Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222)

Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222) hemmt bei 5 μM vollständig die Polymerisation von aus Rindergehirnen isoliertem Tubulin, aber im Gegensatz zu VCR führt diese Verbindung bei einer hohen Konzentration von 80 μM nicht zur Aggregation von Tubulin. Bei 16 μM depolymerisiert es auch stark das polymerisierte Tubulin (IC50 = 3,8 μM). Die Zugabe von Ansamitocin p-3 zu kultivierten Zellen blockiert die morphologische Veränderung von AC-Zellen von fibroepithelioiden zu einem Gliazelltyp, die durch die Exposition gegenüber einer bestimmten Konzentration von Dibutyryl-cyclischem Adenosin-3':5'-monophosphat verursacht wird. Darüber hinaus bewirkt es bei 16 nM, dass das gut definierte Netzwerk zytoplasmatischer Mikrotubuli von A31-Zellen schnell zerstreut wird. Eine kurzzeitige Behandlung mit dieser Verbindung hemmt auch die DNA-Synthese in A31-Zellen oder KB-Zellen. Diese Ergebnisse bestätigen, dass es durch Interferenz mit dem Mikrotubuli-Assemblierungssystem wirkt, was zu einer Hemmung der Spindel faserbildung und letztendlich zur Zytotötung führt. [1] Diese Verbindung zeigt eine potente Zytotoxizität gegen A-549-, HT-29- und MCF-7-Zellen in einer dosisabhängigen Weise mit ED50 von 4 ×10^-7, 4 × 10^-7 und 2 × 10^-6 μg/mL. [2] Es zeigt auch Zytotoxizität gegen HCT-116-Zellen mit einer viel niedrigeren EC50 von 0,081 nM. [3] Ansamitocin p-3 verstärkt die Wirkung von Strahlung sowohl in Drosophila-Zellen als auch in menschlichen Krebszellen auf p53-abhängige Weise. [4]

Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222)-Behandlung (>1 μg) unterdrückt signifikant das Wachstum von Leukämie SN36 und induziert einen erhöhten Arrest in der Metaphase von P388-Leukämiezellen. Bei 25 μg/kg/Tag verlängert es die Überlebenszeit von Mäusen mit i.p. B16-Melanom um 130%. Diese Verbindung verlängert auch signifikant die Überlebenszeit von Mäusen mit Ehrlich-Asziteskarzinom, Sarkom 180 und P815-Mastozytom, während sie die Überlebenszeit von Mäusen mit Aszites-MOPC-104E-Myelom, Leukämie L1210 und Leukämie C1498 leicht verlängert. [1]

• Polymerisationshemmtest

  Nach Zugabe von 100 μL verschiedener Konzentrationen von Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222)-Lösung (GTP-minus-MES-Puffer) oder 1 M Tris-Puffer, pH 8,4 (für Blindwert), zu 400 μL Rindertubulinlösung (1 mg/mL in kaltem MES-Puffer), die 10 bis 15 Minuten bei 0 °C gehalten wurde, wird die Mischung in einem Wasserbad bei 37 °C für 30 bis 60 Minuten erwärmt. Die Polymerisation von Tubulin wird durch eine Zunahme der Trübung der Mischung während des Erwärmens verfolgt. Die Trübungsmessung wird bei 460 nm mit einem Hitachi Typ 101 Spektrophotometer durchgeführt.

• Zelllinien

  A31 and KB

• Konzentrationen

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Inkubationszeit

  ~24 hours

• Methode

  Cells are synchronized and then exposed to various concentrations of Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222) for ~24 hours. After pulse-labeling at 37 °C for 1 hour with [³H]thymidine (5 Ci/mM, 1 µCi/mL) in 1 mL of the medium, the cells on coverslips are fixed with methanol:acetic acid (3:1). The acid-soluble fraction is washed out from the cells, and the radio activity of each coverslip is determined by a liquid scintillation counter.

• Tiermodelle

  Female DBA/2 mice bearing P388, L1210, or P815 cells, C57BL/6 mice bearing B16, or C1498 cells, ICR mice bearing sarcoma 180 and EAC, and BALB/c mice bearing MOPC-104E cells

• Dosierungen

  ~200 μg/kg

• Verabreichung

  Administered i.p. or i.v. daily