Tamoxifen Citrate

Tamoxifen Citrate zeigt eine Antitumorwirkung aufgrund seiner antiöstrogenen Aktivität (ER). Die Werte für die scheinbare Affinität dieser Verbindung zum ER liegen zwischen 30 und 0,01% des für Estradiol erhaltenen Wertes, abhängig von der ER-Quelle (Spezies), der Proteinkonzentration und den für den Assay verwendeten Bedingungen. Die Bindung dieser Chemikalie an den ER führt ferner zu einer Hemmung der Expression von Östrogen-regulierten Genen, einschließlich Wachstumsfaktoren und angiogener Faktoren, die vom Tumor sezerniert werden und das Wachstum durch autokrine oder parakrine Mechanismen stimulieren können. Es induziert auch direkt den programmierten Zelltod. [1] Diese Verbindung übt eine hemmende Wirkung auf die [³H]-Thymidin-Inkorporation und DNA-Polymerase-Aktivität von MCF-7-Zellen aus und führt zu einer Reduzierung des DNA-Gehalts von Kulturen und der Zellzahlen. Diese hemmende Wirkung dieser Chemikalie auf das Wachstum von MCF-7-Zellen kann durch Zugabe von Estradiol zum Kulturmedium leicht aufgehoben werden. 2 und 6 μM dieses Wirkstoffs reduzieren den Anteil der Zellen in der S-Phase und erhöhen die Anzahl der Zellen in G1. Bei 10 μM führt es innerhalb von 48 Stunden zum Zelltod. [2] Diese Verbindung hemmt das Wachstum von MCF-7 mit einer IC50 von ~10 nM nach 10-tägiger Behandlung. Es hemmt die Plasminogenaktivatoraktivität von MCF-7 und unterdrückt die Estradiol-Stimulation der Plasminogenaktivatoraktivität. Diese Chemikalie führt auch zu minimalen Anstiegen der zellulären Progesteronrezeptorspiegel. [3] Es ist in der Lage, das Wachstum von Prostatakrebszellen PC3, PC3-M und DU145 mit einer IC50 im Bereich von 5,5-10 μM zu hemmen, was mit seiner Hemmung der Proteinkinase C und der Induktion von p21(waf1/cip1) zusammenhängt. [4]

Die Verabreichung von Tamoxifen Citrate an schnell wachsende, Estradiol-stimulierte MCF-7-Xenografts führt zu einer dosisabhängigen Verzögerung oder Einstellung des Tumorwachstums durch eine signifikante Verringerung der Tumorzellproliferation im Tumor. Diese Verbindung führt zu einer Verlangsamung des Tumorwachstums (Tumorverdopplungszeit, 12 Tage), einer signifikanten Zunahme der potenziellen Tumorverdopplungszeit (T_pot) (6,6 Tage) und einer Abnahme des Markierungsindex (%LI) (auf 8%) 23 Tage nach der Behandlung, verglichen mit unbehandelten Mäusen, die eine Volumenverdopplungszeit von 5 Tagen, eine T_pot von 2,3 Tagen und einen %LI von 23% zeigen. [5] Es besitzt nicht nur antiöstrogene, sondern auch östrogene Eigenschaften, abhängig von der Spezies, dem Gewebe und dem Gen. Diese Chemikalie zeigt positive Effekte auf Knochen- und Serumlipidkonzentrationen sowie eine Stimulation des Endometriums. [1]

• Kompetitive Bindungsassays

  Zellen werden aus 150 cm² großen T-Kolben geerntet, und das Zytosol wird mit einer Proteinkonzentration von ungefähr 2 mg/mL in Phosphatpuffer hergestellt. Aliquots dieses 180.000 ×g-Überstands werden dann mit verschiedenen Konzentrationen dieser Verbindung und 2,5 nM [³H]Estradiol für 16 Stunden bei 0-4 ℃ inkubiert. Die freien Steroide werden durch Dextran-Kohle [10 μL von 0,5% Dextran C-5% Norit A in TE-Puffer] für 1 Stunde bei 0 ℃ absorbiert, und Aliquots werden nach Zentrifugation bei 800 ×g, 30 min gezählt. Die relative Bindungsfähigkeit jedes Kompetitors wird als das Verhältnis der Konzentration von radioinertem Estradiol/Kompetitor genommen, die erforderlich ist, um die Hälfte der spezifischen [³H]Estradiol-Bindung zu hemmen, wobei die Affinität von Estradiol auf 100% gesetzt wird.

• Zelllinien

  Human breast cancer cells MCF-7

• Konzentrationen

  ~1 μM

• Inkubationszeit

  10 days

• Methode

  MCF-7 cells are seeded into T-25 flasks (1.5×10⁵ cells/flask) and grown for 2 days in the MEM supplemented with 10 mM HEPES buffer, gentamicin (50 μg/mL), penicillin (100 units/mL), streptomycin (0.1 mg/mL), bovine insulin (6 ng/mL), hydrocortisone (3.75 ng/mL), and 5% calf serum that has been treated with dextran-coated charcoal for 45 min at 55 ℃ to remove endogenous hormones. The medium is then changed to MEM supplemented as described above, except that it contains 2% charcoal dextran-treated calf serum and various concentrations of this compound. At the end of incubation, cell numbers are counted.

• Tiermodelle

  Human breast carcinoma xenografts MCF-7

• Dosierungen

  2 cm Tamoxifen capsules

• Verabreichung

  Subcutaneous implantation