Dacinostat (LAQ824)

Katalog-Nr.S1095 Charge:S109501

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Technische Daten

Formel

C22H25N3O3
Molekulargewicht 379.459 CAS-Nr. 404951-53-7
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 76 mg/mL (200.28 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Dacinostat (LAQ824, NVP-LAQ824) ist ein neuartiger HDAC-Inhibitor mit einer IC50 von 32 nM und ist dafür bekannt, den p21-Promotor zu aktivieren.
Ziele
p21 HDAC
(Cell-free assay)
32 nM
In vitro Dacinostat (LAQ824) aktiviert die Expression des Gens, das den p21-Zellzyklus-Inhibitor kodiert, indem es den p21-Promotor mit einer 50%igen maximalen Promotoraktivierung (AC50) von 0,30 μM aktiviert. Es hemmt das Zellwachstum sowohl von H1299, einer nicht-kleinzelligen Lungenkrebszelllinie, als auch von HCT116, einer Darmkrebszelllinie, mit einer IC50 von 0,15 μM bzw. 0,01 μM, und die antiproliferative Wirkung dieser Verbindung ist selektiv gegenüber den Tumorzelllinien, während sie nur einen Wachstumsstopp in normalen Fibroblasten induziert. Darüber hinaus induziert es eine dosisabhängige Zunahme des p21-Proteins in A549-Zellen und eine Zunahme des hypophosphorylierten Zustands des Rb-Tumorsuppressors. Eine aktuelle Studie zeigt, dass LAQ824 Chromatinveränderungen auf der Ebene des IL-10-Genpromotors induziert, die zu einer verstärkten Rekrutierung der Transkriptionsrepressoren HDAC11 und PU.1 führen und die IL-10-Produktion in BALB/c murinen Makrophagen hemmen.
In vivo Dacinostat (LAQ824) führt bei einer Dosierung von 100 mg/kg zu dosisabhängigen Hemmungen des Tumorwachstums ohne allgemeine Zytotoxizität in HCT116- und menschlichen Darmtumor-Xenografts in Nacktmäusen.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • In-vitro-Histondeacetylase-Assay

    HDAC-Enzyme werden teilweise aus H1299-Zelllysaten durch Ionenaustauschchromatographie unter Verwendung der Q Sepharose Fast Flow-Säule gereinigt. Enzymkomplexe werden aus 500 mg Gesamtzelllysat durch Immunpräzipitation mit cdk2-polyklonalem Antikörper oder cdk1/cdc2-monoklonalem Antikörper gewonnen. Immunpräzipitate werden in Kinasepuffer (50 mM Hepes, pH 8, 10 mM MgCl2, 2,5 mM EDTA, 1 mM Dithiothreitol, 20 mM ATP, 10 mM β-Glycerophosphat, 0,1 mM NaVO4, 1 mM Natriumfluorid, 50 mM ATP, 10 μCi [γ-32P]ATP) zusammen mit 1 μg pRb-rekombinantem Proteinsubstrat (cdk2) oder 10 ml H1-Histongemisch, das 20 μg Substrat (cdc2) enthält, resuspendiert. Phosphorylierte Rb- und H1-Histone werden durch Elektrophorese getrennt und mit einem PhosphorImager quantifiziert. Diese Verbindung, Dacinostat (LAQ824), wird im Assay verwendet.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    H1299, HCT116, DU145, PC3 and MDA435 cells

  • Konzentrationen

    0-10 μM

  • Inkubationszeit

    48 hours

  • Methode

    Cell proliferation is measured using an adaptation of published procedures (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxy-phenyl)-2-(4-sulfonyl)-2H-tetrazolium assay). The cells are seeded in 12-well dishes and cultured in RPMI 1640 containing 10% FBS. To examine the growth inhibition by Dacinostat (LAQ824), the cells are cultured in the presence of various concentrations of this compound (up to 1,000 ng/mL). Viable cell numbers are determined by trypan blue dye exclusion, counted in a Nesbauer-type hemocytometer for 0 hour, 24 hours, and 48 hours. The same amount of ethanol is added to the RPMI 1640 medium as the control experiment. All experiments are performed in duplicate and repeated 3 times The average background value (treatment with medium alone) is subtracted from each experimental well; triplicate values are averaged for each compound dilution. The following formulas are used to calculate the percentage of growth: If X0, %Growth=(X-T0)/T0*100; If X>T0, %Growth=(X-T0)/(GC-T0)*100. where T0 is the average value of T0 − background, GC is the average value of untreated cells (in triplicate) − background, and X is the average value of compound-treated cells (in triplicate)-background. The “% Growth” is plotted against compound concentration and used to calculate the IC50 using the linear regression techniques between data points to predict the concentration of compounds at 50% inhibition.
Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    HCT116 cells is injected s.c. into the right axillary (lateral) region of outbred athymic (nu/nu) female mice.

