R406

R406 ist ein potenter Inhibitor der Immunglobulin-E (IgE)- und IgG-vermittelten Aktivierung der Fc-Rezeptor-Signalisierung. Diese Verbindung hemmt die Anti-IgE-induzierte Produktion und Freisetzung von LTC4 sowie von Zytokinen und Chemokinen, einschließlich TNFα, IL-8 und GM-CSF. Sie hemmt die Phosphorylierung des Syk-Substrat-Linkers für die Aktivierung von T-Zellen in Mastzellen und des B-Zell-Linkerproteins/SLP65 in B-Zellen. Diese Chemikalie bindet an die ATP-Bindungstasche von Syk und hemmt dessen Kinaseaktivität als ATP-kompetitiver Inhibitor mit einem K_i von 30 nM. Sie blockiert die Syk-abhängige FcR-vermittelte Aktivierung von Monozyten/Makrophagen und Neutrophilen sowie die Bcr-vermittelte Aktivierung von B-Lymphozyten. [1]

Diese Verbindung induziert signifikant die Apoptose chronisch lymphatischer Leukämiezellen (CLL) in Kokulturen mit Nurselike-Zellen und blockiert die CCL3- und CCL4-Sekretion durch CLL-Zellen als Reaktion auf die B-Zell-Antigenrezeptor (Bcr)-Auslösung. [2]

Es ist ein potenter Inhibitor der Thrombozyten-Signalisierung und -Funktionen, die durch FcγRIIA-Vernetzung mittels spezifischer Antikörper oder durch Seren von HIT-Patienten ausgelöst werden. [3]

R406 reduziert die kutane reverse passive Arthus-Reaktion bei prophylaktisch behandelten Mäusen bei 5 mg/kg um etwa 86 %. Diese Verbindung zeigt auch Wirksamkeit bei der Hemmung der Pfotenentzündung in Antikörper-induzierten Arthritis-Mausmodellen. [1]

Es beeinträchtigt die Makrophagen- oder Neutrophilenfunktion in angeborenen Immunantworten nicht nachteilig und weist trotz seines lymphozytopenischen Effekts eine minimale funktionelle Immuntoxizität auf. [4]

• In-vitro-Fluoreszenzpolarisations-Kinase-Assay

  R406 wird in DMSO seriell verdünnt und dann auf 1% DMSO in Kinasepuffer (20 mM HEPES, pH 7,4, 5 mM MgCl₂, 2 mM MnCl₂, 1 mM DTT, 0,1 mg/mL acetyliertes BGG) verdünnt. ATP und Substrat in Kinasepuffer werden bei Raumtemperatur hinzugefügt, was zu einer finalen DMSO-Konzentration von 0,2% führt. Die Kinase-Reaktionen werden in einem Endvolumen von 20 μL durchgeführt, das 5 mM HS1-Peptidsubstrat, 4 mM ATP enthält und durch Zugabe von 0,125 ng Syk in Kinasepuffer gestartet wird. Die Reaktion wird 40 Minuten lang bei Raumtemperatur durchgeführt. Die Reaktion wird durch Zugabe von 20 μL PTK-Quench-Mix gestoppt, der EDTA/Anti-Phosphotyrosin-Antikörper (1X final)/fluoreszierenden Phosphopeptid-Tracer (0,5X final), verdünnt in FP-Dilutionspuffer, enthält. Die Platte wird 30 Minuten lang im Dunkeln bei Raumtemperatur inkubiert und dann auf einem Polarion-Fluoreszenzpolarisations-Plattenleser abgelesen. Die Daten werden unter Verwendung einer Kalibrierungskurve, die durch Konkurrenz mit dem im Tyrosinkinase-Assay-Kit bereitgestellten Phosphopeptid-Kompetitor erstellt wurde, in die Menge des vorhandenen Phosphopeptids umgewandelt. Zur Bestimmung der IC50 wird diese Verbindung in elf Konzentrationen getestet und die Kurvenanpassung erfolgt mittels nichtlinearer Regressionsanalyse.

• Tiermodelle

  Arthritis is induced in C57BL/6 mice by intraperitoneal injection of 150 μL of pooled sera from adult K/BxN mice.

• Dosierungen

  1 or 5 mg/kg

• Verabreichung

  Administered orally