BIX 02188

Katalog-Nr.S1530 Charge:S153001

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Technische Daten

Formel

C25H24N4O2
Molekulargewicht 412.48 CAS-Nr. 1094614-84-2
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 43 mg/mL (104.24 mM)
Ethanol 3 mg/mL (7.27 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung BIX02188 ist ein selektiver Inhibitor von MEK5 mit einer IC50 von 4,3 nM, hemmt auch die katalytische Aktivität von ERK5 mit einer IC50 von 810 nM und hemmt eng verwandte Kinasen MEK1, MEK2, ERK2 und JNK2 nicht.
Ziele
MEK5
4.3 nM
In vitro BIX02188 blockiert signifikant die katalytische Aktivität von MEK5 mit einer IC50 von 4,3 nM und hemmt die katalytische Aktivität von ERK5 mit einer IC50 von 0,83 μM. Es zeigt keine Aktivität gegen eng verwandte Kinasen MEK1, MEK2, ERK1, p38α, JNK2, TGFβR1, EGFR und STK16 mit IC50-Werten von 1,8 μM für TGFβR1, 3,9 μM für p38α und >6,3 μM für andere Kinasen. Die Vorbehandlung mit BIX02188 hemmt die Sorbit-induzierte Phosphorylierung von ERK5 in HeLa-Zellen dosisabhängig und zeigt keine hemmende Wirkung gegen die Phosphorylierung von ERK1/2, p38 und JNK1/2 MAPKs. Eine alleinige Behandlung mit BIX02188 über 24 Stunden in HeLa- oder HEK293-Zellen zeigt keine zytotoxische Wirkung. BIX02188 hemmt die transkriptionelle Aktivierung von MEF2C durch die MEK5/ERK5-Signaltransduktionskaskade in einem aktiven MEK5/ERK5/MEF2C-gesteuerten Luciferase-Expressionssystem in HeLa- und HEK293-Zellen mit IC50-Werten von 1,15 μM bzw. 0,82 μM. BIX02188 hemmt auch die Phosphorylierung von BMK1 in bovinen Lungenmikrovaskulären Endothelzellen (BLMECs), die mit 300 μM H2O2 stimuliert werden, dosisabhängig mit einer IC50 von 0,8 μM, spezifisch durch Blockierung des MEK5-Signalweges. BIX02188 kehrt den hemmenden Effekt auf die TNF-Vermittlung vollständig um; die JNK-Aktivierung hatte einen ähnlichen Effekt auf die BMK1-Hemmung, was darauf hindeutet, dass es die TNF-Signalisierung durch Aktivierung des MEK5-BMK1-Signalweges hemmt.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • Katalytischer Test

    MEK5-Protein, isoliert aus einem Baculovirus-Expressionssystem, wird zur Messung der Kinaseaktivität unter Verwendung des PKLight ATP Detection Reagent verwendet. Der Test wird mit 15 nM GST-MEK5 und 0,75 μM ATP in einem Testpuffer durchgeführt, der aus 25 mM Hepes, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 50 mM KCl, 0,2 % BSA, 0,01 % CHAPS, 100 μM Na3VO4, 0,5 mM DTT und 1 % DMSO in Gegenwart variierender Konzentrationen von BIX02188 besteht. Das Kinase-Reaktionsgemisch wird 90 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert, gefolgt von der Zugabe von 10 μL eines ATP-Detektionsreagenzes für 15 Minuten. Das Signal der relativen Lichteinheit (RLU) wird gemessen und die RLU-Signale werden in Prozent der Kontrolle (POC)-Werte für die Bestimmung des IC50-Wertes umgewandelt.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    HeLa cells

  • Konzentrationen

    Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM

  • Inkubationszeit

    Pretreatment for 1.5 hours

  • Methode

    The cells are serum starved for 20 hours prior to stimulation with sorbitol at a final concentration of 0.4 M for 20 minutes at 37 °C. BIX02188 is added 1.5 hours prior to the addition of sorbitol. The cells are harvested and lysed in 50 μL RIPA buffer containing Halt protease and phosphate inhibitors at 4 °C for 5-10 minutes. The lysates are centrifuged for 10 minutes at 14,000 rpm and 50 μL lysate is added to 50 μl 2× sample buffer and boiled for 4 minutes at 95 °C. A 20 µl sample is run on SDS–PAGE 10% Tris-glycine gels and transferred to nitrocellulose. Western blotting is done with appropriate antibodies.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18834865/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18358237/

Kundenproduktvalidierung

<p>Retrograde NGF increased BDNF expression in sensory neurons, which was mediated by the MEK/ERK pathway. In two-compartmented DRG-nerve culture, NGF (50 ng/mL) was added to the chamber containing the sensory axonal terminals. The expression of BDNF was examined in the DRG neuronal soma located in another chamber. After 12 h of NGF treatment, the level of BDNF was increased in the sensory neuronal cell bodies by 3 fold (compare B to A) when compared to control (E). The role of the MEK/ERK pathway in retrograde NGF-triggered BDNF up-regulation was determined by pre-treatment of the ganglia with inhibitors U0126 (C), PD98059 (D) or BIX02188 (E). All inhibitors significantly reduced NGF-evoked BDNF up-regulation in the ganglia when compared to vehicle treatment (F). Results were from 4 independent experiments for each treatment. Bar=80 μm. *, p＜0.05 vs all groups.</p>

Daten von [ Exp Neurol , 2012 , 238(2), 209-17 ]

Intracellular location of CD3ζ (left) and CD3ε (right). Activated human T CD4+ cells were treated with DMSO, BIX02188 (10 μM), or XMD8-92 (10 μM) for 1 h at 37°C, permeabilized, and stained with antibodies against CD3ζ (green) or CD3ε (green) and LAMP-1 (red). The samples were visualized by confocal microscopy, and representative images are presented. Original scale bars, 10 mm; n = 2.

Daten von [ , , J Leukoc Biol, 2016, 99(1):143-52 ]

Sellecks BIX 02188 Wurde zitiert von 13 Publikationen

Enhanced Long-Term Antibacterial and Osteogenic Properties of Silver-Loaded Titanium Dioxide Nanotube Arrays for Implant Applications [ Int J Nanomedicine, 2025, 20:3749-3764] PubMed: 40162336
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 14(11):715] PubMed: 37919293
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 10.1038/s41419-023-06229-6] PubMed: 37919293
Non-canonical Targets of HIF1a Impair Oligodendrocyte Progenitor Cell Function [ Cell Stem Cell, 2021, 28(2):257-272.e11] PubMed: 33091368
ERK5 Inhibition Induces Autophagy-Mediated Cancer Cell Death by Activating ER Stress [ Front Cell Dev Biol, 2021, 9:742049] PubMed: 34805151
Tumor-derived exosomes antagonize innate antiviral immunity. [ Nat Immunol, 2018, 19(3):233-245] PubMed: 29358709
Dual role of ERK5 in the regulation of T cell receptor expression at the T cell surface [Rovira-Clavé X, et al. J Leukoc Biol, 2016, 99(1):143-52] PubMed: 26302753
BAFF activation of the ERK5 MAP kinase pathway regulates B cell survival. [ J Exp Med, 2015, 212(6):883-92] PubMed: 25987726
Erk5 inhibits endothelialmigration via KLF2-dependent down regulation of PAK1 [Komaravolu RK, et al. Cardiovasc Res, 2015, 105(1):86-95] PubMed: 25388666
Increased IGF-IEc expression and mechano-growth factor production in intestinal muscle of fibrostenotic Crohn's disease and smooth muscle hypertrophy [ Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2015, 309(11):G888-99] PubMed: 26428636

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