BIX 02189

Katalog-Nr.S1531 Charge:S153102

Drucken

Technische Daten

Formel

C27H28N4O2
Molekulargewicht 440.54 CAS-Nr. 1094614-85-3
Löslichkeit (25°C)* In vitro Ethanol 80 mg/mL (181.59 mM)
DMSO 60 mg/mL (136.19 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung BIX02189 ist ein selektiver Inhibitor von MEK5 mit einer IC50 von 1,5 nM, der auch die katalytische Aktivität von ERK5 mit einer IC50 von 59 nM in zellfreien Assays hemmt und eng verwandte Kinasen wie MEK1, MEK2, ERK2 und JNK2 nicht hemmt.
Ziele
MEK5
(Cell-free assay)		 ERK5
(Cell-free assay)
1.5 nM 59 nM
In vitro BIX02189 blockiert die katalytische Aktivität von MEK5 und ERK5 mit IC50-Werten von 1,5 nM bzw. 59 nM. Sie sind potenter als der Effekt, der durch BIX02188 mit IC50-Werten von 4,3 nM bzw. 810 nM verursacht wird. BIX02189 zeigt eine hemmende Aktivität gegen CSF1R (FMS) mit einer IC50 von 46 nM, aber keine Aktivität gegen verwandte Kinasen MEK1, MEK2, ERK1, p38α, JNK2, EGFR und STK16 mit IC50-Werten von >3,7 μM. Eine Vorbehandlung mit BIX02189 hemmt die Sorbit-induzierte Phosphorylierung von ERK5 in HeLa-Zellen dosisabhängig und zeigt keine hemmende Aktivität gegen die Phosphorylierung von ERK1/2, p38 und JNK1/2 MAPKs. Die Behandlung mit nur BIX02189 für 24 Stunden in HeLa- oder HEK293-Zellen zeigt keine zytotoxische Wirkung. BIX02189 hemmt die MEK5/ERK5/MEF2C-getriebene Luciferase-Expression in HeLa- und HEK293-Zellen mit IC50-Werten von 0,53 μM bzw. 0,26 μM. Dies ist ein signifikanterer Effekt als der, der durch BIX02188 verursacht wird. BIX02189 hemmt die Aktivierung von ERK5 und unterdrückt die C-Terminus-Hsc70-interagierenden Protein (CHIP)-vermittelte p53-Ubiquitinierung, was zur Umkehrung des durch laminaren Fluss (L-flow) verursachten Schutzeffekts in menschlichen Nabelschnurvenen-Endothelzellen (HUVECs) führt, die 15d-PGJ2 ausgesetzt sind. BIX02189 (10 uM) hemmt die ERK5-Phosphorylierung und reduziert die transkriptionelle Aktivität des Myozyten-Enhancer-Faktors 2 (MEF2) in neonatalen Rattenkardiomyozyten (NRCMs), die durch Isoproterenol stimuliert wurden. BIX02189 verstärkt die Sorbit-induzierte Apoptose in NRCMs und bestätigt die schützende Rolle von ERK5 in Kardiomyozyten.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • Katalytischer Assay

    Aus dem Baculovirus-Expressionssystem isoliertes MEK5-Protein wird zur Messung der Kinaseaktivität unter Verwendung von PKLight ATP Detection Reagent verwendet. Der Assay wird mit 15 nM GST-MEK5 und 0,75 μM ATP in Assaypuffer, bestehend aus 25 mM Hepes, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 50 mM KCl, 0,2 % BSA, 0,01 % CHAPS, 100 μM Na3VO4, 0,5 mM DTT und 1 % DMSO, in Gegenwart variierender Konzentrationen von BIX02189 durchgeführt. Das Kinase-Reaktionsgemisch wird 90 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert, gefolgt von der Zugabe von 10 μL ATP-Detektionsreagens für 15 Minuten. Das relative Lichtsignale (RLU) wird gemessen und die RLU-Signale werden in Prozent der Kontrolle (POC)-Werte zur Bestimmung des IC50-Wertes umgerechnet.
Zell-Assay:

[1]
  • Zelllinien

    HeLa cells

  • Konzentrationen

    Dissolved in DMSO, final concentration ~10 μM

  • Inkubationszeit

    Pretreatment for 1.5 hours

  • Methode

    The cells are serum starved for 20 hours prior to stimulation with sorbitol at a final concentration of 0.4 M for 20 minutes at 37 °C. BIX02189 is added 1.5 hours prior to the addition of sorbitol. The cells are harvested and lysed in 50 μL RIPA buffer containing Halt protease and phosphate inhibitors at 4 °C for 5-10 minutes. The lysates are centrifuged for 10 minutes at 14,000 rpm and 50 μL lysate is added to 50 μl 2× sample buffer and boiled for 4 minutes at 95 °C. Twenty microliters sample is run on SDS–PAGE 10% Tris-glycine gels and transferred to nitrocellulose. Western blotting is done with appropriate antibodies.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18834865/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22254155/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20075332/

