WYE-354

Katalog-Nr.S1266 Charge:S126601

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Technische Daten

Formel

C24H29N7O5
Molekulargewicht 495.53 CAS-Nr. 1062169-56-5
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 99 mg/mL (199.78 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
4%DMSO 30%PEG300 5%Tween80 61%ddH2O

Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.

 5.000mg/ml (10.09mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 40 μL of 125 mg/ml clarified DMSO stock solution to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 610 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung WYE-354 ist ein potenter, spezifischer und ATP-kompetitiver Inhibitor von mTOR mit einem IC50 von 5 nM, der mTORC1/P-S6K(T389) und mTORC2/P-AKT(S473) blockiert, nicht aber P-AKT(T308). Er ist selektiver für mTOR als für PI3Kα (>100-fach) und PI3Kγ (>500-fach).
Ziele
mTOR
5 nM
In vitro WYE-354 hemmt auch mehrere PI3Ks in mikromolaren Konzentrationen. In HEK293-Zellen hemmt diese Verbindung (0,2 μM–5 μM) sowohl mTORC1 als auch mTORC2 effektiv. Sie (0,3 μM–10 μM) blockiert signifikant die mTOR-Signalübertragung und die Akt-Aktivierung in U87MG- und MDA361-Zellen. Des Weiteren hemmt diese Chemikalie die Proliferation in Tumorzelllinien, einschließlich MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, LNCap, A498 und HCT116, mit IC50-Werten im Bereich von 0,28 μM bis 2,3 μM. Die durch diese Verbindung induzierte Apoptose wird von einem G1-Zellzyklusarrest und der Aktivierung von Caspasen begleitet. In endothelialen HUVEC-Zellen hemmt sie (10 nM–1 μM) auch die mTORC1- und mTORC2-Signalübertragung, wie durch die Dephosphorylierung von S6-ribosomalem Protein bzw. Akt gezeigt wurde. Ferner aktiviert diese Chemikalie (10 nM–1 μM) die Mitogen-aktivierte Proteinkinase (MAPK)-Signalübertragung, was auf ihre Hemmung von mTORC1 zurückzuführen sein könnte.
In vivo In einem Mäuse-Xenograft-Modell von PTEN-null PC3MM2-Tumoren hemmt WYE-354 (50 mg/kg) effektiv die mTOR-Signalübertragung und das Tumorwachstum.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • mTOR-Inhibitor-Assays

    Die Assays werden in 96-Well-Platten für 2 Stunden bei Raumtemperatur in 25 μL durchgeführt, enthaltend 6 nM Flag-TOR(3.5), 1 μM His6-S6K und 100 μM ATP. Die Assays werden mittels DELFIA unter Verwendung des Eu-phospho-p70S6K T389-Antikörpers durchgeführt und detektiert. Für die Inhibitor- versus ATP-Matrix-Konkurrenz werden mTOR-Kinase-Reaktionen mit variierenden ATP-Konzentrationen (0, 25, 50, 100, 200, 400 und 800 μM) in Kombination mit variierenden Konzentrationen dieser Verbindung durchgeführt. Die Assays enthielten 12 nM Flag-TOR(3.5), 1 μM His-S6K und wurden 30 Minuten inkubiert. Die Assayergebnisse werden ähnlich mittels DELFIA detektiert und zur Erstellung von doppelt reziproken Diagrammen verarbeitet.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    Tumor cell lines including MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, LNCap, DU145, A498, and HCT116

  • Konzentrationen

    0–50 μM, dissolved in DMSO

  • Inkubationszeit

    72 hours

  • Methode

    Cells are plated in 96-well plates at 1000 to 3000 cells per well for 24 hours, treated with DMSO or varying concentrations of WYE-354. Viable cell densities are determined 72 hours later by MTS assay employing a CellTiter 96 kit. The effect of each treatment is calculated as percent of control growth relative to the DMSO-treated cells grown in the same culture plate. Inhibitor dose response curves are plotted for determination of IC50 values.
Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    Nude mice (BALB/c, nu/nu, female) bearing PC3MM2 xenograft

