Anisomycin (Flagecidin)

Katalog-Nr.S7409 Charge:S740907

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Technische Daten

Formel

C14H19NO4
Molekulargewicht 265.3 CAS-Nr. 22862-76-6
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 53 mg/mL (199.77 mM)
Ethanol 53 mg/mL (199.77 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Anisomycin (Flagecidin, Wuningmeisu C) ist ein bakterielles Antibiotikum, das aus Streptomyces griseolus isoliert wurde, das die Proteinsynthese hemmt und auch als JNK-Aktivator wirkt. Anisomycin reguliert die Autophagy hoch und erhöht die Apoptosis.
Ziele
JNK
In vitro Anisomycin (3 μM) verringert die Proteinsynthese in MDA16- und MDA-MB-468-Zellen und reduziert die Koloniebildung durch MDA-MB-468-Zellen. Diese Verbindung führt zu einer Zunahme der Anzahl apoptotischer Zellen in MDA-MB-468-Kulturen, jedoch nicht in MDA16-Kulturen. Es aktiviert die JNK-Phosphorylierung in MDA-MB-468-Zellen. In U251- und U87-Zellen hemmt diese Chemikalie (0,01-8 μM) das Zellwachstum in zeit- und konzentrationsabhängiger Weise mit den IC50-Werten (48 h) von 0,233 bzw. 0,192 μmol/L. Es (4 μM) verursacht 21,5 % und 25,3 % Apoptose in U251- bzw. U87-Zellen und aktiviert p38 MAPK und JNK, während ERK1/2 inaktiviert wird. Diese Verbindung (4 μM) reduziert den PP2A/C-Untereinheitspiegel in zeitabhängiger Weise in U251- und U87-Zellen. Es hemmt die EAC-Zellproliferation in konzentrationsabhängiger Weise.
In vivo Die peritumorale Verabreichung von Anisomycin (5 mg/kg) unterdrückt das Wachstum des Ehrlich-Ascites-Karzinoms (EAC) signifikant, was zum Überleben von etwa 60 % der Mäuse 90 Tage nach der EAC-Inokulation führt.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[2]
  • JNK-Phosphorylierung

    500.000 Zellen/Well werden in 6-Well-Platten ausgesät und über Nacht inkubiert. Die Zellen werden dann 1 h lang mit Testverbindungen oder DMSO als Vehikelkontrolle (Endkonzentration 1 % v/v) inkubiert. Puromycin wird hinzugefügt (Endkonzentration 18 μM) und die Zellen weitere 10 min inkubiert, um neu entstehende Polypeptidketten zu markieren. Die Hintergrundmarkierung wird durch Inkubation von Zellen ohne Puromycin bestimmt. Die Zellen werden dann in HBSS gewaschen, durch Schaben geerntet und zentrifugiert (300 g, 5 min). Die Zellen werden in 0,5 mL 50 mM DTT, das Phosphataseinhibitoren enthält, resuspendiert und 10 min bei 95 °C inkubiert. Die Proben werden dann in flüssigem Stickstoff schockgefroren und bei -20 °C gelagert, bis sie geblottet werden. Proben (20–30 μg Protein/Probe) werden auf eine PVDF-Membran geblottet. Die Membran wird blockiert und über Nacht bei 4 °C mit einem Anti-phospho-Thr183/Tyr185-JNK-Antikörper inkubiert. Sekundärantikörper werden verwendet, um den primären Antikörper zu markieren und mit einem Infrarot-Scanner nachgewiesen. Die Intensität des Fluoreszenzsignals für den Anti-phospho-JNK-Antikörper wird hintergrundkorrigiert und für die Beladung normalisiert.
Zell-Assay:[4]
  • Zelllinien

    Ehrlich ascites carcinoma (EAC) cells

  • Konzentrationen

    500 ng/mL

  • Inkubationszeit

    48 h

  • Methode

    For the assay, EAC cells are plated in 96-well plates at a density of 10,000 cells/well/200 µL of medium. The cells are treated with the different concentrations of this compound for 48 h. Adriamycin (500 ng/mL) is used as a positive control. 0.5 mg/mL of MTT is added to each well. 4 h later, the formazan product of MTT reduction is dissolved in DMSO, and absorbance is measured at 570 nm using a Model 680 microplate reader.
Tierstudie:[4]
  • Tiermodelle

