FTY720 (Fingolimod) Hydrochloride

Die hemmende Wirkung von S1P wird durch verschiedene Konzentrationen von FTY720 mit einem IC50-Effekt von 173 nM aufgehoben. Darüber hinaus hat FTY720 (10 nM) allein keinen Einfluss auf die Expression kostimulatorischer Moleküle. FTY720 hebt die durch S1P induzierte erhöhte Expression von HLA-I sowohl für die Prozentsätze der Zellen als auch für den MFI auf, wenn der Effekt von S1P mit dem Effekt der Kombination von S1P mit FTY720 verglichen wird. [1] Mittlere und hochdosierte FTY720-P erhöhen auch die TGF-β1-Spiegel. Die TGF-β1- und Foxp3-mRNA-Expression sind in der hochdosierten FTY720-P-Gruppe hochreguliert. Die Proliferation von Effektor-T-Zellen wird in der mittleren und hochdosierten FTY720-P-Gruppe bei einem Treg/Teff-Zellverhältnis von 1:1 signifikant unterdrückt. Bei einem Verhältnis von 1:1 wird die Proliferation von Effektor-T-Zellen auch in der hochdosierten FTY720-Gruppe unterdrückt. [2]

FTY720 ist bei Ph⁺, aber nicht bei Ph^- ALL-Xenotransplantaten unter Verwendung eines frühen Krankheitsmodells wirksam. FTY720 führt zu einer signifikanten Reduktion der Krankheitslast in den Ph⁺ ALL-Xenotransplantaten unter Verwendung eines frühen Krankheitsmodells. Ph⁺ menschliche ALL-Xenotransplantate sprechen auf FTY720 mit einer 80%igen Reduktion der Gesamterkrankung an, wenn die Behandlung frühzeitig begonnen wurde. Im Gegensatz dazu führt die Behandlung von Mäusen mit FTY720 nicht zu einer reduzierten Leukämie im Vergleich zu Kontrollen unter Verwendung von vier separaten menschlichen Ph^- ALL-Xenotransplantaten. [3]

• Zelllinien

  Immature DCs

• Konzentrationen

  10 nM

• Inkubationszeit

  4 hours

• Methode

  Immature DCs are left intact or are incubated with 2 μM S1P, 10 nM FTY720, 10 nM SEW2871 or the combinations of S1P with these drugs for 4 hours. As a control 1 μg/mL LPS is used. The cells are washed and incubated in a 96-well plate (v-bottom, 2 × 10⁵ cells per well), washed again and resuspended in PBS buffer containing 0.1% sodium azide. They are labeled with 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD80, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD83, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD86, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-class I, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-DR, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-E, or 1 μg/mL FITC-conjugated mouse IgG as a control. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control FITC-conjugated mouse IgG. To stain NK cells with antibodies for various NK cell activating receptors, they are either left untreated or incubated with 2 μM S1P for 4 hours, washed and stained with 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp30 (CD337), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp44 (CD336), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKG2D (CD314), or as a control 1 μg/mL PE-conjugated mouse IgG1, for 45 min at 4 °C. NK cells are also stained with 1 μg/mL FITC-conjugated anti-killer inhibitory receptor (KIR)/CD158 antibody which recognizes KIR2DL2, KIR2DL3, KIR2DS2 and KIR2DS4, and as a control with FITC-conjugated mouse IgG. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control PE-conjugated or FITC-conjugated mouse IgG.

• Tiermodelle

  NOD/SCIDγc^−/− mice bearing ALL cells.

• Dosierungen

  5 mg/kg/day, 10 mg/kg/day

• Verabreichung

  Administered via i.p.