AC480 (BMS-599626)

Katalog-Nr.S1056 Charge:S105602

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Technische Daten

Formel

C27H27FN8O3
Molekulargewicht 530.55 CAS-Nr. 714971-09-2
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 113 mg/mL (212.98 mM)
Ethanol 20 mg/mL (37.69 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung AC480 (BMS-599626) ist ein selektiver und wirksamer Inhibitor von HER1 und HER2 mit IC50 von 20 nM und 30 nM, ~8-fach weniger potent zu HER4, >100-fach zu VEGFR2, c-Kit, Lck, MET etc. Diese Verbindung befindet sich in Phase 1.
Ziele
HER1 HER2 HER4
20 nM 30 nM 190 nM
In vitro AC480 (BMS-599626) wird als ATP-kompetitiver Inhibitor für HER1 und als ATP-nicht-kompetitiver Inhibitor für HER2 mit Ki von 2 nM bzw. 5 nM identifiziert. Es hemmt auch den verwandten Rezeptor HER4, jedoch mit reduzierter Potenz mit einem IC50 von 190 nM. Diese Verbindung hemmt die Proliferation von Tumorzellen, die hohe Mengen an HER1 und/oder HER2 exprimieren, einschließlich Sal2-, BT474-, N87-, KPL-4-, HCC202-, HCC1954-, HCC1419-, AU565-, ZR-75-30-, MDA-MB-175-, GEO- und PC9-Zellen mit IC50 von 0,24 μM, 0,31 μM, 0,45 μM, 0,38 μM, 0,94 μM, 0,34 μM, 0,75 μM, 0,63 μM, 0,51 μM, 0,84 μM, 0,90 μM bzw. 0,34 μM. Während die Proliferation der Ovarialtumorzelllinie A2780 und von MRC5-Fibroblasten, die weder HER1 noch HER2 exprimieren, nicht signifikant gehemmt wird. Eine aktuelle Studie zeigt, dass es die Radioempfindlichkeit von HN-5-Zellen, die sowohl EGFR als auch Her2 exprimieren, signifikant erhöht, indem es die Zyklusumverteilung fördert und die DNA-Reparatur hemmt.
In vivo AC480 (BMS-599626) zeigt eine potente Antitumoraktivität in einem menschlichen Brusttumor-KPL-4-Xenograft bei seiner maximal verträglichen Dosis von 180 mg/kg und hat auch eine ähnliche Antitumoraktivität in anderen HER2-amplifizierten Xenograft-Modellen sowie anderen HER1-überexprimierenden Xenograft-Modellen. In vivo führt die orale Verabreichung dieser Verbindung zu einer dosisabhängigen Hemmung des Sal2-Tumorwachstums bei Dosen von 60 mg/kg bis 240 mg/kg.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • Protein kinase assays

    Die gesamten zytoplasmatischen Sequenzen von HER1, HER2 und HER4 werden als rekombinante Proteine in Sf9-Insektenzellen exprimiert. HER1 und HER4 werden als Fusionsproteine mit Glutathion-S-Transferase exprimiert und durch Affinitätschromatographie an Glutathion-S-Sepharose gereinigt. HER2 wird in den pBlueBac4-Vektor subkloniert und als unmarkiertes Protein unter Verwendung eines internen Methionincodons (M687) für die Translationsinitiierung exprimiert. Das verkürzte HER2-Protein wird durch Chromatographie an einer DEAE-Sepharose-Säule isoliert, die in einem Puffer mit 0,1 M NaCl äquilibriert ist, und das rekombinante Protein wird mit einem Puffer mit 0,3 M NaCl eluiert. Für die HER-Kinase-Assays betragen die Reaktionsvolumina 50 μL und enthalten 10 ng Glutathion-S-Transferase-Fusionsprotein oder 150 ng partiell gereinigtes HER2. Die Mischungen enthalten auch 1,5 μM Poly(Glu/Tyr) (4:1), 1 μM ATP, 0,15 μCi [γ-33P]ATP, 50 mM Tris-HCl (pH 7,7), 2 mM DTT, 0,1 mg/mL Rinderserumalbumin und 10 mM MnCl2. Die Reaktionen werden 1 Stunde lang bei 27 °C durchgeführt und durch Zugabe von 10 μL eines Stopppuffers (2,5 mg/mL Rinderserumalbumin und 0,3 M EDTA), gefolgt von einer 108-μL-Mischung aus 3,5 mM ATP und 5 % Trichloressigsäure, beendet. Säureunlösliche Proteine werden auf GF/C-Unifilterplatten mit einem Filtermate-Harvester gewonnen. Der Einbau von radioaktivem Phosphat in das Poly(Glu/Tyr)-Substrat wird durch Flüssigszintillationszählung bestimmt. Die prozentuale Hemmung der Kinaseaktivität wird durch nichtlineare Regressionsanalysen bestimmt, und die Daten werden als die inhibitorische Konzentration angegeben, die zur Erzielung einer 50 %igen Hemmung im Vergleich zu Kontrollreaktionen erforderlich ist (IC50). Die Daten sind die Durchschnitte von Dreifachbestimmungen. Alle anderen Protein Tyrosine Kinase werden ebenfalls unter Verwendung von Poly(Glu/Tyr) als Substrat getestet. Die Kinetik der HER1- und HER2-Hemmung wird in Reaktionsmischungen bestimmt, die unterschiedliche Konzentrationen von ATP und AC480 (BMS-599626) enthalten.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    Sal2, BT474, N87, KPL-4, HCC202, HCC1954, HCC1419, AU565, ZR-75-30, MDA-MB-175, GEO, PC9, A2780 and MRC5

