Canertinib (CI-1033)

Canertinib (CI-1033) zeigt eine ausgezeichnete Wirksamkeit bei der irreversiblen Hemmung der ErbB2-Autophosphorylierung in MDA-MB 453-Zellen und weist auch eine hohe Permeabilität in Caco-2-Zellen auf. [1] Diese Verbindung allein unterdrückt signifikant konstitutiv aktiviertes Akt und MAP-Kinase und hemmt in Kombination Akt, während sie eine Erhöhung der MAPK-Phosphorylierung verhindert. Es stimuliert die p27-Expression und p38-Phosphorylierung in MDA-MB-453-Zellen. [2] CI-1033 ist hochspezifisch für die ErbB-Rezeptorfamilie und nicht empfindlich gegenüber PGFR, FGFR oder IR, selbst bei 50 μM. Es zeigt hohe Hemmwerte in A431-Zellen, die EGFR exprimieren, mit einer IC50 von 7,4 nM und unterdrückt die Heregulin-stimulierte Tyrosin-Phosphorylierung von ErbB2, ErbB3 und ErbB4 mit IC50-Werten von 5, 14 bzw. 10 nM. Die Verbindung hemmt auch die Expression von pp62^c-fos als Reaktion auf Heregulin. [3] Es wird angenommen, dass es Cys773 kovalent innerhalb der ATP-Bindungsstelle der HER2-Kinase modifiziert und den Abbau sowohl reifer als auch unreifer ErbB-2-Moleküle verstärkt. [4] Diese Verbindung induziert eine signifikante Abnahme der messbaren Phosphorylierung der Tyrosinreste 845 und 1068 von EGFR, die für die Src- bzw. Ras/MAPK-Signalübertragung verantwortlich sind. Die entsprechenden Reste von Her-2, die Tyrosinreste 877 und 1248, werden durch sie bei einer Konzentration von 3 μM oder höher signifikant dephosphoryliert. CI könnte die EGFR-Internalisierung blockieren und die Apoptoserate in primären Osteosarkomzellen titrierbar erhöhen. [5] Darüber hinaus hemmt es die Proliferation von TT-, TE2-, TE6- und TE10-Zellen signifikant bei 0,1 nM. [6]

Canertinib (CI-1033) zeigt eine beeindruckende Aktivität gegen A431-Xenotransplantate in Nacktmäusen bei 5 mg/kg Körpergewicht. [1] Diese Verbindung (20 bis 80 mg/kg/Tag) erzielt ein hohes Maß an Tumorregressionen in H125-Xenotransplantationsmodellen. [3] Ihre orale Verabreichung bewirkt eine deutliche Wachstumshemmung in TT-, TE6- und TE10-Xenotransplantaten in Nacktmäusen, ohne Tiersterblichkeit und mit <10 % Gewichtsverlust. [6]

• Tyrosine Kinase Assays

  Enzymassays zur Bestimmung der IC50 werden in 96-Well-Filterplatten in einem Gesamtvolumen von 0,1 ml durchgeführt, enthaltend 20 mM Hepes, pH 7,4, 50 mM Natriumvanadat, 10 μM ATP, das 0,5 mCi [³²P]ATP enthält, 20 mg Polyglutaminsäure/Tyrosin, 10 ng EGFR tyrosine kinase und entsprechende Verdünnungen von Canertinib (CI-1033). Alle Komponenten außer dem ATP werden in die Wells gegeben und die Platte wird 10 Minuten bei 25 °C unter Schütteln inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von [³²P]ATP gestartet, und die Platte wird weitere 10 Minuten bei 25 °C inkubiert. Die Reaktion wird durch Zugabe von 0,1 ml 20%iger Trichloressigsäure (TCA) beendet. Die Platte wird mindestens 15 Minuten bei 4 °C gelagert, damit das Substrat präzipitieren kann. Die Wells werden anschließend fünfmal mit 0,2 ml 10%iger TCA gewaschen und der 32P-Einbau mit einem Wallac β-Plattenzähler bestimmt.

• Zelllinien

  TT, TE2, TE6 and TE10 cells

• Konzentrationen

  0.1-5.0 nM

• Inkubationszeit

  1, 3, 5 and 7 days

• Methode

  Cells (1 × 10⁴) are seeded in each well of a 24-well plastic culture plate and left overnight in DMEM or RPMI-1640 supplemented with 10% FBS. The next morning, the cells are treated with the indicated concentrations of Canertinib (CI-1033) (0.1-5.0 nM) for varying periods (1, 3, 5 and 7 days). After treatment, the cells are counted using a Coulter counter. The percent of cell proliferation is calculated by this formula: treatment cell number/control cell number × 100 for each time period.

• Tiermodelle

  A431 xenografts established in nude mice

• Dosierungen

  ~18 mg/kg

• Verabreichung

  Administered orally