Degrasyn (WP1130)

Zusätzlich zur Induktion einer schnellen Herunterregulierung von Bcr/Abl ohne Beeinflussung von Bcr oder c-Abl reguliert Degrasyn (WP1130) auch die Stabilität von Jak2 und c-Myc, ohne andere Kinasen (HER1, HER2, c-Kit, FAK, ERK1, ERK2, Akt, Btk, Src und Src-verwandte Kinasen) oder Transkriptionsfaktoren (Wildtyp p53, STAT1, STAT3, STAT5, c-Jun, NF-κB und Max) zu beeinflussen. Im Gegensatz zu Adaphostin induziert diese Verbindung eine Herunterregulierung von Bcr/Abl innerhalb von 60 Minuten. Es ist wirksamer bei der Induktion der Apoptose von myeloischen und lymphatischen Tumorzellen mit einem IC50 von ~0,5-2,5 μM im Vergleich zu normalen CD34⁺ hämatopoetischen Vorläufern, dermalen Fibroblasten oder Endothelzellen mit einem IC50 von ~5-10 μM. Diese Chemikalie (5 μM) reguliert spezifisch und schnell sowohl Wildtyp- als auch T315I-mutantes Bcr/Abl-Protein herunter, ohne die bcr/abl-Genexpression zu beeinflussen oder den proteasomalen Abbauweg in chronischen myeloischen Leukämie (CML)-Zellen zu aktivieren, begleitet von der Induktion der Apoptose. Es ist wirksamer bei der Reduzierung der Koloniebildung leukämischer Zellen im Vergleich zu normalen Progenitorzellen und wirksam gegen primäre Leukämiezellen, die die T315I-Mutation aufweisen. [1] Diese Verbindung induziert einen schnellen proteasomal-abhängigen Abbau des c-Myc-Proteins in MM-1-Multiplen Myelom- und anderen Tumorzelllinien, korreliert mit der Tumorwachstumsinhibition. [2] Im Gegensatz zu AG490 wirkt es als teilweise selektiver DUB Inhibitor, um eine schnelle und ausgeprägte Akkumulation polyubiquitinierter (K48/K63-verknüpfter) Proteine in juxtanukleären Aggresomen zu induzieren, ohne die Proteasomaktivität zu beeinflussen. Diese Chemikalie (5 μM) hemmt direkt die DUB-Aktivität von USP9x, USP5, USP14, UCH-L1 und UCH37, aber nicht UCH-L3, was zu einer Herunterregulierung antiapoptotischer und einer Hochregulierung proapoptotischer Proteine, wie MCL-1 und p53, führt. [3]

Die Verabreichung von WP1130 hemmt das Wachstum von K562-Tumoren sowie von sowohl Wildtyp Bcr/Abl als auch T315I-mutant Bcr/Abl-exprimierenden BaF/3-Zellen, die in Nacktmäuse transplantiert wurden. [1] Im Einklang mit der Herunterregulierung von c-Myc zeigt diese Verbindung eine potente hemmende Aktivität gegen A375-Melanomtumoren, die in Nacktmäusen etabliert wurden. [2]

• Zelllinien

  BV173, BV173R, K562, and BaF/3

• Konzentrationen

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Inkubationszeit

  72 hours

• Methode

  Cells are treated with increasing concentrations of WP1130 (0.08-10 μM) in 96-well plates. Plates are incubated at 37 °C for 72 hours, after which 20 μL of MTT reagent is added, and the plates are incubated at 37 °C for another 2 hours. Cells are lysed with 100 μL lysis buffer (20% sodium dodecyl sulfate [SDS] in 50% N, N-dimethylformamide adjusted to pH 4.7 with 80% acetic acid and 1 M hydrochloric acid; final concentration of acetic acid is 2.5% and hydrochloric acid is 2.5%) and incubated for 6 hours. The optical density of each sample at 570 nm is determined with a SPECTRA MAX M2 plate reader.

• Tiermodelle

  Swiss Nu/Nu mice transplanted with K562 tumor cells, BaF/3wt cells, or BaF/3/T315I cells

• Dosierungen

  ~40 mg/kg every other day

• Verabreichung

  Injected intraperitoneally