  • Dosierungen

    50 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via intraperitoneal injection

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19584280/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21439267/

Kundenproduktvalidierung

<p>After starved in serum-free medium for 24h,A549 cells incubated with the indicated concentrations of WYE-354 for 3h,followed by 20-minute stimolation of 100ng/ml EGF.</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

<p>For MTT assays, cells (2,000 ~ 5,000 cells/well) were subcultured into 96-well plates according to their growth properties. Cell proliferation was assayed at 72 hr after treatment of WYE-354 by adding 20 μl of 5 mg/ml 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) solution per 100 μl of growth medium. After incubating for 3-4 h at 37°C, the media were removed and 150 µl/well of MTT solvent (either absolute DMSO or isopropanol containing 4 μM HCl and 0.1% Nonidet-40) was added to dissolve the formazan.</p>

, , Dr. Yong-Weon Yi from Georgetown University Medical Center

<p>HCT116 were left untreated (C) or stimulated for 5 h with serum (FBS) and rapamycin or WYE-354 at the indicated concentrations.</p>

, , Dr. Pierre P. Roger from Free University of Brussels

MTOR Inhibitor WYE-354 Had Anti-tumor Activity Comparable to that of miR-199a-3p. The histological evaluation of liver lesions showed a similar reduction in number and size of tumor nodules in mice treated with both miR-199a-3p and the MTOR inhibitor. In the figure, miR-199a-3p is indicated as miR-199.

Daten von [ , , Mol Ther Nucleic Acids, 2018, 11:485-493 ]

Sellecks WYE-354 Wurde zitiert von 11 Publikationen

A Novel Pipeline for Drug Repurposing for Bladder Cancer Based on Patients' Omics Signatures [ Cancers (Basel), 2020, 12(12)E3519] PubMed: 33255925
WYE-354 restores Adriamycin sensitivity in multidrug-resistant acute myeloid leukemia cell lines. [ Oncol Rep, 2019, 41(6):3179-3188] PubMed: 30942458
miR-199a-3p Modulates MTOR and PAK4 Pathways and Inhibits Tumor Growth in a Hepatocellular Carcinoma Transgenic Mouse Model [Callegari E, et al. Mol Ther Nucleic Acids, 2018, 11:485-493] PubMed: 29858083
Inhibition of RPTOR overcomes resistance to EGFR inhibition in triple-negative breast cancer cells [ Int J Oncol, 2018, 52(3):828-840] PubMed: 29344641
The Toxmatrix: Chemo-Genomic Profiling Identifies Interactions That Reveal Mechanisms of Toxicity [ Chem Res Toxicol, 2018, 31(2):127-136] PubMed: 29156121
Autophagy inhibition sensitizes WYE-354-induced anti-colon cancer activity in vitro and in vivo. [Wang L, et al. Tumour Biol, 2016, 37(9):11743-11752] PubMed: 27020593
β-TrCP1 degradation is a novel action mechanism of PI3K/mTOR inhibitors in triple-negative breast cancer cells. [Yi YW, et al. Exp Mol Med, 2015, 47:e143] PubMed: 25721419
NFκB up-regulation of glucose transporter 3 is essential for hyperactive mammalian target of rapamycin-induced aerobic glycolysis and tumor growth. [ Cancer Lett, 2015, 359(1):97-106] PubMed: 25578782
NFκB up-regulation of glucose transporter 3 is essential for hyperactive mammalian target of rapamycin-induced aerobic glycolysis and tumor growth. [Zha X, et al. Cancer Lett, 2015, 359(1):97-106]
mTOR regulates phagosome and entotic vacuole fission. [Krajcovic M, et al. Mol Biol Cell, 2013, 24(23):3736-45] PubMed: 24088573

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