PHA-680632

Katalog-Nr.S1454 Charge:S145402

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Technische Daten

Formel

C28H35N7O2
Molekulargewicht 501.62 CAS-Nr. 398493-79-3
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (199.35 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung PHA-680632 ist ein potenter Inhibitor von Aurora A, Aurora B und Aurora C mit einer IC50 von 27 nM, 135 nM bzw. 120 nM. Diese Verbindung weist eine 10- bis 200-fach höhere IC50 für FGFR1, FLT3, LCK, PLK1, STLK2 und VEGFR2/3 auf.
Ziele
Aurora A Aurora C Aurora B FGFR1 PLK1 Mehr anzeigen
27 nM 120 nM 135 nM 390 nM 780 nM
In vitro PHA-680632 hemmt potent alle drei Aurora Kinase (A, B und C) mit IC50-Werten von 27, 135 bzw. 120 nM. Diese Verbindung ist selektiv für Aurora Kinase, mit einer 10- bis 200-fach höheren IC50 für FGFR1, FLT3, LCK, PLK1, STLK2, VEGFR2 und VEGFR3 und mit einer IC50 von über 10 μM für weitere 22 Kinase. Es zeigt potente antiproliferative Effekte in einem breiten Spektrum von Zelltypen mit IC50-Werten von 0,06–7,15 μM, einschließlich HeLa-, HCT116-, HT29-, LOVO-, DU145- und NHDF-Zellen. Diese Chemikalie (0,5 μM) verursacht Polyploidie in Tumorzellen. Der Wirkungsmechanismus dieser Verbindung stimmt mit der Hemmung von Aurora Kinase überein. Diese Verbindung in Verbindung mit Strahlung führt zu additiven Effekten in Krebszellen, insbesondere in den p53-defizienten Zellen. Kombinierte ionisierende Strahlung (IR) und Behandlung mit dieser Chemikalie (100–400 nM) vor der IR führen zu einer Verstärkung der strahleninduzierten Annexin V-positiven Zellen, Mikronukleusbildung und Brca1-Foci-Bildung nur in HCT116-Zellen mit defizientem p53, anders als bei den p53-Wildtyp-Pendants.
In vivo PHA-680632 (15–60 mg/kg) hemmt das Tumorwachstum in Maus-Xenotransplantatmodellen von HL60-, A2780- und HCT116-Zellen, indem es die Tumorzellproliferation reduziert und die Apoptose erhöht. Diese Verbindung (45 mg/kg) unterdrückt das Wachstum von aktiviertem ras-gesteuerten Brusttumoren in Maus-Mamma-Tumorvirus v-Ha-ras-transgenen Mäusen und führt zu einer vollständigen Tumorstabilisierung und teilweisen Regression.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • Aurora Kinase Inhibition Assay

    Die Hemmung der Kinase-Aktivität durch PHA-680632 wird mittels eines Scintillation Proximity Assay-Formats bewertet. Das biotinylierte Substrat wird durch die Kinase in Anwesenheit von ATP, markiert mit γ33-ATP, transphosphoryliert. Das phosphorylierte Substrat wird dann unter Verwendung von Streptavidin-beschichteten Scintillation Proximity Assay-Beads eingefangen und das Ausmaß der Phosphorylierung wird nach einer 4-stündigen Ruhezeit für das Aufschwimmen der Beads auf einer dichten 5 M CsCl-Lösung mittels β-Counter bewertet. Insbesondere wird ein Peptid, das von der Chocktide-Sequenz (LRRWSLGL) abgeleitet ist, als Substrat für Aurora A verwendet, während das optimierte Peptid Auroratide für Aurora B und C eingesetzt wird. Der Assay wird in einem robotisierten Format auf 96-Well-Platten durchgeführt. Die Potenz dieser Verbindung gegenüber Aurora Kinase wird bewertet und IC50-Werte werden bestimmt.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    HeLa, HCT116, HT29, LOVO, DU145, and NHDF cells

  • Konzentrationen

    0.001-1 μM, dissolved in DMSO as 10 mM stock solution

  • Inkubationszeit

    72 hours

  • Methode

    Cells (5 × 103 to 1.5 × 104 per cm2) are seeded in 24-well plate. After 24 hours, plates are treated with PHA-680632 and incubated for 72 hours. At the end of incubation time, cells are detached from each plate and counted using a cell counter. IC50s are calculated using percentage of growth versus untreated control.
Tierstudie:[2]
  • Tiermodelle

    Mice (female athymic nude) xenografts models of p53−/− HCT116 cells

  • Dosierungen

    40 mg/kg

  • Verabreichung

    Intraperitoneal (i.p.) injection twice a day

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16818708/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18026198/

Kundenproduktvalidierung

Quantification of phT288-AURKA expression as in figure n=3, normalized to total AURKA and plotted as relative intensity units (RIU) +/- S.E.M. Two-way ANOVA, p<0.0001, (shCon/shN1 or shN2), p=0.0013 (shN1/shN2).

Daten von [ Cancer Res , 2013 , 73(10), 3168-80 ]

<p>Western blot analysis of Histone H3 and Aurora. 0-5μM PHA 680632 was added.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Sellecks PHA-680632 Wurde zitiert von 15 Publikationen

Primary cilia suppress the fibrotic activity of atrial fibroblasts from patients with atrial fibrillation in vitro [ Sci Rep, 2024, 14(1):12470] PubMed: 38816374
Aurora kinase A regulates cancer-associated RNA aberrant splicing in breast cancer [ Heliyon, 2023, 9(7):e17386] PubMed: 37415951
Nuclear Aurora kinase A switches m6A reader YTHDC1 to enhance an oncogenic RNA splicing of tumor suppressor RBM4 [ Signal Transduct Target Ther, 2022, 7(1):97] PubMed: 35361747
FOP Negatively Regulates Ciliogenesis and Promotes Cell Cycle Re-entry by Facilitating Primary Cilia Disassembly [ Front Cell Dev Biol, 2020, 8:590449] PubMed: 33304902
Endothelial Cells Promote Colorectal Cancer Cell Survival by Activating the HER3-AKT Pathway in a Paracrine Fashion. [ Mol Cancer Res, 2019, 17(1):20-29] PubMed: 30131447
Targeted Polo-like Kinase Inhibition Combined With Aurora Kinase Inhibition in Pediatric Acute Leukemia Cells. [ J Pediatr Hematol Oncol, 2019, 41(6):e359-e370] PubMed: 30702467
HDAC2 promotes loss of primary cilia in pancreatic ductal adenocarcinoma. [ EMBO Rep, 2017, 18(2):334-343] PubMed: 28028031
Lineage specificity of primary cilia in the mouse embryo. [Bangs FK, et al. Nat Cell Biol, 2015, 17(2):113-22]
Lineage specificity of primary cilia in the mouse embryo. [ Nat Cell Biol, 2015, 17(2):113-22] PubMed: 25599390
Aurora Kinases as Druggable Targets in Pediatric Leukemia: Heterogeneity in Target Modulation Activities and Cytotoxicity by Diverse Novel Therapeutic Agents [Jayanthan A, et al. PLoS One, 2014, 9(7):e102741] PubMed: 25048812

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