lymphoma and sustains the growth of tumour cells [ Br J Haematol, 2023, 10.1111/bjh.19018] PubMed: 37584198
Three generations of mTOR kinase inhibitors in the activation of the apoptosis process in melanoma cells [ J Cell Commun Signal, 2023, 17(3):975-989] PubMed: 37097377
A Cell Cycle-Dependent Ferroptosis Sensitivity Switch Governed by EMP2 [ bioRxiv, 2023, 2023.07.19.549715] PubMed: 37502927
Anatomic position determines oncogenic specificity in melanoma [ Nature, 2022, 604(7905):354-361] PubMed: 35355015
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575] PubMed: 35326726

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