R406 (free base)

Katalog-Nr.S1533 Charge:S153302

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Technische Daten

Formel

C22H23FN6O5
Molekulargewicht 470.45 CAS-Nr. 841290-80-0
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 29 mg/mL (61.64 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung R406 (free base) ist ein potenter Syk-Inhibitor mit einer IC50 von 41 nM in einem zellfreien Assay, hemmt stark Syk, aber nicht Lyn, 5-fach weniger potent gegen Flt3. Diese Verbindung löst Apoptose aus. Phase 1.
Ziele
FLT3 Syk
(Cell-free assay)
41 nM
In vitro R406 (free base) ist ein ATP-kompetitiver Inhibitor von Syk mit einem Ki-Wert von 30 nM. Diese Verbindung hemmt selektiv die Syk-abhängige Signalübertragung mit EC50-Werten von 33 nM bis 171 nM, potenter als Syk-unabhängige Signalwege in verschiedenen Zellen. Es hemmt die zelluläre Proliferation einer großen Anzahl von diffusen großzelligen B-Zell-Lymphom (DLBCL)-Zelllinien mit EC50-Werten von 0,8 μM bis 8,1 μM. Diese chemische Behandlung (1 μM oder 4 μM) induziert die Aktivierung der Kaspasen 9 und 3, aber nicht der Kaspase 8, was zu einer signifikanten Apoptose der Mehrheit der DLBCL-Zelllinien führt. Eine Vorbehandlung mit dieser Verbindung blockiert vollständig die Phosphorylierung von SYK525/526 und die SYK-abhängige Phosphorylierung von BLNK in R406-sensitiven DLBCLs nach B-Zell-Rezeptor (BCR)-Crosslinking. Es senkt die MMP-9-mRNA-Spiegel nach 24 bzw. 48 Stunden Behandlung um das 2,8-fache bzw. 4,3-fache im Vergleich zu den Kontrollen und reduziert die invasive Kapazität der RL-Zellen.
In vivo R406 (free base) hat sich in einer Reihe von Tiermodellen für Immunerkrankungen als wirksam erwiesen. Die orale Verabreichung dieser Verbindung an Mäuse mit immunkomplexvermittelter Entzündung hemmt die kutane reverse passive Arthus-Reaktion bei 1 mg/kg und 5 mg/kg um etwa 72 % bzw. 86 % im Vergleich zur Kontrolle signifikant. Die Behandlung mit dieser Verbindung in einer Dosis von 10 mg/kg reduziert Entzündungen und Schwellungen signifikant, senkt die progressive Arthritis bei passiven Antikollagen-Antikörper-herausgeforderten Mäusen auf ein niedrigeres Niveau und verzögert den Beginn und reduziert die Pfotenschwellung und die klinische Arthritis bei K/BxN-Serumtransfer-Mäusen um etwa 50 %.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • In-vitro-Fluoreszenzpolarisation-Kinase-Assays

    R406 (free base) wird in DMSO seriell verdünnt und dann auf 1% DMSO in Kinasepuffer (20 mM HEPES, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT, 0,1 mg/mL acetyliertes BGG) verdünnt. ATP und Substrat in Kinasepuffer werden bei Raumtemperatur hinzugefügt, was zu einer endgültigen DMSO-Konzentration von 0,2% führt. Die Kinase-Reaktionen werden in einem Endvolumen von 20 μL durchgeführt, das 5 μM HS1-Peptidsubstrat und 4 μM ATP enthält, und durch Zugabe von 0,125 ng Syk in Kinasepuffer gestartet. Die Reaktion läuft 40 Minuten lang bei Raumtemperatur ab. Die Reaktion wird durch Zugabe von 20 μL PTK-Quench-Mischung gestoppt, die EDTA/Anti-Phosphotyrosin-Antikörper (1X Endkonzentration)/fluoreszierenden Phosphopeptid-Tracer (0,5X Endkonzentration) enthält, verdünnt in FP-Verdünnungspuffer. Die Platte wird 30 Minuten lang im Dunkeln bei Raumtemperatur inkubiert und dann auf einem Polarion-Fluoreszenzpolarisation-Plattenleser abgelesen. Die Daten werden unter Verwendung einer Kalibrierungskurve, die durch Konkurrenz mit dem im Tyrosinkinase-Assay-Kit bereitgestellten Phosphopeptid-Kompetitor erstellt wurde, in die Menge des vorhandenen Phosphopeptids umgewandelt. Für die IC50-Bestimmung wird diese Verbindung in elf Konzentrationen in Duplikaten getestet, und die Kurvenanpassung erfolgt durch nichtlineare Regressionsanalyse unter Verwendung der Prism GraphPad Software.
Zell-Assay:

