SB743921 HCl

Katalog-Nr.S2182 Charge:S218202

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Technische Daten

Formel

C31H33N2O3.HCl
Molekulargewicht 553.52 CAS-Nr. 940929-33-9
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (180.66 mM)
Ethanol 100 mg/mL (180.66 mM)
Water 46 mg/mL (83.1 mM)
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung SB743921 ist ein Kinesin-Spindelprotein (KSP)-Inhibitor mit einem Ki von 0,1 nM, fast keiner Affinität zu MKLP1, Kin2, Kif1A, Kif15, KHC, Kif4 und CENP-E. Phase 1/2.
Ziele
KSP (MX1 cells) KSP (Colo205 cells) KSP KSP (SKOV3 cells) KSP (MV522 cells) Mehr anzeigen
0.06 nM 0.07 nM 0.1 nM(Ki) 0.2 nM 1.7 nM
In vitro Der Ki von SB 743921 für menschliches und Maus-KSP beträgt 0,1 nM bzw. 0,12 nM, während der Ki von SB 743921 für andere Kinesin, einschließlich MKLP1, Kin2, mehr als 70 μM beträgt. SB 743921 blockiert die Bildung einer funktionellen mitotischen Spindel, wodurch es zu einem Zellzyklusarrest in der Mitose und anschließendem Zelltod kommt. SB-743921 hat eine verbesserte Wirksamkeit gegenüber Ispinesib sowohl in biochemischen als auch in zellulären Assays.
In vivo SB-743921 zeigt in vivo eine höhere Wirksamkeit gegen P388-Leukämie. SB-743921 hat eine signifikante Wirksamkeit in einem breiten Spektrum von Tumormodellen, die sich von denen der Taxane unterscheiden. Es wurde gezeigt, dass SB-743921 Aktivität gegen fortgeschrittene menschliche Tumor-Xenografts Colo205 (vollständige Regressionen), MCF-7, SK-MES, H69, OVCAR-3 (vollständige und partielle Regressionen) und HT-29, MX-1, MDA-MB-231, A2780 (Tumorwachstumsverzögerung) aufweist. SB-743921 verursacht nicht die Neuropathie, die oft mit den Tubulin-Wirkstoffen verbunden ist.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[2]
  • Biochemie-Assay

    Die Motordomänen von KSP (Aminosäuren 1–360) werden in Escherichia coli BL21(DE3) als COOH-terminale 6-His-Fusionsproteine exprimiert. Bakterienzellen werden in einem Mikrofluidizer mit einem Lysepuffer [50 mM Tris-HCl; 50 mM KCl, 10 mM Imidazol, 2 mM MgCl2, 8 mM β-Mercaptoethanol, 0,1 mM ATP (pH 7,4)] lysiert, und Proteine werden mittels Ni-NTA-Agarose-Affinitätschromatographie gereinigt, mit einem Elutionspuffer bestehend aus 50 mM PIPES, 10 % Saccharose, 300 mM Imidazol, 50 mM KCl, 2 mM MgCl2, mM β-Mercaptoethanol und 0,1 mM ATP (pH 6,8). Steady-State-Messungen der ATPase-Aktivität werden mit einem Pyruvatkinase-Lactatdehydrogenase-Detektionssystem durchgeführt, das das Auftreten von ADP mit der Oxidation von NADH koppelt. Absorptionsänderungen werden bei 340 nm überwacht. Alle biochemischen Experimente werden in PEM25-Puffer [25 mM Pipes/KOH (pH 6,8), 2 mM MgCl2, 1 mM EGTA] durchgeführt, ergänzt mit 10 μM SB 743921 für Experimente, die Mikrotubuli beinhalten. Die Raten der ADP-Freisetzung werden in einem Stopped-Flow-Apparat gemessen; die Abnahme der Fluoreszenz von MANT-ATP wird überwacht. Die Raten der Pi-Freisetzung werden in einem Stopped-Flow-Apparat gemessen, unter Verwendung von bakteriellem Phosphat-bindendem Protein, das mit 7-Diethylamino-3-((((2 maleimidyl)ethyl)amino)carbonyl)coumarin (MDCC)-Farbstoff modifiziert ist. Ki-Schätzungen von KSP-Inhibitoren werden aus den Dosis-Wirkungs-Kurven extrahiert, mit expliziter Korrektur für die Enzymkonzentration. Die Tubulin-Polymerisation wird durch Messung von Absorptionsänderungen bei 340 nm überwacht. Der Assay wird in 100-μL-Volumen in 96-Well-Halbflächen-Mikrotiterplatten unter Verwendung eines Mikroplattenlesers bei einer Inkubationstemperatur von 37 °C durchgeführt.
Zell-Assay:[2]
  • Zelllinien

