Posaconazole

Posaconazole hat eine starke trypanozide Aktivität. Amiodaron wirkt synergistisch mit dieser Verbindung. Es beeinflusst und stört auch die Ca²⁺-Homöostase in T. cruzi. Diese Chemikalie blockiert die Biosynthese von Ergosterol, das für das Überleben des Parasiten unerlässlich ist. Es hat eine klare, dosisabhängige Wirkung auf die Proliferation der Epimastigoten (extrazelluläre) Stadien, mit einer minimalen Hemmkonzentration von 20 nM und einer IC50 von 14 nM. Gegen die klinisch relevante intrazelluläre Amastigotenform des Parasiten ist diese Verbindung noch wirksamer. Sie hat minimale Hemmkonzentrationen und IC50-Werte von 3 nM und 0,25 nM. [1] Es ist wirksam gegen Isolate von Candida- und Aspergillus spp., die Resistenzen gegen Fluconazol, Voriconazol und Amphotericin B aufweisen, und ist viel aktiver als die anderen Triazole gegen Zygomyzeten. [2]

Die Behandlung infizierter Tiere mit Amiodaron allein reduziert die Parasitämie, erhöht das Überleben 60 Tage p.i. (0 % bei unbehandelten Kontrollen vs. 40 % bei mit Amiodaron behandelten Tieren) und verzögert, wenn es in Kombination mit Posaconazole verabreicht wird, die Entwicklung der Parasitämie. [1] Die gleichzeitige Verabreichung dieser Verbindung und Boost Plus erhöht die Medikamentenexposition im Vergleich zur Verabreichung dieser Verbindung allein im nüchternen Zustand. Nahrung, insbesondere Mahlzeiten mit hohem Fettgehalt, erhöht die Bioverfügbarkeit dieser Verbindung signifikant. Die systemische Exposition gegenüber dieser Verbindung steigt um das 4- bzw. 2,6-Fache, wenn sie mit einer fettreichen bzw. fettfreien Mahlzeit eingenommen wird. [3] Diese Verbindung und Amiodaron könnten eine wirksame Anti-T. cruzi-Therapie mit geringen Nebenwirkungen darstellen. [4] Bei zweimal täglichen Dosen von Gleichzeitig verabreichtes Amiodaron und Boost Plus erhöhen die Exposition gegenüber dem Wirkstoff im Vergleich zur alleinigen Verabreichung im nüchternen Zustand. Nahrung, insbesondere fettreiche Mahlzeiten, erhöhen die Bioverfügbarkeit dieser Verbindung signifikant. Die systemische Exposition gegenüber dieser Verbindung steigt um das 4- bzw. 2,6-Fache, wenn sie mit einer fettreichen bzw. fettfreien Mahlzeit eingenommen wird. [3] Diese Verbindung und Amiodaron könnten eine wirksame Anti-T. cruzi-Therapie mit geringen Nebenwirkungen darstellen. [4] Bei zweimal täglichen Dosen von ≥15 mg/kg Körpergewicht verlängert diese Verbindung das Überleben der Mäuse und reduziert die Gewebebelastung. [5]

• Zelllinien

  Epimastigote form of T. cruzi amastigotes

• Konzentrationen

  0 nM -4 nM

• Inkubationszeit

  96 hours

• Methode

  The epimastigote form of the parasite is cultivated in liver infusion tryptose medium, supplemented with 10% new born calf serum at 28 °C with strong (120 rpm) agitation. Cultures are initiated at a cell density of 2 × 10⁶ epimastigotes/mL, and Posaconazole is added at a cell density of 0.5−1.0 × 10⁷ epimastigotes/mL. Cell densities are measured by using an electronic particle counter as well as by direct counting with a hemocytometer. Cell viability is followed by Trypan blue exclusion, using light microscopy. Amastigotes are cultured in Vero cells maintained in minimal essential medium supplemented with 1% fetal calf serum in a humidified atmosphere (95% air−5% CO₂) at 37 °C. Cells are infected with 10 tissue culture-derived trypomastigotes per cell for 2 hours and then washed three times with phosphate-buffered saline (PBS) to remove nonadherent parasites. Fresh medium with and without this compound is added, and the cells are incubated for 96 hours with a medium change at 48 hours. The percent of infected cells and the numbers of parasites per cell are determined directly using light microscopy, and a statistical analysis of the results is carried out. IC50 values are calculated by nonlinear regression, using the program GraFit. Fractional inhibitory concentrations (FIC) are calculated. Cytoplasmic free Ca²⁺ concentrations in control and drug-treated extracellular epimastigotes are determined by fluorimetric methods using Fura-2. Subcellular Ca²⁺ levels and mitochondrial membrane potentials are monitored on individual Vero cells infected with T. cruzi amastigotes by using time-scan confocal microscopy. Briefly, Vero cells heavily infected (72 hours) with T. cruzi amastigotes are plated onto 22 × 40 mm glass coverslips (0.15 mm thickness) and incubated simultaneously with 10 μM cell-permeant Rhod-2 and 10 μg/mL Rhodamine-123 for 50 minutes at 37 °C in culture medium and then washed and incubated with Ringer's solution, with or without amiodarone. Under the conditions used fluorescence of Rhod-2 comes mainly from intracellular Ca²⁺-rich compartments, like mitochondria, since its low affinity for Ca²⁺ limits its fluorescence in the Ca²⁺-poor cytoplasm of the Vero cells or amastigotes. Rhodamine-123 is a mitochondrion-specific cationic dye, which distributes across the inner mitochondrial membranes strictly according to their membrane potential.

• Tiermodelle

  Female NMRI−IVIC mice with acute Chagas

• Dosierungen

  20 mg/kg/d

• Verabreichung

  Oral