    Male BALB/c mice

  • Dosierungen

    5 mg/kg

  • Verabreichung

    peritumorally

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9154836/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24333448/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22684030/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23525555/

Kundenproduktvalidierung

<p>Effect of TMZ (100 μmol/l for U87 cells, 50 μmol/l for U251 cells), anisomycin (4 μmol/l), SB203580 (10 μmol/l), TMZ+SB203580 (10 μmol/l) treatment on thephosphorylation of p38 and AQP4 for 24 h in U87 cells and U251 cells, detected by Western blotting. (A) Protein expression of p-p38, p38 and AQP4 in U87 cells with differenttreatments. (B) The ration of p-p38/p38 in U87 cells. (C) The proportion of AQP4 in GAPDH in U87 cells. (D) Protein expression of p-p38, p38 and AQP4 in U251 cells withdifferent treatments. (E) The ration of p-p38/p38 in U251 cells. (F) The proportion of AQP4 in GAPDH in U251 cells. *P< 0.05 versus the control group</p>

, , J Cell Biochem, 2017, 118(12):4905-4913

Inhibition of JNK also alleviated the mitophagy activity via mitochondria and lysosome co-staining. Anisomycin (Ani)

Daten von [ , , Redox Biol, 2018, 14:59-71 ]

The co-immunofluorescence of mitochondria and lysosomes. DUSP1 alleviated the overlap of mitochondria and lysosomes. Anisomycin (Ani) is the activator of JNK, which was used to reactivate the JNK activity in DUSP1-overepxressed cells.

Daten von [ , , Redox Biol, 2018, 14:576-587 ]

Immunofluorescence assay for Fis1 and p-CaMKII in response to MKP1 overexpression and JNK activation in the presence of hyperglycaemia.

Daten von [ , , Cell Physiol Biochem, 2018, 51(4):1778-1798 ]

Sellecks Anisomycin (Flagecidin) Wurde zitiert von 86 Publikationen

Dominant interfering CARD11 variants disrupt JNK signaling to promote GATA3 expression in T cells [ J Exp Med, 2025, 222(6)e20240272] PubMed: 40111223
Disrupting AGR2/IGF1 paracrine and reciprocal signaling for pancreatic cancer therapy [ Cell Rep Med, 2025, 6(2):101927] PubMed: 39914384
AMBP protects against aortic valve calcification by inhibiting ERK1/2 and JNK pathways mediated by FHL3 [ Theranostics, 2025, 15(10):4398-4415] PubMed: 40225558
Portimine A toxin causes skin inflammation through ZAKα-dependent NLRP1 inflammasome activation [ EMBO Mol Med, 2025, 10.1038/s44321-025-00197-4] PubMed: 39948420
UFMylation safeguards human hepatocyte differentiation and liver homeostasis by regulating ribosome dissociation [ Cell Rep, 2025, 44(5):115686] PubMed: 40347470
sFRP5 ameliorates atherosclerosis by suppressing the JNK/TLR9 pathway in macrophages [ Transl Res, 2025, 281:1-13] PubMed: 40409587
GRASPs link Reelin to the Golgi during neocortical development to control neuronal migration and dendritogenesis [ Commun Biol, 2025, 8(1):572] PubMed: 40188221
PRDX1 knockdown promotes erastin-induced ferroptosis and impedes diffuse large B-cell lymphoma development by inhibiting the MAPK/ERK pathway [ BMC Cancer, 2025, 25(1):806] PubMed: 40307771
Promoter Methylation of WIF1 is Involved in IL-17-Induced Chondrocyte Inflammatory Injury and Matrix Degradation via Promoting Wnt5a/MAPK-JNK Signaling [ Mol Biotechnol, 2025, none] PubMed: 40072748
Transcriptional landscape and predictive potential of long noncoding RNAs in peritoneal recurrence of gastric cancer [ Mol Cancer, 2024, 23(1):284] PubMed: 39736670

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