CUDC-101

Spezifisch für HDACs der Klasse I und Klasse II, hemmt CUDC-101 keine HDACs der Klasse III vom Sir-Typ. Diese Verbindung zeigt schwache Aktivität gegen andere Proteinkinasen, einschließlich KDR/VEGFR2, Lyn, Lck, Abl-1, FGFR-2, Flt-3 und Ret mit IC50 von 0,85 μM, 0,84 μM, 5,91 μM, 2,89 μM, 3,43 μM, 1,5 μM bzw. 3,2 μM. Es zeigt eine breite antiproliferative Aktivität in vielen menschlichen Krebszelltypen mit IC50 von 0,04-0,80 μM, wobei es in den meisten Fällen eine höhere Potenz und Kombinationen von Vorinostat aufweist. Diese Chemikalie hemmt potente Krebszelllinien. [1] Es hemmt die resistente EGFR-Mutante T790M, obwohl seine Wirkungen mit einem Amax von ~60% der Spitzenenzymaktivität nach der Hemmung unvollständig sind. Diese Verbindung erhöht die Acetylierung von Histon H3 und H4 sowie die Acetylierung von Nicht-Histon-Substraten von HDAC wie p53 und α-Tubulin in einer dosisabhängigen Weise in verschiedenen Krebszelllinien. Es unterdrückt auch die HER3-Expression, die Met-Amplifikation und die AKT-Reaktivierung in Tumorzellen. [2]

Die Verabreichung von CUDC-101 in einer Dosis von 120 mg/kg/Tag induziert eine Tumorrückbildung im Hep-G2 Leberkrebsmodell, die bei ihrer maximal tolerierten Dosis (25 mg/kg/Tag) und Vorinostat in einer äquimolaren Dosis (72 mg/kg/Tag) wirksamer ist. Diese Verbindung hemmt das Wachstum von -sensitiven H358 NSCLC-Xenografts in dosisabhängiger Weise. Sie zeigt auch eine potente Hemmung des Tumorwachstums im -resistenten A549 NSCLC-Xenograftmodell. Diese Chemikalie führt zu einer signifikanten Tumorrückbildung im -resistenten, HER2-negativen, EGFR-überexprimierenden MDA-MB-468 Brustkrebsmodell und im EGFR-überexprimierenden CAL-27 Kopf- und Hals-Plattenepithelkarzinom (HNSCC)-Modell. Darüber hinaus hemmt sie das Tumorwachstum in den K-ras-mutierten HCT116 Kolorektal- und EGFR/HER2 (neu)-exprimierenden HPAC Pankreaskrebsmodellen. [1]

• HDAC-, EGFR- und HER2-Hemmungstests

  Die Aktivitäten von HDACs der Klasse I und II werden mit dem Biomol Color de Lys System beurteilt. Kurz gesagt, werden HeLa-Zellkernextrakte als Quelle für HDACs verwendet. Verschiedene Konzentrationen von CUDC-101 werden zu HeLa-Zellkernextrakten in Gegenwart eines kolorimetrischen künstlichen Substrats hinzugefügt. Am Ende des Assays wird Entwickler hinzugefügt und die Enzymaktivität im Wallac Victor II 1420 Mikroplattenleser bei 405 nM gemessen. Die EGFR- und HER2-Kinaseaktivität wird mit HTScan EGF-Rezeptor- und HER2-Kinase-Assay-Kits gemessen. Kurz gesagt, das GST-EGFR-Fusionsprotein wird mit einem synthetischen biotinylierten Peptidsubstrat und variierenden Konzentrationen dieser Verbindung in Gegenwart von 400 mM ATP inkubiert. Phosphoryliertes Substrat wird mit Streptavidin-beschichteten 96-Well-Platten eingefangen. Der Grad der Phosphorylierung wird durch anti-Phosphotyrosin- und Europium-markierte Sekundärantikörper überwacht. Am Ende des Assays wird die Verstärkungslösung hinzugefügt und die Enzymaktivität im Wallac Victor II 1420 Mikroplattenleser bei 615 nM gemessen.

• Zelllinien

  HCC827, H358, H460, HepG2, Hep3B2, Sk-Hep-1, Capan1, BxPc3, MCF-7, MDA-MB-231, and Sk-Br-3

• Konzentrationen

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Inkubationszeit

  72 hours

• Methode

  Cancer cell lines are plated at 5000 to 10000 cells per well in 96-well flatbottomed plates with varying concentrations of CUDC-101. The cells are incubated with this compound for 72 hours in the presence of 0.5% of fetal bovine serum. Growth inhibition is assessed by an adenosine triphosphate (ATP) content assay using the Perkin-Elmer ATPlite kit. Apoptosis is routinely assessed by measuring the activities of Caspase-3 and -7 using Apo-ONE Homogeneous Assay Kit.

• Tiermodelle

  Female athymic mice (nude nu/nu CD-1) inoculated with Hep-G2, H358, A549, MDA-MB468, HCT116, CAL-27, HepG2, or HPAC

• Dosierungen

  ~120 mg/kg/day

• Verabreichung

  Administered via i.v.