Pracinostat (SB939)

Pracinostat (SB939) weist eine 100-fach höhere Selektivität für HDACs auf als für Zn-bindende Nicht-HDAC-Enzyme, Rezeptoren und Ionenkanäle. Diese Verbindung ist ein potenter Inhibitor der HDAC-Klasse I Isoenzyme, HDAC1, HDAC2, HDAC3 und HDAC8 mit IC50-Werten im Bereich von 43 nM bis 140 nM. Es hemmt die HDAC-Klasse II Isoenzyme, HDAC4, HDAC5, HDAC7, HDAC9 und HDAC10 signifikant mit IC50-Werten im Bereich von 40 nM bis 137 nM, mit Ausnahme von HDAC6, das einen IC50 von 1008 nM aufweist. Es hemmt HDAC11 der HDAC-Klasse IV Enzyme deutlich mit einem IC50 von 93 nM, zeigt aber keine hemmende Aktivität gegen SIRT 1 der Klasse III HDACs. Diese Chemikalie zeigt eine signifikante antiproliferative Aktivität gegen eine Vielzahl von Tumorzelllinien, insbesondere Leukämiezellen und kutane T-Zell-Lymphomzellen, mit IC50-Werten im Bereich von 50 nM (H9-Zellen) bis 170 nM (HEL92.1.7-Zellen). [1]

Die Verabreichung dieser Verbindung (25 mg/kg bis 100 mg/kg) zeigt eine dosisabhängige Antitumorwirksamkeit in einem Xenograft-Mausmodell für menschlichen Darmkrebs (HCT-116). Dies ist ungefähr doppelt so wirksam wie SAHA: diese Chemikalie bewirkt eine Tumorwachstumshemmung von 94 % gegenüber 48 % durch SAHA, beide bei der maximal verträglichen Dosis. Die orale Verabreichung dieses Mittels in einer Dosis von 50 mg/kg oder 75 mg/kg im APC^min genetischen Mausmodell für Darmkrebs im Frühstadium reduziert die Anzahl der Tumoren deutlich, verringert die kumulativen Hemoccult-Werte und erhöht die Hämatokritwerte effektiver. [1]

• HDAC-Enzymtest

  Alle rekombinanten HDAC-Enzyme, mit Ausnahme von SIRT1, werden in S*BIO kloniert und exprimiert. Die Reaktionsmischung, die 2,5 oder 5 μL des HDAC-Isoenzyms, Assay-Puffer (25 mM Tris-HCl, pH 7,5; 137 mM NaCl; 2,7 mM KCl, 1 mM MgCl₂ und 1 mg/mL BSA), verschiedene Konzentrationen dieser Verbindung und das fluorogene Deacetylase-Substrat Flour de LysTM in einem Gesamtreaktionsvolumen von 33 μL enthält, wird 2 Stunden bei Raumtemperatur inkubiert. 16 μL Flour de LysTM-Entwickler werden hinzugefügt und weitere 10 Minuten inkubiert. Das emittierte Licht wird bei 460 nm in einem Mikroplattenleser gemessen. IC50-Werte werden mit der XLfit-Software generiert.

• Zelllinien

  HCT116, A2780, ACHN, MCF7, HL-60, et al.

• Konzentrationen

  Dissolved in DMSO (stock concentration, 10 mM), final concentrations 1.5 nM to 100 μM

• Inkubationszeit

  96 hours

• Methode

  Cells are seeded in 96-well plates in the log growth phase at a predetermined optimal density, and rested for 24 hours (adherent cells) or 2 hours (suspension cells), respectively. They are exposed to different concentrations of this compound for 96 hours. Cell proliferation assays are done using either the CyQUANT cell proliferation assay kit for adherent cells or the CellTiter96 Aqueous One solution cell proliferation kit for suspension cells.

• Tiermodelle

  BALB/c nude mice bearing HCT-116 human colon cancer xenografts, Male and APC^min mice

• Dosierungen

  25, 50, 75, or 100 mg/kg

• Verabreichung

  Oral gavage once daily