[2]
  • Zelllinien

    DHL4, DHL6, DHL8, DHL10, Wsu-NHL, Karpas422 (K422), OCI LY1, LY3, LY4, LY7, LY10, LY18, LY19, Pfeiffer, and Toledo

  • Konzentrationen

    Dissolved in DMSO at a concentration of 10 mM, final concentrations ~ 5 μM

  • Inkubationszeit

    72 or 96 hours

  • Methode

    DLBCL cell lines are treated with serial dilutions of R406 (free base) (0.3, 0.6, 1.25, 2.5, or 5 μM) for 72 or 96 hours. Thereafter, cellular proliferation is determined by MTT assay, and cell apoptosis is assessed by using annexin V–FITC/propidium iodide (PI) staining. For the determination of caspase 9, 8, and 3, cells are lysed, size-fractionated by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), and immunoblotted.
Tierstudie:

[1]
  • Tiermodelle

    Female C57BL/6 mice challenged intravenously with 1% ovalbumin (OVA) in saline (10 mg/kg) containing 1% Evans blue dye, female Balb/c mice with the anticollagen antibody-induced arthritis, and female C57BL/6 mice with arthritis induced by intraperitoneal

  • Dosierungen

    ~10 mg/kg/day

  • Verabreichung

    Orally (prodrug R788)

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16946104/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18006696/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21926965/

Kundenproduktvalidierung

<p>(C) Z-138 and JEKO-1 cells were simultaneously  exposed  to sorafenib and R406  at  the  indicated doses, and cell viability was determined at 48 hours by annexin  V/PI  staining.  Bars represent the mean ± SD of 3 independent experiments. CI value is indicated for each combination. (D)  Primary MCL cells from 7 patients were simultaneously exposed to sorafenib and R406 at the indicated doses for 48 hours, and cell viability was determined as above. Bars represent the mean ± SEM of all the samples analyzed. CI value is indicated for each combination.</p>

Daten von [ Clin Cancer Res , 2013 , 19(3), 586-597 ]

BV-2 microglial cells were treated with vehicle or pre-treated with R406 (1 μM, Syk inhibitor) for 30min before TDB and/or LPS stimulation. Total cell lysates were subjected to SDS-PAGE followed by immunoblotting analysis.

Daten von [ , , Mol Neurobiol, 2018, doi: 10.1007/s12035-018-1135-4 ]

Sellecks R406 (free base) Wurde zitiert von 108 Publikationen

R406 and its structural analogs reduce SNCA/α-synuclein levels via autophagic degradation [ Autophagy, 2025, 1-17.] PubMed: 40143425
TLR4 endocytosis and endosomal TLR4 signaling are distinct and independent outcomes of TLR4 activation [ EMBO Rep, 2025, 10.1038/s44319-025-00444-2] PubMed: 40204912
Hypoxia promotes metastasis by relieving miR-598-3p-restricted glycolysis in gastric cancer [ J Transl Med, 2024, 22(1):283] PubMed: 38491378
DNA hypomethylation of Syk induces oxidative stress and apoptosis via the PKCβ/P66shc signaling pathway in diabetic kidney disease [ FASEB J, 2024, 38(6):e23564] PubMed: 38522019
Loss of NF1 in Melanoma Confers Sensitivity to SYK Kinase Inhibition [ Cancer Res, 2023, 83(2):316-331] PubMed: 36409827
Identification of new drugs to counteract anti-spike IgG-induced hyperinflammation in severe COVID-19 [ Life Sci Alliance, 2023, 6(11)e202302106] PubMed: 37699657
Interleukin 33-mediated inhibition of A-type K+ channels induces sensory neuronal hyperexcitability and nociceptive behaviors in mice [ Theranostics, 2022, 12(5):2232-2247] PubMed: 35265208
B-cell antigen receptor expression and phosphatidylinositol 3-kinase signaling regulate genesis and maintenance of mouse chronic lymphocytic leukemia [ Haematologica, 2022, 107(8):1796-1814] PubMed: 35021605
Polyaniline-Based Glyco-Condensation on Au Nanoparticles Enhances Immunotherapy in Lung Cancer [ ACS Appl Mater Interfaces, 2022, 14(21):24144-24159] PubMed: 35579575
Spleen tyrosine kinase regulates keratinocyte inflammasome activation and skin inflammation induced by UVB irradiation [ Free Radic Biol Med, 2022, S0891-5849(22)00004-1] PubMed: 35007704

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