Clemastine (HS-592) Fumarate

Clemastine Fumarate hemmt den Histamin-induzierten Anstieg von [Ca²⁺]_i in HL-60-Zellen mit einer IC50 von 3 nM im Vergleich zu Chlorpheniramin oder Diphenhydramin mit IC50-Werten von 20 nM bzw. 100 nM. [1]

Bei Konzentrationen von ≥25 μM blockiert Clemastine Fumarate signifikant NK- und ADCC-Reaktionen von Lymphozyten gegen die humane Erythroleukämie-Zelllinie K562 bzw. die humane B-Lymphoblasten-Zelllinie SB. [2]

Clemastine Fumarate hemmt die Histamin-induzierte Kontraktion des Meerschweinchenileums mit einer IC50 von 231 nM. [3]

Clemastine Fumarate hemmt den HERG K⁺-Kanal in HEK 293-Zellen, die stabil HERG-Kanäle exprimieren, in einer konzentrationsabhängigen Weise mit einer IC50 von 12 nM, die durch die Y652A- oder F656A-Mutation von HERG abgeschwächt werden kann. [4]

Clemastine Fumarate verstärkt signifikant den ATP-induzierten Anstieg von [Ca²⁺]_i in HEKhP2X7-Zellen, nicht durch Histaminrezeptorblockade, sondern durch Sensibilisierung des P2X7-Rezeptors in einer konzentrationsabhängigen Weise mit einer EC50 von 10 μM, und erhöht die IL-1β-Freisetzung aus LPS-induzierten humanen Makrophagen. [5]

Die Verabreichung von Clemastine Fumarate (5-20 mg/kg) zeigt eine signifikant hemmende Wirkung auf das gleichzeitig induzierte Zymosan-Pfotenödem und das Krotonöl-Ohrenödem bei Ratten in einer dosisabhängigen Weise, mit einer Hemmung von 53,6 % bzw. 46,8 % bei einer Dosis von 20 mg/kg und mit ID50-Werten von 18,0 mg/kg bzw. 20,5 mg/kg. [6]

Die Behandlung mit Clemastine Fumarate reduziert die angeborenen Immunantworten auf Listeria monocytogenes bei Mäusen stark, indem es die extrazelluläre Signal-regulierte Kinase (ERK)-vermittelte Produktion proinflammatorischer Zytokine wie TNF-α und IL-6 überraschenderweise nicht durch Blockierung des Histamine Receptor beeinflusst, was zu einer signifikant höheren Mortalität führt. [7]

• Hemmung von [Ca²⁺]_i

  HL-60-Zellen werden in einem Puffer, bestehend aus 138 mM NaCl, 6 mM KCl, 1 mM MgSO4, 1 mM Na₂HPO₄, 5 mM NaHCO₃, 5,5 mM Glukose und 20 mM HEPES-NaOH, pH 7,4, ergänzt mit 0,1 % (w/v) Rinderserumalbumin, auf 1×10⁷ Zellen/mL suspendiert. Der Farbstoff Fura-2/AM wird in einer Konzentration von 4 μM hinzugefügt, und die Zellen werden 10 Minuten bei 37 °C inkubiert. Danach werden die Zellen mit dem vorgenannten Puffer auf eine Konzentration von 5×10⁶ Zellen/mL verdünnt und 45 Minuten bei 37 °C inkubiert. Anschließend werden die Zellen mit dem vorgenannten Puffer auf eine Endkonzentration von 0,5 × 10⁶ Zellen/mL verdünnt und 10 Minuten bei 20 °C bei 250 g zentrifugiert. Die Zellen werden in dem vorgenannten Puffer auf 1,0 × 10⁶ Zellen/mL suspendiert und bis zur Messung bei 20 °C gehalten. HL-60-Zellen werden bis zu 4 Stunden nach der Beladung mit Fura-2/AM verwendet und in 2 mL des vorgenannten Puffers unter Verwendung von Acrylfluoreszenzküvetten suspendiert. HL-60-Zellen werden 3 Minuten bei 37 °C in Gegenwart von 1 mM Ca²⁺ und verschiedenen Konzentrationen von Clemastine Fumarate inkubiert, bevor Histamin (100 μM) hinzugefügt wird. Die Fluoreszenz wird bei 37 °C unter ständigem Rühren der Zellen mit 1×10³ rpm unter Verwendung eines Ratio II Spektrofluorometers bestimmt. Die Basalfluoreszenz (basales [Ca²⁺]_i) wird 1 Minute lang gemessen. Die basalen [Ca²⁺]_i-Werte werden von den entsprechenden Peak-[Ca²⁺]_i-Werten subtrahiert, um den Anstieg von [Ca²⁺]_i zu berechnen. Die Anregungs- und Emissionswellenlängen betragen 340 nm bzw. 500 nm. Der IC50-Wert wird aus der kompetitiven Kurve bestimmt.

• Tiermodelle

  Male Wistar rats with paw oedema induced by subplantar injection of zymosan and ear oedema induced by croton oil

• Dosierungen

  5-20 mg/kg

• Verabreichung

  Intraperitoneally