In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich. * Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen. * Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)
Vorbereitung von Stammlösungen
Biologische Aktivität
Beschreibung
Apoptosis Activator 2 induziert stark die caspase-3-Aktivierung, PARP-Spaltung und DNA-Fragmentierung, was zur Zerstörung von Zellen (Apaf-1-abhängig) mit einem IC50 von ~4 μM führt, inaktiv gegenüber HMEC-, PREC- oder MCF-10A-Zellen.
Ziele
Caspase-3
In vitro
Apoptosis Activator 2 (20 μM) erhöht bei reduzierter Cyto-c-Konzentration den Apaf-1-Anteil im Apoptosom um das 1,5-fache auf 33 %. Diese Verbindung erhöht das Ausmaß der caspase-3-Aktivierung bei reduziertem Cyto-c-Spiegel und die caspase-3-Aktivierung um das 4-fache. Es induziert stark die caspase-3-Aktivierung, PARP-Spaltung und DNA-Fragmentierung und tötet schließlich Zellen mit einem IC50 von 4 μM ab. Dieser Aktivator induziert die Apoptosis von PBL, HUVEC, Jurkat, Molt-4, CCRF-CEM, BT-549, MDA-MB-468 und NCI-H23 mit einem IC50 von 50 μM, 43 μM, 4 μM, 6 μM, 9 μM, 20 μM, 44 μM und 35 μM. Er übt eine zytostatische Wirkung auf die Mehrheit der getesteten Tumorzelllinien aus und hemmt das Zellwachstum bei 10 μM in 40 von 48 getesteten Zelllinien um 50-100 %. Diese Chemikalie induziert den Zelltod durch Auslösen der Apoptosom-Bildung. Der Grad der En1-Expression hat keinen signifikanten Einfluss auf die Überlebensraten von ventralen Mittelhirnkulturen für diese Verbindung (-8,1 ± 6,0 %). Die Überlebensrate wird nicht signifikant verändert, wenn die anderen drei Reagenzien für diesen Aktivator verwendet werden (-10,7 ± 4,7 %). Diese Verbindung (10 μM) induziert Apoptosis in AGS-Zellen, wie durch apoptotische DNA-Leiter und Tunel-Assay evaluiert. Sie (10 μM) verstärkt die Induktion von Apoptosis durch Anti-TROP2-konjugierte Liposomen. Cyclohexamid (10 μg/mL) oder zVAD (50 μM) schützt signifikant vor der Toxizität dieser Chemikalie in neuronalen Kulturen. Dieser Aktivator (3 μM) führt zu zahlreichen Neuronen mit pyknotischen Kernen, die auf einen Zelltod durch Apoptosis hindeuten. DHT (10 nM) oder E2 (10 nM) schützt signifikant vor der Toxizität dieser Verbindung in neuronalen Kulturen.
Zytoplasmatische Extrakte von HeLa-Zellen werden nach zuvor veröffentlichten Berichten hergestellt. Apoptosis Activator 2 in DMSO werden in 96-Well-Mikrotiterplatten in einer Endkonzentration von 1 mM (endgültige DMSO-Konzentration beträgt 1 % Vol/Vol) verteilt. Zu jeder Vertiefung werden 250 μg Gesamtprotein aus zytoplasmatischen Extrakten in HEB-Puffer (50 mM Hepes, pH 7,4/50 mM KCl/5 mM EGTA/2 mM MgCl), mit 2 mM DTT, 2 μM Cyto c und 0,5 μM DEVD-AFC (Asp-Glu-Val-Asp-7-amino-4-trifluoromethylcoumarin)-Substrat in einem Gesamtvolumen von 150 μL gegeben. Die Platten werden bei 37 ℃ inkubiert und die Fluoreszenz wird in einem LJL Biosystems Plattenlesegerät in 10-Minuten-Intervallen abgelesen.
All viable cells within the defined field of a microscope reticle grid are counted using a manual mechanical counter by an experimenter blinded to condition. Cells are scored viable on the basis of both positive staining with the vital dye calcein acetoxymethyl ester and the morphological criterion of a smooth, spherical soma. Counts of viable cells are made in four non-overlapping fields per culture well with each condition represented by 3 separate wells. The number of viable cells counts per well for vehicle-treated control conditions ranged from 100-200. All experiments are repeated in at least 3 independent culture preparations. Raw cell count data are statistically analyzed with one-way ANOVA, followed by between group comparisons using the Fisher LSD test (significance indicated by P < 0.05). Cell viability is presented graphically as a percentage of live cells in the vehicle-treated control condition.
Referenzen
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12808146/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19291307/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23181231/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20561156/
Sellecks Apoptosis Activator 2 Wurde zitiert von 5 Publikationen
ARNTL2 upregulation of ACOT7 promotes NSCLC cell proliferation through inhibition of apoptosis and ferroptosis
[ BMC Mol Cell Biol, 2023, 24(1):14]
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