KU-55933

Katalog-Nr.S1092 Charge:S109205

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Technische Daten

Formel

C21H17NO3S2
Molekulargewicht 395.49 CAS-Nr. 587871-26-9
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 79 mg/mL (199.75 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung KU-55933 ist ein potenter und spezifischer ATM-Inhibitor mit einer IC50/Ki von 12,9 nM/2,2 nM in zellfreien Assays und ist hochselektiv für ATM im Vergleich zu DNA-PK, PI3K/PI4K, ATR und mTOR. KU-55933 (ATM Kinase Inhibitor) hemmt die Aktivierung der Autophagie-initiierenden Kinase ULK1 und führt zu einer signifikanten Abnahme der Autophagie.
Ziele
ATM
(Cell-free assay)
12.9 nM
In vitro KU-55933 hemmt DNA-PK und PI3K mit einer IC50 von 2,5 μM bzw. 16,6 μM. Außerdem verhindert diese Verbindung auch die Aktivität von mTOR mit einer IC50 von 9,3 μM. Sie ist auf zellulärer Ebene aktiv, indem sie ein gut charakterisiertes ATM-abhängiges Phosphorylierungsereignis ablatiert. Diese Chemikalie hat einen dosisabhängigen Effekt bei der Hemmung dieses ATM-abhängigen Phosphorylierungsereignisses mit einer IC50 von 300 nM. KU-58050 verhindert die ATM-abhängige Phosphorylierung von p53 Serin 15 erst ab einer Dosis von 30 μM. Die Zugabe dieser Verbindung hat keine nennenswerten Auswirkungen auf die UV-induzierte Phosphorylierung von H2AX an Serin 139, NBS1 an Serin 343, CHK1 an Serin 345 und SMC1 an Serin 966. Im starken Gegensatz zu den UV-Reaktionen eliminiert sie die ionisierende strahlungsinduzierte Phosphorylierung dieser ATM-Substrate. Diese Chemikalie sensibilisiert HeLa-Zellen für eine Reihe von ionisierenden Strahlungsdosen. Sie hemmt die durch Wachstumsfaktoren induzierte Phosphorylierung von Akt in Krebszellen. Diese Verbindung unterdrückt die Proliferation von Krebszellen. Darüber hinaus verbessert die Unterdrückung von ATM durch diese Chemikalie das Überleben, wahrscheinlich durch die Verhinderung der nachgeschalteten Aktivierung von TAp63α.
In vivo Die Unterdrückung der ATM-abhängigen STAT3-Aktivierung durch KU-55933 verstärkt die TRAIL-vermittelte Apoptose durch Hochregulation der DR5-Oberflächenexpression, während die Unterdrückung von STAT3 und NF-κB an der Herunterregulierung von cFLIP beteiligt zu sein scheint, begleitet von einer zusätzlichen Zunahme der apoptotischen Spiegel. Diese Verbindung beeinflusst die TRAIL-vermittelte Apoptose stärker als der JAK2-Inhibitor, AG490, oder die Überexpression von STAT3β.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • Gereinigte Enzymassays

    ATM zur Verwendung im In-vitro-Assay wird aus HeLa-Kernextrakt durch Immunpräzipitation mit Kaninchen-polyklonalem Antiserum gewonnen, das gegen die COOH-terminalen 400 Aminosäuren von ATM in Puffer mit 25 mM HEPES (pH 7,4), 2 mM MgCl2, 250 mM KCl, 500 μM EDTA, 100 μM Na3VO4, 10% v/v Glycerin und 0,1% v/v Igepal hergestellt wurde. ATM-Antikörperkomplexe werden aus dem Kernextrakt isoliert, indem sie 1 Stunde lang mit Protein A-Sepharose-Kügelchen inkubiert und anschließend zentrifugiert werden, um die Kügelchen zurückzugewinnen. In der Vertiefung einer 96-Well-Platte werden ATM-haltige Sepharose-Kügelchen mit 1 μg des Substrats Glutathion-S-Transferase–p53N66 (NH2-terminale 66 Aminosäuren von p53, fusioniert mit Glutathion-S-Transferase) in ATM-Assay-Puffer [25 mM HEPES (pH 7,4), 75 mM NaCl, 3 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 50 μM Na3VO4, 500 μM DTT und 5% v/v Glycerin] bei 37 °C in An- oder Abwesenheit dieser Verbindung inkubiert. Nach 10 Minuten unter leichtem Schütteln wird ATP zu einer Endkonzentration von 50 μM hinzugefügt und die Reaktion weitere 1 Stunde bei 37 °C fortgesetzt. Die Platte wird bei 250 × g für 10 Minuten (4 °C) zentrifugiert, um die ATM-haltigen Kügelchen zu entfernen, und der Überstand wird entnommen und in eine weiße, undurchsichtige 96-Well-Platte überführt und bei Raumtemperatur 1,5 Stunden lang inkubiert, um die Bindung von Glutathion-S-Transferase-p53N66 zu ermöglichen. Diese Platte wird dann mit PBS gewaschen, trocken getupft und mittels einer Standard-ELISA-Technik mit einem Phospho-Serin 15 p53-Antikörper analysiert. Der Nachweis des phosphorylierten Glutathion-S-Transferase-p53N66-Substrats erfolgt in Kombination mit einem Ziegen-Anti-Maus-Meerrettichperoxidase-konjugierten Sekundärantikörper. Zur Signalgenerierung wird eine verbesserte Chemilumineszenzlösung verwendet und die Chemilumineszenzdetektion durchgeführt.
Zell-Assay:

