Camptothecin (CPT)

Katalog-Nr.S1288 Charge:S128809

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Technische Daten

Formel

C20H16N2O4
Molekulargewicht 348.35 CAS-Nr. 7689-03-4
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 4 mg/mL (11.48 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Camptothecin (CPT) ist ein spezifischer Inhibitor der DNA Topoisomerase I (Topo I) mit einem IC50-Wert von 0,68 μM in einem zellfreien Assay. Camptothecin induziert Apoptosis in Krebszellen über microRNA-125b-vermittelte mitochondriale Signalwege. Phase 2.
Ziele
Topo I
(Cell-free assay)
0.68 μM
In vitro Camptothecin (CPT), ein Pflanzenalkaloid, das ursprünglich 1966 aus *Camptotheca acuminate* isoliert wurde, ist dafür bekannt, Zellen während der S-Phase der Mitose anzuhalten. Diese Verbindung zeigt eine nanomolare Potenz in der Zytotoxizität gegen viele menschliche Tumorzelllinien, einschließlich HT29, LOX, SKOV3 und SKVLB, mit IC50-Werten von 37 nM bis 48 nM. In Kombination mit TNF induziert es Apoptosis in primären Maushepatozyten mit einem IC50-Wert von 13 μM. Es abrogierte auch die TNF-induzierte NF-κB-Aktivierung sowie die Expression des TNF-Rezeptor-assoziierten Faktors 2 (TRAF2), des X-chromosomalen Inhibitors des Apoptosis-Proteins (X-IAP) und des FLICE-inhibitorischen Proteins (FLIP). In HCT116-Zellen induziert CPT (5 μM) den Proteasom-vermittelten Abbau des Mixed Lineage Leukemia 5 (MLL5)-Proteins, was zur Phosphorylierung von p53 an Ser392 führt. Aufgrund seiner geringen Löslichkeit und unerwünschten Wirkungen wurden verschiedene Analoga entwickelt, und zwei davon, Topotecan und Irinotecan, wurden von der FDA zugelassen und werden in der Krebschemotherapie eingesetzt.
In vivo Camptothecin (CPT) (8 mg/kg) zeigt eine vollständige Wachstumshemmung und Regression in Maus-Xenotransplantaten verschiedener Tumoren, einschließlich Kolon-, Lungen-, Brust-, Magen- und Ovarialtumoren. Bei Mäusen induzieren Kombinationen dieser Verbindung (50 mg/kg) und TNF (5 und 7 μg/kg), aber nicht sie allein, Leberschäden.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[2]
  • Topoisomerase I Cleavable Complex Assay

    Topoisomerase I wird aus Kalbsthymus isoliert und ist frei von Topoisomerase II. Alle Reaktionen werden in 10 mL Reaktionspuffer (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 100 mM KCl, 0,5 mM EDTA und 30 pg/mL BSA) in Mikrotiterplatten durchgeführt. Diese Verbindung wird in DMSO bei 10 mg/mL gelöst und in 96-Well-Mikrotiterplatten seriell verdünnt, denen die 32P-End-markierte pBR322 DNA und das Topoisomerase-Enzym zugesetzt werden. Das Reaktionsgemisch wird 30 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert und dann die Reaktion durch Zugabe von 2 mL einer Mischung aus Natriumdodecylsulfat und Proteinase K (Endkonzentrationen von 1,6% bzw. 0,14 mg/mL) gestoppt. Die Platten werden 30 Minuten bei 50 °C erhitzt, 10 mL Standardstopplösung, die 0,45 N NaOH enthält, wird hinzugefügt, um einzelsträngige DNA zu erzeugen, und die Proben werden in 1,5% Agarosegelen in TBE-Puffer elektrophoretisch getrennt. Die Gele werden auf Nitrozellulosepapier geblottet, getrocknet und Röntgenfilm ausgesetzt. Die Spaltungseinheiten werden aus den Autoradiogrammen berechnet und gegen die logarithmische Arzneimittelkonzentration aufgetragen. Die IC50-Werte werden dann erhalten. Camptothecin (CPT) wird als Testverbindung verwendet.
Zell-Assay:[2]
  • Zelllinien

    U87MG, A549 and H838 cells

  • Konzentrationen

    0.17 nM–10 mM

  • Inkubationszeit

    48 hours

  • Methode

    Tumor cells are plated in 100 μL of medium in 96-well microtiter plates at a density of 1500 to 4000 cells per well and allowed to adhere overnight. Cells are incubated with Camptothecin (CPT) for 48 hours and then with fresh medium for 48 hours. This compound at each concentration is added in quadruplicate. Following a 4-hour incubation of treated cells with MTT, the reduced dye product is extracted from the cells with 0.2 mL of DMSO followed by 50 μL of Sorensen's buffer. The plates are shaken briefly, and the absorbance at 570 nm is read and quantitated. Curves are fitted to the MTT assay data using a four-parameter logistic equation.
Tierstudie:[3]
  • Tiermodelle

    Nude mice (NIH-I high fertility strain) bearing xenografts of CASE, SW48, DOY, SPA, and CLO cells

  • Dosierungen

    0–8 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via i.m. or i.v. injection

Referenzen

  • http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ja00968a057
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7853331/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2032244/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15122760/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21423215/

Kundenproduktvalidierung

Growth suppression by UBE2M silencing is enhanced by DNA damaging agents. Growth sensitivity of HEY cells in the presence of Camptothecin(CPT) was monitored using clonogenic assay.

