BMS-754807

BMS-754807 hemmt effektiv das Wachstum einer breiten Palette menschlicher Tumorzelllinien unterschiedlicher histologischer Herkunft, einschließlich mesenchymaler (Ewing-Sarkom, Rhabdomyosarkom, Neuroblastom und Liposarkom), epithelialer (Brust, Lunge, Bauchspeicheldrüse, Dickdarm und Magen) und hämatopoetischer (multiples Myelom und Leukämie), wobei die IC50-Werte für die empfindlichsten Zelllinien von 5 nM bis 365 nM reichen. Diese Verbindung hemmt die Proliferation von IGF-1R-Sal-Zellen und RH41-Zellen mit einer IC50 von 7 nM und 5 nM. Sie hemmt die Phosphorylierung von IGF-1R in IGF-1R-Sal-Zellen, Rh41 und Geo mit einer IC50 von 13 nM, 6 nM und 21 nM. Diese Chemikalie hemmt die Phosphorylierung von Akt in IGF-1R-Sal-Zellen, Rh41 und Geo mit einer IC50 von 22 nM, 13 nM und 16 nM. Sie induziert eine stärkere Apoptose in Rh41-Zellen innerhalb von 24 Stunden, was durch einen erhöhten Sub-G1-Peak (23,1 %) im Vergleich zur Kontrolle (2,4 %) angezeigt wird. [1] Diese Verbindung hemmt die Phosphorylierung von IGF-1R (IC50 = 13 nM) und die nachgeschalteten Ziele Akt (IC50 = 22 nM) und MAPK (IC50 = 13 nM) in der IGF-Sal-Zelllinie mit einer IC50, die mit der antiproliferativen IC50 (7 nM) in dieser Zelllinie übereinstimmt. Die Kristallstruktur dieser Verbindung, kokristallisiert mit der Kinasedomäne von IGF-1R, zeigt die Donor/Akzeptor/Donor-Wasserstoffbrücken-Triade mit Met1052 und Glu1050 innerhalb der Hinge-Region der Kinase. [2] Sie zeigt einen medianen EC50-Wert von 0,62 μM gegen 23 Zelllinien im pädiatrischen präklinischen Testprogramm (PPTP). [3]

BMS-754807 (12,5 mg/kg, oral) hemmt die IGF-1R-Phosphorylierung in Tumor und Serum bei IGF-1R-Sal-Tumor-tragenden Nacktmäusen. Diese Verbindung hemmt das Tumorwachstum in einer ausgewählten Gruppe epithelialer (IGF-1R-Sal, GEO und Colo205), hämatopoetischer (JJN3) und mesenchymaler (RD1 und Rh41) Xenograft-Tumormodelle mit TGI-Werten von 53 % bis 115 %. [1] Es (6,25 mg/kg) erreicht eine vollständige Tumorwachstumshemmung im transgenen IGF-Sal-Tumormausmodell mit korrelierter Hemmung von pIGF-1R und pAKT. Die Proteinbindung für diese Chemikalie reicht von 98,5 % im Mausplasma bis 95,9 % im Humanplasma. Es führt zu einer Clearance von 113 (ml/min)/kg, 20 (ml/min)/kg, 3,5 (ml/min)/kg und 41 (ml/min)/kg. [2] Diese Verbindung (25 mg/kg) hemmt signifikant den Tumor in KT-5 (Wilms), KT-14 (rhabdoid), Rh28 (Rhabdomyosarkom) und OS-1 Xenograft-Mausmodellen. [3]

• Kinase-Hemmtests

  Das primäre Screening für BMS-754807 ist ein In-vitro-Kinase-Assay unter Verwendung des rekombinanten humanen IGF-1-Rezeptor-Enzyms in biochemischen Assays mit dem synthetischen Peptid KKSRGDYMTMQIG als Phosphoakzeptor-Substrat. Das Selektivitätsprofil wird gegen multiple rekombinante Enzyme evaluiert, die bei BMS generiert oder extern eingekauft werden. Die enzymatischen Assays werden in U-Boden-384-Well-Platten unter Verwendung eines 30 μL Reaktionsvolumens in Assay-Puffer (100 mM Hepes pH 7,4, 10 mM MgCl₂, 0,015 % Brij35 und 4 mM DTT) durchgeführt. Die 60-minütigen Reaktionen werden durch Kombinieren von ATP (Konzentration äquivalent zu K_m ATP), 1,5 μM markiertem Peptidsubstrat, Enzym und dieser Verbindung initiiert. Die Reaktionen werden mit EDTA beendet. Die Reaktionsgemische werden auf dem Caliper LabChip 3000 durch elektrophoretische Trennung des fluoreszierenden Substrats und des phosphorylierten Produkts analysiert. Hemmungsdaten werden durch Vergleich mit enzymfreien Kontrollreaktionen für 100 % Hemmung und Vehikel-Only-Reaktionen für 0 % Hemmung berechnet. Die Verbindungen werden in DMSO, 10 mM Stammlösung gelöst und bei elf Konzentrationen evaluiert. IC50-Werte werden durch nicht-lineare Regressionsanalyse der Dosis-Wirkungs-Kurven abgeleitet.

• Zelllinien

  IGF-1R-Sal, RH41 and Geo cell lines

• Konzentrationen

  365 nM

• Inkubationszeit

  72 hours

• Methode

  Cells are grown at their optimal density in RPMI +GlutaMax supplemented with 10% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS). Cell proliferation is evaluated by incorporation of ³H-thymidine into DNA after exposure of cells to this compound for 72 hours. Results are expressed as an IC50, which is the drug concentration required to inhibit cell proliferation by 50% compared with untreated control cells.

• Tiermodelle

  IGF-1R-Sal, GEO, Colo205, JJN3, RD1 or Rh41 tumor–bearing nude mice

• Dosierungen

  150 mg/kg

• Verabreichung

  Orally