[1]
  • Zelllinien

    U2OS cells

  • Konzentrationen

    10 μM

  • Inkubationszeit

    2 hours

  • Methode

    U2OS cells are exposed to ionizing radiation (3, 5, or 15 Gy) or UV (5 or 50 J/m2) and the ATM response determined by Western blot analysis of p53 serine 15 phosphorylation and stabilization of wild-type p53. Whole cell extracts are obtained from each time point, proteins separated by SDS-PAGE, and the ATM-specific increase in phosphorylated serine 15 measured with a p53 phospho-serine 15 specific antibody. Overall p53 stabilization with time is also observed with a p53-specific antibody (DO-1). Similarly, for studying ATM-dependent phosphorylations on H2AX, CHK1, NBS1, and SMC1, the following antibodies are used: CHK1 phospho-serine 345 and NBS1 phospho-serine 343 antibodies. Histone H2A (H-124) and CHK1 antibodies are also used, as well as SMC1 and SMC1 phospho-serine 966 antibodies. For determination of a cellular IC50 for KU-55933, the peak response time for p53 serine 15 phosphorylation of 2 hours is used to monitor inhibition of ATM. This compound is titrated onto cells and preincubated for 1 hour before ionizing radiation. Using scanning densitometry, the percentage inhibition relative to vehicle control is calculated, and the IC50 value is calculated as for the in vitro determinations.
Tierstudie:

[3]
  • Tiermodelle

    BALB/c nu/nu nude mice bearing LU1205 cells

  • Dosierungen

    10 μM

  • Verabreichung

    --

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15604286/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21869459/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19351839/

Kundenproduktvalidierung

<p> </p><p>Effects of NVP-BKM120 and KU-55933 and their combination on the DNA damage response. A, HCC1937 cells were treated for 18 hours with NVP-BKM120 at 2.5 μmol/L, KU-55933 at 10 μmol/L, or their combination, subjected to ionizing radiation(IR) with 10 Gy or mock, lysed 6 hours later, and subjected to immunoblotting with antibodies as indicated.</p>

Daten von [ Cancer Discov , 2012 , 2, 1048-1063 ]

<p> </p><p>59PDb2 repression is restored in c22 by inhibition of DNAPKcs. Shown are representative ChIP QPCR of USF-1 binding at Db2 (A) and Db2 mRNA levels (B) in P5424-c22 1 d after treatment with the indicated kinase inhibitors.</p>

Daten von [ J Immunol , 2012 , 188, 2266-2275 ]

<p>Confocal immunostaining (left panel) graphical representation (right panel) for phosphorylation of S25-53BP1, which is known to be ATM dependent, at different time points following irradiation of HEK 293T parental and p18CycE-expressing cells in the absence or presence of the ATM inhibitor, KU55933. Error bars represent SD (n=3).</p>

Daten von [ Nucleic Acids Res , 2011 , 41, 10157-69 ]

<p>effect of ATM inhibitor in etoposide-induced cell death. The cells were pretreated with KU55933 (2 μM) for 1 h before etoposide treatment.</p><div><div> </div></div><p> </p>

Daten von [ J Biol Chem , 2011 , 286, 8394-8404 ]

Sellecks KU-55933 Wurde zitiert von 413 Publikationen

DNA2 enables growth by restricting recombination-restarted replication [ Nature, 2025, 646(8086):992-1000] PubMed: 40903580
Phase separation of ERCC6L2-CtIP regulates the extent of DNA end resection [ Nat Cell Biol, 2025, 27(10):1771-1784] PubMed: 40913148
EXO1 as a therapeutic target for Fanconi Anaemia, ZRSR2 and BRCA1-A complex deficient cancers [ Nat Commun, 2025, 16(1):8476] PubMed: 41006228
Inherited deficiency of DIAPH1 identifies a DNA double strand break repair pathway regulated by γ-actin [ Nat Commun, 2025, 16(1):4491] PubMed: 40368919
Autophosphorylation of the Tousled-like kinases TLK1 and TLK2 regulates recruitment to damaged chromatin via PCNA interaction [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(4)gkae1279] PubMed: 39727191
Homeodomain protein PRRX1 anchors the Ku heterodimers at DNA double-strand breaks to promote nonhomologous end-joining [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(6)gkaf200] PubMed: 40114375
Genome rearrangements induced by the stimulation of end-joining of DNA double strand breaks through multiple phosphorylation of MRE11 by the kinase PKB/AKT1 [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(11)gkaf468] PubMed: 40479710
The inflammasome sensor NLRP3 interacts with REV7 to maintain genome integrity through homologous recombination [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(12)gkaf554] PubMed: 40613708
The histone acetyltransferase CBP participates in regulating the DNA damage response through ATM after double-strand breaks [ Genome Biol, 2025, 26(1):89] PubMed: 40200339
ZSCAN4 functions as a safeguard to maintain centromere integrity during oocyte meiosis [ Genome Biol, 2025, 26(1):204] PubMed: 40665375

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