    HeLa cells

  • Konzentrationen

    ~1 μM

  • Inkubationszeit

    24 hours

  • Methode

    All cells including HeLa cells are cultured in 10% FCS in RPMI 1640 in 5% CO2. We assessed 48-hour growth inhibition by serial dilution of SB 743921 relative to DMSO-treated cells in 96-well microtiter plates, using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium. Cell growth is represented as the ratio of absorbance of treated cells to DMSO control, plotted by concentration and fitted to a four-parameter curve. Concentrations at which cellular growth is inhibited by 50% are extrapolated from the curve fit. The DNA content of HeLa cells cultured in the presence or absence of 1 μM SB 743921 for 24 hours is assessed by propidium iodide staining and flow cytometry. Immunofluorescence images are collected of HeLa cells treated for 24 hours with 1 μM SB 743921, fixed with 2% formaldehyde, permeabilized, and stained with DM1-α, anti-γ-tubulin, and 1 μg/mL 4′,6-diamidino-2-phenylindole, and with Alexa 488 secondary goat antirabbit IgG and Rhodamine-X goat antimouse IgG. Images are collected with a DeltaVision Restoration Microscopy System at a magnification of ×600. Z stacks (0.2 μm) are collected, and out of focus information is removed by constrained iterative deconvolution. Z stacks are then compressed into to a single image plane.

Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    Female BDF1 mice with P388 lymphocytic leukemia cells

  • Dosierungen

    7.5 mg/kg- 30 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via i.p.

Referenzen

  • http://www.cytokinetics.com/pdf/AACR0906.pdf
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15126370/

Kundenproduktvalidierung

<p>HeLa cells expressing iRFP were seeded onto 96-well plates and incubated with buffer or different concentrations of SB743921.During the next five days, the plate was scanned with an infrared imaging system (upper panel) to quantify the infrared signals (lower panel).</p>

Daten von [ Mol Oncol , 2014 , 8(8):1404-18 ]

SB743921 inhibits MEK/ERK and AKT signaling in CML cells. Western blot analysis was performed on lysates from KCL22 cells treated with SB743921 (0.5 nM, 1 nM, 3 nM) to examine levels of ERK phosphorylation in comparison to levels of total ERK, and AKT phosphorylation in comparison to levels of total AKT. GAPDH was used as a control to ensure equivalent protein loading.

Daten von [ Leuk Lymphoma , 2014 , 1-8 ]

Sellecks SB743921 HCl Wurde zitiert von 22 Publikationen

Small Cell Lung Carcinoma Cells Depend on KIF11 for Survival [ Int J Mol Sci, 2024, 25(13)7230] PubMed: 39000337
Kinesins regulate the heterogeneity in centrosome clustering after whole-genome duplication [ Life Sci Alliance, 2024, 7(10)e202402670] PubMed: 39074902
Dual inhibition of KIF11 and BCL2L1 induces apoptosis in lung adenocarcinoma cells [ Biochem Biophys Res Commun, 2023, 678:84-89] PubMed: 37619315
Poziotinib for EGFR exon 20-mutant NSCLC: Clinical efficacy, resistance mechanisms, and impact of insertion location on drug sensitivity [ Cancer Cell, 2022, 40(7):754-767.e6] PubMed: 35820397
The therapeutic effect of KSP inhibitors in preclinical models of cholangiocarcinoma [ Cell Death Dis, 2022, 13-9:799] PubMed: 36123339
Kinesin spindle protein inhibitor exacerbates cisplatin-induced hair cell damage [ Arch Biochem Biophys, 2022, 731:109432] PubMed: 36273620
The Global Phosphorylation Landscape of SARS-CoV-2 Infection [ Cell, 2020, 182(3):685-712.e19] PubMed: 32645325
Therapeutic targeting of KSP in preclinical models of high-risk neuroblastoma [ Sci Transl Med, 2020, 12(562)eaba4434] PubMed: 32967973
Mitochondria Redistribution in Enterovirus A71 Infected Cells and Its Effect on Virus Replication [ Virol Sin, 2019, 34(4):397-411] PubMed: 31069716
High kinesin family member 11 expression predicts poor prognosis in patients with clear cell renal cell carcinoma [ J Clin Pathol, 2019, 72(5):354-362] PubMed: 30819726

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