  • Dosierungen

    ≤100 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via i.v.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14744786/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21368229/

Kundenproduktvalidierung

<p>Class I selective HDACi have the highest INS-1 rescue potential . INS-1 cells were monitored using the real-time xCELLigence system h and the impedance (cell adhesion) was measured as a surrogate of cell viability (cell index) as described in the Methods. (a ) The impedance of duplicates of control (green line), cytokine-exposed (red line) and cytokine+ITF-J-exposed INS-1 cells (blue line) was followed from the start of exposure (indicated by the arrow). Heat maps of 13 different ITF HDAC inhibitor compounds ( b )orsix different commercial HDAC inhibitor compounds (c) were made based on their IC50 values towards selected HDACs . The HDACi inhibitors are ranked after rescue potential according to ESM Tables 1, 2 .( c) Values are corrected for differences in potency since they varied from 33.3 (CI-994) to 0.041 (LAQ824). (d ) Colour code for both heat maps: low IC50 values coloured red, intermediate IC50 values coloured black and high IC50 values coloured blue; grey indicates undetermined IC50.</p>

Daten von [ Diabetologia , 2012 , 55(9), 2421-31 ]

<p>Analyses of efficacy, potency and IC50 of HDAC inhibitors point toward HDACs 1–3 as relevant candidates for beta cell protection. Ranking and raw data on ITF drugs (Table 3) and commercial HDAC inhibitors (Table 4) underlying the heat maps of Fig. 1 (A and B). The HDAC inhibitor compounds were tested using a HDAC activity kit and recombinant proteins to determine IC50 values on each individual HDAC (right part of the table). Each drug was further tested using Real-Time Cell Analysis (RTCA) to score their maximal effective concentration (ECmax) as well as the corresponding rescue percentage of cytokine treated INS-1 cells. The drugs were ranked according to % rescue. * DMSO alone controls were included in each experiment, but not shown here. The results indicate that the highest concentrations of DMSO used here (1:1,000) were slightly potentiating the proliferation of the cells. The effects observed in this group of compounds were ascribed to the DMSO.?</p>

Daten von [ Diabetologia , 2012 , 55(9), 2421-2431 ]

<p>Mice received intrathecally injected vehicle or  LAQ824 at indicated dose 30 min before unilateral injection of CFA. Paw withdrawal latency was measured before injections as baseline, and after CFA injections as hyperalgesia response.</p><div><div> </div></div><p> </p>

Daten von [ Mol Pain , 2010 , 6, 51 ]

<p>Western blot analysis of Acetyl-H3 and H3. 0-10μM LAQ824 was added.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, 2010 , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Sellecks Dacinostat (LAQ824) Wurde zitiert von 22 Publikationen

Inhibition of Notch Signaling Enhances Antitumor Activity of Histone Deacetylase Inhibitor LAQ824 [ Int J Mol Sci, 2023, 24(17)13660] PubMed: 37686467
Single-cell profiling-guided combination therapy of c-Fos and histone deacetylase inhibitors in diffuse large B-cell lymphoma [ Clin Transl Med, 2022, 12(5):e798] PubMed: 35522945
Histone Deacetylase Inhibitors as a Therapeutic Strategy to Eliminate Neoplastic "Stromal" Cells from Giant Cell Tumors of Bone [ Cancers (Basel), 2022, 14(19)4708] PubMed: 36230631
Locus specific epigenetic modalities of random allelic expression imbalance [ Nat Commun, 2021, 12(1):5330] PubMed: 34504093
Continuous Activity Assay for HDAC11 Enabling Reevaluation of HDAC Inhibitors [ ACS Omega, 2019, 4(22):19895-19904] PubMed: 31788622
Epigenetic Reprogramming with Antisense Oligonucleotides Enhances the Effectiveness of Androgen Receptor Inhibition in Castration-Resistant Prostate Cancer [ Cancer Res, 2018, 78(20):5731-5740] PubMed: 30135193
[ Cell Death Dis, 2018, ] PubMed: 29988031
Hippo signaling dysfunction induces cancer cell addiction to YAP [ Oncogene, 2018, 37(50):6414-6424] PubMed: 30068939
Identification of novel multi-stage histone deacetylase (HDAC) inhibitors that impair Schistosoma mansoni viability and egg production [ Parasit Vectors, 2018, 11(1):668] PubMed: 30587243
Measuring Histone Deacetylase Inhibition in the Brain [ Curr Protoc Pharmacol, 2018, 81(1):e41] PubMed: 29927058

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