  • Konzentrationen

    0-10 μM

  • Inkubationszeit

    72 hours

  • Methode

    All cell lines are maintained in RPMI 1640 supplemented with 10% fetal bovine serum, 100 units/mL penicillin, and 100 μg/mL streptomycin. Cells are plated at 1,000 per well in 96-well plates and are cultured for 24 hours before AC480 (BMS-599626) is added. This compound is diluted in culture medium such that the final concentrations of DMSO are ≤ 1%. Following its addition, the cells are cultured for an additional 72 hours before cell viability is determined by measuring the conversion of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide dye with the CellTiter96 kit. For some cell lines, there is a lack of a correlation between 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide dye metabolism and cell number, and a thymidine uptake assay is used to measure proliferation of these cell lines. Cells are plated in 96-well plates and treated with compounds as above. At the end of the 72-hour incubation, cells are pulsed with [3H]thymidine (0.4 μCi/well) for 3 hours before they are harvested. Cells are digested with 2.5% trypsin for 10 minutes at 37 °C and are harvested by filtration using a Packard Filtermate Harvester and GF/C Unifilter plates. Incorporation of radioactive thymidine into nucleic acids is determined by liquid scintillation counting.
Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    SAL2 murine salivary gland tumor, N87 human gastric carcinoma, BT474 human breast tumor, A549 human non–small-cell lung tumor, and GEO human colon tumor are maintained and passaged in athymic female nude mice.

  • Dosierungen

    ≤240 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via p.o.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17062696/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20119866/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18765823/

Kundenproduktvalidierung

<p>Co-treatments of PI-103 and EGFR inhibitors enhance cytotoxicity in SUM149PT cells. Cells were treated with 0.3 uM of PI-103 in combination with different concentrations (0.1 and 1 uM) of EGFR inhibitors (BMS-599626) for -72 hrs. Cell viability was measured by MTT assay as described in Materials and methods. Data from two independent experiments performed in triplicate are shown as mean+SEM. *P < 0.05; **P < 0.01; ***P < 0.001.</p>

Daten von [ J Cell Mol Med , 2013 , 17(5), 648-56 ]

<p> </p><div>RCH-ACV cells were treated with ponatinib(50 nM), PCI-32765(50 nM), or BMS-599626(500 nM) over a time course, and whole-cell extracts were subjected to immunoblot analysis</div><div>for total or phospho-AKT.</div><div> </div>

Daten von [ Cancer Cell , 2012 , 22(5), 656-667 ]

<p>Breast cancer cells were pretreated with 100ng/ml EGF for 15 min and then treated with the indicated concentrations of BMS-599626.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, 2010 , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

<p>AC480, a Her-2 inhibitor, blocked the effect of PlncRNA-1 in RWPE-1 cells. （a and b） After PlncRNA-1 overexpression in RWPE-1 cells, the number of cells in G2/M phase decreased. After addition of the Her-2 inhibitor AC480, the number of cells in G2/M phase increased again. （c） CyclinD1 expression in RWPE-1 cells was increased after the overexpression of PlncRNA-1. After addition of the Her-2 inhibitor AC480, the expression of cyclinD1 in RWPE-1 cells was decreased again.</p>

, , Asian J Androl, 2017, 19(4):453-457

Sellecks AC480 (BMS-599626) Wurde zitiert von 10 Publikationen

Deciphering the Role and Signaling Pathways of PKCα in Luminal A Breast Cancer Cells [ Int J Mol Sci, 2022, 23(22)14023] PubMed: 36430510
Comprehensive pharmacogenomic characterization of gastric cancer. [ Genome Med, 2020, 18;12(1):17] PubMed: 32070411
The AXL receptor tyrosine kinase is associated with adverse prognosis and distant metastasis in esophageal squamous cell carcinoma. [Hsieh MS, et al. Oncotarget, 2016, 7(24):36956-36970] PubMed: 27172793
Gain- and Loss-of-Function Mutations in the Breast Cancer Gene GATA3 Result in Differential Drug Sensitivity [ PLoS Genet, 2016, 12(9):e1006279] PubMed: 27588951
PlncRNA-1 induces apoptosis through the Her-2 pathway in prostate cancer cells. [Yang Q, et al. Asian J Androl, 2016, 10.4103/1008-682X] PubMed: 27232851
[ Oncotarget, 2015, ] PubMed: 25965827
Synergistic apoptosis in head and neck squamous cell carcinoma cells by co-inhibition of insulin-like growth factor-1 receptor signaling and compensatory signaling pathways [Axelrod MJ, et al. Head Neck, 2014, 10.1002/hed.23822.?] PubMed: 24986420
CDK4/6 inhibition provides a potent adjunct to Her2-targeted therapies in preclinical breast cancer models [Witkiewicz AK, et al. Genes Cancer, 2014, 5(7-8):261-72] PubMed: 25221644
Inhibition of the PI3K/AKT pathway potentiates cytotoxicity of EGFR kinase inhibitors in triple-negative breast cancer cells. [Yi YW, et al. J Cell Mol Med, 2013, 17(5):648-56] PubMed: 23601074
Crosstalk between ROR1 and the Pre-B Cell Receptor Promotes Survival of t (1; 19) Acute Lymphoblastic Leukemia. [Bicocca VT, et al. Cancer Cell, 2012, 22(5):656-67] PubMed: 23153538

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