Letrozole

Letrozole hemmt potent Aromatase aus verschiedenen Quellen, einschließlich humanen Plazentamikrosomen, partikulären Fraktionen von humanem Brustkrebs, Ratten-Ovarialmikrosomen, mit Aromatase transfizierten MCF-7-Zellen (MCF-7Ca), JEG-3 humanen Chorionkarzinomzellen, CHO-Zellen, Hamster-Ovarialgewebe und partikulären Fraktionen von humanem Brustkrebs mit einer IC50 von 11, 2, 7, 0,07, 0,07, 1,4, 20 und 0,8 nM. In zellfreien Systemen wird die IC50 dieser Verbindung auf 1-13 nM geschätzt. [1] Es hemmt die Estradiolproduktion in vitro in LH-stimuliertem Hamster-Ovarialgewebe bei 0,1 μM maximal mit einer IC50 von 0,02 μM und beeinflusst die Progesteronproduktion bis zu 350 μM nicht signifikant. In ACTH-stimuliertem Ratten-Nebennierengewebe in vitro wird die Aldosteronproduktion mit einer IC50 von 210 μM gehemmt. [2] Diese Chemikalie hemmt das Wachstum von MCF-7 epithelialen Brustkrebszellen dosisabhängig mit einer IC50 von 1 nM. Eine Hemmung ist bereits bei sehr niedrigen getesteten Konzentrationen (0,1 nM) zu beobachten. Die Behandlung von normalen MCF-12A Epithelzellen mit dieser Verbindung beeinflusste ihr Wachstum nicht, selbst bei hohen Letrozole-Konzentrationen (100 nM) oder verlängerten Kulturzeiten. Die gleichzeitige Verabreichung von 17-β-Estradiol mit ihr (10 nM) verringerte den stimulierenden Effekt der enzymatischen Aktivität von MMP-2 und -9, die durch Estradiol freigesetzt werden. [3]

Letrozole hemmt Aromatase in vivo mit einer ED50 von 1-3 μg/kg p.o. [2] Diese Verbindung zeigt anti-endokrine Effekte. Sie hemmt die Androstendion-induzierte Uterushypertrophie bei immaturen Ratten mit einer ED50 von 1-3 μg/kg. Bei erwachsenen weiblichen Ratten unterbricht diese Verbindung (0,3-1 mg/kg täglich p.o., 14 Tage) den ovariellen Zyklus vollständig und reduziert das Uterusgewicht sowie die Serum-Estradiol (E2)-Konzentrationen in einem ähnlichen Ausmaß wie nach einer Ovariektomie. [1] Diese Chemikalie induziert eine dosisabhängige Regression von östrogenabhängigen, 9,10-Dimethylbenz-a-anthracen-induzierten Mammatumoren bei erwachsenen weiblichen Ratten. Die ED50 dafür wird auf 10 - 30 µg/kg/Tag bestimmt, mit vollständiger Hemmung bei einer Tagesdosis von 10 µg/Tag. [4] Es führt zu einer dosisabhängigen Hemmung des Tumorwachstums von mit dem humanen Aromatase-Gen transfizierten MCF-7-Zellen (MCF-7Ca), die in athymische Nacktmäuse implantiert wurden, mit vollständiger Hemmung bei 20 mg/kg pro Tag p.o. [5]

• Humane plazentare Aromataseaktivität

  Der Assay wird in einem Gesamtvolumen von 1 mL bei 37 ℃ durchgeführt. Sofern nicht anders vermerkt, enthält das Inkubationsgemisch 11 nM [4- ¹⁴C] Androstendion-3,17-dion ([4- ¹⁴C]A), 24 mM NADPH (Tetranatriumsalz Typ III), die entsprechenden Konzentrationen des gewünschten Inhibitors und 120 μg mikrosomales Protein. Das (4- ¹⁴C)A wird als Lösung in 1,7% Ethanol in 0,05 M Kaliumphosphatpuffer (pH 7,4) hinzugefügt, sodass die Endkonzentration an Ethanol 0,02% (v/v) nicht überschreitet. Die Reaktion wird durch Zugabe des Enzyms gestartet und nach 20 min durch Zugabe von 7 Vol. Ethylacetat gestoppt. Das Gemisch wird auf einem Vortex-Mischer geschüttelt und bei 600 g 5 min zentrifugiert. Die wässrige Phase wird erneut mit 7 Vol. Ethylacetat extrahiert, und die vereinigten Extrakte werden mit einem Evapo-Mix zur Trockne eingedampft. Über 99% des zugesetzten radioaktiven [4- ¹⁴C] werden mit diesem Extraktionssystem zurückgewonnen. Der erhaltene Rückstand wird in 150 μL Aceton gelöst, und 100 μL Aliquots werden 65 min auf mit Silicagel 60 vorbeschichteten Dünnschichtplatten mittels Ethylacetat:Isooctan (140:60, v/v; System A) oder Toluol:Chloroform:Methanol (70:140:20; System B) chromatographiert. Die radioaktiven Zonen der Platte werden mit einem Berthold LB 2760 Dünnschichtscanner lokalisiert. Die radioaktiven Estradiol (E2)- und Estron (E1)-Peaks werden durch Vergleich mit authentischen Standards identifiziert. Das entsprechende Bindungsband des Silicagels wird in Fläschchen mit 10 mL Szintillationsflüssigkeit überführt und mit einem 6880 Liquid Scintillation system gezählt.

• Zelllinien

  Human breast cancer cells MCF-7

• Konzentrationen

  ~100 nM

• Inkubationszeit

  1 days

• Methode

  Cells are seeded in duplicate at 5,000 to 10,000 cells per well in 24-well plates. The day after plating, different concentrations of Letrozole are added. At the end of incubation, cells are trypsinizated and placed in Isotone solution and counted immediately using a Coulter particle-counter.

• Tiermodelle

  Human breast carcinoma xenografts MCF-7 with human aromatase gene (MCF-7Ca)

• Dosierungen

  20 mg/kg/day

• Verabreichung

  orally administered by gavage once every 2 days