Kundenproduktvalidierung

<p>Expression of iNOS, Fra-1, Fra-2, JunB, JunD, and FosB in PMN. (A) PMN were treated with or without SB203580 (40 μM), BIX02189 (30 μM), or SP600125 (40 μM) for 1 h before addition of NDMA (0.74 μg/μl). The cytoplasmic and nuclear fractions obtained from the cells were used to detect iNOS, Fra-1, Fra-2, JunB, JunD, and FosB protein levels by Western blot. The results shown are representative of five independent experiments.</p>

Daten von [ J Immunotoxicol , 2013 , 10, 32-39 ]

Daten von [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

<p>Inhibition of ERK5 suppresses laminar flow-mediated Nrf2-dependent gene expression. B, HUVECs were exposed to atheroprotective flow for 16–24 h in the presence of either DMSO or BIX02189 (10uM). Protein expression of HO-1, NQO1, eNOS, pERK5, ERK5, and tubulin was determined by immunoblotting with specific antibodies. Data are representative from three independent experiments.</p>

Daten von [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

<p>Inhibition of ERK5 suppresses Nrf2 nuclear translocation in mouse aorta in vivo. Nrf2 nuclear translocation in mouse aortic endothelium was analyzed by en face immunofluorescence staining assay using anti-Nrf2 antibody (red). Mice were treated with either 10 mg/kg of BIX02189 (in 25% DMSO) or vehicle control (same volume of 25% DMSO) by ntraperitoneal injection. Endothelium of thoracic aorta was stained with anti-vascular endothelial-cadherin (VE-cadherin) antibody for endothelial cell-cell junction staining (green), Topro3 for nuclear staining (blue), and anti-Nrf2 antibody (red) and photographed under a confocal microscope..</p>

Daten von [ J Biol Chem , 2012 , 287, 40722-31 ]

Sellecks BIX 02189 Wurde zitiert von 75 Publikationen

Integrated drug response prediction models pinpoint repurposed drugs with effectiveness against rhabdomyosarcoma [ PLoS One, 2024, 19(1):e0295629] PubMed: 38277404
Protective effects of macrophage-specific integrin α5 in myocardial infarction are associated with accentuated angiogenesis [ Nat Commun, 2023, 10.1038/s41467-023-43369-x] PubMed: 37985764
Etiopathogenic role of ERK5 signaling in sarcoma: prognostic and therapeutic implications [ Exp Mol Med, 2023, 55(6):1247-1257] PubMed: 37332046
The WNK1-ERK5 route plays a pathophysiological role in ovarian cancer and limits therapeutic efficacy of trametinib [ Clin Transl Med, 2023, 13(4):e1217] PubMed: 37029785
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 14(11):715] PubMed: 37919293
Extracellular signal-Regulated Kinase 5 (ERK5) is required for the Yes-associated protein (YAP) co-transcriptional activity [ Cell Death Dis, 2023, 14(1):32] PubMed: 36650140
MAP kinase ERK5 modulates cancer cell sensitivity to extrinsic apoptosis induced by death-receptor agonists [ Cell Death Dis, 2023, 10.1038/s41419-023-06229-6] PubMed: 37919293
Neuregulin modulates hormone receptor levels in breast cancer through concerted action on multiple signaling pathways [ Clin Sci (Lond), 2023, 137(1):1-15] PubMed: 36511917
Impact of Liver Inflammation on Bile Acid Side Chain Shortening and Amidation [ Cells, 2022, 11(24)3983] PubMed: 36552746
Glucose Starvation or Pyruvate Dehydrogenase Activation Induce a Broad, ERK5-Mediated, Metabolic Remodeling Leading to Fatty Acid Oxidation [ Cells, 2022, 11(9)1392] PubMed: 35563698

RÜCKGABERICHTLINIE
Die bedingungslose Rückgaberichtlinie von Selleck Chemical gewährleistet unseren Kunden ein reibungsloses Online-Einkaufserlebnis. Wenn Sie in irgendeiner Weise mit Ihrem Kauf unzufrieden sind, können Sie jeden Artikel innerhalb von 7 Tagen nach Erhalt zurückgeben. Im Falle von Produktqualitätsproblemen, sei es protokollbezogene oder produktbezogene Probleme, können Sie jeden Artikel innerhalb von 365 Tagen ab dem ursprünglichen Kaufdatum zurückgeben. Bitte befolgen Sie die nachstehenden Anweisungen, wenn Sie Produkte zurücksenden.

VERSAND UND LAGERUNG
Selleck-Produkte werden bei Raumtemperatur transportiert. Wenn Sie das Produkt bei Raumtemperatur erhalten, seien Sie versichert, dass die Qualitätskontrollabteilung von Selleck Experimente durchgeführt hat, um zu überprüfen, dass die normale Temperaturplatzierung von einem Monat die biologische Aktivität von Pulverprodukten nicht beeinträchtigt. Nach dem Sammeln lagern Sie das Produkt bitte gemäß den in der Datenblatt beschriebenen Anforderungen. Die meisten Selleck-Produkte sind unter den empfohlenen Bedingungen stabil.

NICHT FÜR DIE ANWENDUNG AM MENSCHEN, FÜR VETERINÄRMEDIZINISCHE DIAGNOSTIK ODER THERAPEUTISCHE ZWECKE.