Daten von [ PLoS One , 2014 , 9(7), e101844 ]

<p>U2OS cells transfected with siRNA oligonucleotides were treated with DMSO or camptothecin (1 μM, 1 h) and DNA-PKcs autophosphorylation at S2056 was monitored. Arrow indicates the hyperphosphorylated form of CtIP.</p>

Daten von [ EMBO Rep , 2010 , 11(12), 962-8 ]

<p>CtIP and exonuclease 1 protect cells from chromosomal damage. (<strong>A</strong>) At 72 h after transfection with the indicated siRNA oligonucleotides, U2OS cells were treated with either DMSO or camptothecin (1 h, 1 μM; acute treatment) and survival was determined by colony formation. Data represent the mean±s.e.m. of five independent experiments. (<strong>B</strong>) Cell survival at low doses of camptothecin from the data shown in (<strong>A</strong>). Data represent the mean±s.e.m. of five independent experiments. (<strong>C</strong>) Cells transfected as in (<strong>A</strong>) were treated with either DMSO or camptothecin for 24 h (chronic treatment) and survival was determined by colony formation. Data represent the mean±s.e.m. of three independent experiments. (<strong>D</strong>) Metaphase spreads from cells transfected and treated as described in (<strong>A</strong>) were analysed for chromosomal aberrations. A total of 50 metaphase spreads was analysed for each sample. The percentages of metaphase spreads displaying the indicated numbers of radial chromosomes are shown. CNTL, control; DMSO, dimethyl sulphoxide; EXO1, exonuclease 1; siRNA, small interfering RNA.</p>

Daten von [ EMBO Rep , 2010 , 11(12), 962-8 ]

a. Effects of five concentrations of CXCL12 (0, 10, 50, 100, and 500 ng/ml) on apoptosis of NPC cells caused by 10 μM camptothecin were determined by the amount of cleaved PARP detected by Western blot.

Daten von [ , , Tumour Biol, 2016, 37(6):8169-79 ]

Sellecks Camptothecin (CPT) Wurde zitiert von 164 Publikationen

Non-canonical functions of DNMT3A in hematopoietic stem cells regulate telomerase activity and genome integrity [ Cell Stem Cell, 2025, S1934-5909(25)00256-5] PubMed: 40680747
Inherited deficiency of DIAPH1 identifies a DNA double strand break repair pathway regulated by γ-actin [ Nat Commun, 2025, 16(1):4491] PubMed: 40368919
A novel biosensor for the spatiotemporal analysis of STING activation during innate immune responses to dsDNA [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00370-y] PubMed: 39984755
DSCC1 restrains 53BP1/RIF1 signaling at DNA double-strand breaks to promote homologous recombination repair [ Cell Rep, 2025, 44(4):115452] PubMed: 40117291
Steroid-Modulated Transcription Synergistically Forms DNA Double-Strand Breaks With Topoisomerase II Inhibitor [ Cancer Sci, 2025, 10.1111/cas.70081] PubMed: 40231641
The novel role of LCK and other PcDEGs in the diagnosis and prognosis of sepsis: Insights from bioinformatic identification and experimental validation [ Int Immunopharmacol, 2025, 149:114194] PubMed: 39904039
The Kinase Inhibitor GNF-7 Is Synthetically Lethal in Topoisomerase 1-Deficient Ewing Sarcoma [ Cancers (Basel), 2025, 17(15)2475] PubMed: 40805174
Peroxiredoxin 1 inhibits tumorigenesis by activating the NLRP3/GSDMD pathway to induce pyroptosis of colorectal cancer cells [ World J Gastroenterol, 2025, 31(36):111557] PubMed: 41025079
Discovery and Characterization of Small Molecule Inhibitors Targeting Exonuclease 1 for Homologous Recombination-Deficient Cancer Therapy [ ACS Chem Biol, 2025, 10.1021/acschembio.5c00117] PubMed: 40378357
DDX18 influences chemotherapy sensitivity in colorectal cancer by regulating genomic stability [ Exp Cell Res, 2025, 444(1):114344] PubMed: 39577603

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