SGI-1776 free base

Zusätzlich zu Pim zielt SGI-1776 auch potent auf FLT3 ab (IC50 = 44nM). Die Behandlung von AML-Zellen mit SGI-1776 führt zu einer konzentrationsabhängigen Induktion von Apoptosis. Wichtig ist, dass SGI-1776 auch in primären AML-Zellen zytotoxisch ist, unabhängig vom FLT3-Mutationsstatus, und zu einem Rückgang des Mcl-1-Proteins führt. [1]Die Behandlung von CLL-Zellen mit SGI-1776 führt zu einer konzentrationsabhängigen Induktion von Apoptosis. SGI-1776 induziert Apoptosis in CLL, und der Mechanismus beinhaltet eine Reduktion von Mcl-1. Eine Induktion von Apoptosis, gekoppelt mit der Hemmung der RNA-Synthese, wird in CLL-Zellen beobachtet, die mit SGI-1776 behandelt wurden. [2] SGI-1776 zeigt in vitro zytotoxische Aktivität mit einem medianen relativen IC50 von 3,1 mM. SGI-1776 induziert eine Tumorwachstumshemmung, die die Kriterien für eine intermediäre EFS T/C-Aktivität in 1 von 39 auswertbaren Modellen erfüllt. Im Gegensatz dazu induziert SGI-1776 vollständige Remissionen bei subkutanen MV4;11. [3]

In Übereinstimmung mit den Zellliniendaten zeigen Xenograft-Modellstudien an Mäusen mit MV-4-11-Tumoren eine Wirksamkeit von SGI-1776. [1] SGI-1776 hat präklinische Aktivität gegen Leukämie- und solide Tumorzelllinienmodelle mit IC50-Werten von 0,005–11,68 mM gezeigt. SGI-1776 induziert signifikante Unterschiede in der EFS-Verteilung in vivo in 9 von 31 soliden Tumor-Xenografts und in 1 von 8 der auswertbaren ALL-Xenografts. [3]

• Kinase-Assays

  Die Kinasehemmung wird durch radiometrische Assays gemessen, die vom KinaseProfiler-Dienst durchgeführt werden. Die Assays enthalten ein Peptidsubstrat, bekannte gereinigte rekombinante humane Kinasen, gamma-markiertes ATP, Magnesiumionen und eine feste Konzentration (1 μM) von SGI-1776. In einem Endreaktionsvolumen von 25 μL werden 5 bis 10 mU Pim1/2/3 mit 8 mM MOPS, pH 7,0; 0,2 mM Ethylendiamintetraacetat; 100 μM KKRNRTLTV; 10 mM MgAcetat; und [γ-³²P-ATP] inkubiert. Die Reaktion wird durch die Zugabe des MgATP-Mixes gestartet. Nach einer Inkubation von 40 Minuten bei Raumtemperatur wird die Reaktion durch Zugabe von 5 μL einer 3%igen Phosphorsäurelösung gestoppt. Anschließend werden 10 μL der Reaktion auf ein P30-Filtermat aufgetragen und dreimal für 5 Minuten in 75 mM Phosphorsäure und einmal in Methanol gewaschen, bevor es getrocknet und mittels eines Szintillationszählers gemessen wird.

• Zelllinien

  MV-4-11, MOLM-13, and OCI-AML-3 cell lines

• Konzentrationen

  0.1-10 μM

• Inkubationszeit

  24 hours

• Methode

  Cells are cultured in IMDM (ATCC) supplemented with 10% FBS and grown in a 37^oC incubator with 5% CO₂. Cells are routinely tested for Mycoplasma infection using a commercially available kit. Cells are treated with DMSO or various concentrations of SGI-1776 for 24 hours. Cells (1×10⁶) are washed, then resuspended in 100 μL of annexin binding buffer, mixed with 5 μL of FITC solution and 5 μL of propidium iodide (PI; 50 μg/mL) solution. For each sample, 1×10⁴ cells are measured using a Becton Dickinson FACSCalibur flow cytometer.

• Tiermodelle

  Female cNOD-SCID mice

• Dosierungen

  75 mg/kg and 200 mg/kg

• Verabreichung

  Administered via oral gavage (PO) on a daily ×5/week or twice/week schedu