Imatinib (STI571) Mesylate

In-vitro-Assays zur Hemmung einer Reihe von Tyrosin- und Serin/Threonin-Protein-Kinase zeigen, dass Imatinib Mesylate die v-Abl Protein Tyrosine Kinase und PDGFR potent mit einem IC50 von 0,6 bzw. 0,1 µM hemmt. [1] Diese Verbindung hemmt die SLF-abhängige Aktivierung der Wildtyp-c-Kit-Kinaseaktivität mit einem IC50 für diese Effekte von ungefähr 0,1 µM, was der Konzentration ähnlich ist, die zur Hemmung von PDGFR erforderlich ist. [2] Es zeigt wachstumshemmende Aktivität an der menschlichen Bronchialkarzinoid-Zelllinie NCI-H727 und der menschlichen Pankreaskarzinoid-Zelllinie BON-1 mit einem IC50 von 32,4 bzw. 32,8 µM. [3] Eine aktuelle Studie zeigt, dass diese Chemikalie das Potenzial hat, ihre antileukämischen Effekte bei chronischer myeloischer Leukämie durch die Herunterregulierung von hERG1 K(+)-Kanälen auszuüben, die in Leukämiezellen stark exprimiert werden und von außergewöhnlicher Bedeutung für die Förderung der Leukämogenese zu sein scheinen. [4]

Imatinib Mesylate erzielt eine unterschiedliche Antitumorwirkung bei drei Xenograft-Tumoren, die aus chirurgischen Proben von frischen menschlichen kleinzelligen Lungenkrebsen gewonnen wurden, mit einer Wachstumshemmung von 80%, 40% und 78% bei SCLC6, SCLC61 bzw. SCLC108 Tumoren und keiner signifikanten Hemmung des SCLC74-Wachstums. [5] Bei fettreich ernährten ApoE(-/-) Mäusen reduziert diese Verbindung die durch fettreiche Ernährung induzierte Lipid-Färbefläche signifikant um 30%, 27% und 35% im Vergleich zu unbehandelten Kontrollen mit fettreicher Ernährung, wenn sie per Magensonde mit 10, 20 und 40 mg/kg dosiert wurde, und unterdrückt die Lipidakkumulation in der Halsschlagader. [6]

• PDGF-Rezeptor-Kinaseaktivität

  Der PDGF-Rezeptor wird aus BALB/c 3T3-Zellextrakten mit Kaninchen-Antiserum gegen den murinen PDGF-Rezeptor für 2 Stunden auf Eis immunpräzipitiert. Protein A-Sepharose-Kügelchen werden verwendet, um die Antigen-Antikörper-Komplexe zu sammeln. Die Immunpräzipitate werden zweimal mit TNET (50 mM Tris, pH 7,5, 140 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1% Triton X-100), einmal mit TNE (50 mM Tris, pH 7,5, 140 mM EDTA) und einmal mit Kinasepuffer (20 mM Tris, pH 7,5, 10 mM MgCl₂) gewaschen. Nach Stimulation mit PDGF (50 ng/mL) für 10 Minuten bei 4 °C werden dem Reaktionsgemisch verschiedene Konzentrationen dieser Verbindung zugesetzt. Die PDGF-Rezeptor-Kinaseaktivität wird durch Inkubation mit 10 μCi [7-³³P]-ATP und 1 μM ATP für 10 Minuten bei 4 °C bestimmt. Immunkomplexe werden durch SDS-PAGE auf 7,5%-Gelen getrennt.

• Zelllinien

  BON-1 cells and NCI-H727 cells

• Konzentrationen

  ~100 μM

• Inkubationszeit

  48 hours

• Methode

  BON-1 cells and NCI-H727 cells are seeded into flat-bottomed 96-well plates in triplicate and allowed to adhere overnight in 10% fetal bovine serum-supplemented DMEM or RPMI 1640 complete medium, respectively; the medium is then exchanged for serum-free medium (negative control) or serum-free medium containing serial dilutions of this compound. After 48 hours (control cultures do not reach confluence), the number of metabolically active cells is determined by the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay, and absorbance is measured in a Packard Spectra microplate reader at 540 nm. Growth inhibition is calculated using the following formula: inhibition rate = (1 − a / b) × 100%, where a and b are the absorbance values of the treated and control groups, respectively.

• Tiermodelle

  SCLC6, SCLC61, SCLC 74 and SCLC108 small cell lung cancers are injected into Swiss mice (nu/nu, female).

• Dosierungen

  70 or 100 mg/kg

• Verabreichung

  Administered via i.p.