Copanlisib (BAY 80-6946)

Sowohl in KPL4-Zellen als auch in LPA-stimulierten PC3-Zellen reduziert BAY 80-6946 die pAKT-Spiegel. In einer Untergruppe menschlicher Krebszelllinien mit PIK3CA-Mutationen und/oder Überexpression von HER2 zeigt BAY 80-6946 antiproliferative Aktivität und induziert Apoptose. [1] Die Kombination von HER2-gerichteten Therapien und BAY 80-6946 hemmt das Wachstum effektiver als jede Therapie allein und kann die Empfindlichkeit gegenüber Trastuzumab und Lapatinib in Zellen wiederherstellen. [2]

In einem Ratten-KPL4- oder HCT116-Tumor-Xenotransplantatmodell induziert BAY 80-6946 (6 mg/kg, i.v.) eine 100%ige vollständige Tumorrückbildung. Bei Nacktmäusen mit Erlotinib-resistentem, patientenabgeleitetem NSCLC (Lu7860) und patientenabgeleiteten luminalen Brusttumormodellen (MAXF1398) verursacht BAY 80-6946 (14 mg/kg, i.v.) ebenfalls eine Tumorwachstumshemmung. [1]

• Biochemische Lipidkinase-Assays

  Die Wirkung von BAY 80-6946 auf die PI3Kα-, PI3Kβ- und PI3Kγ-Aktivität wird durch die Hemmung des ³³P-Einbaus in Phosphatidylinositol (PI) in 384-Well-MaxiSorp®-Platten gemessen, die mit 2 µg/Well PI und Phosphatidylserin (PS) (1:1 molares Verhältnis) beschichtet sind. In jedem PI3K-Isoform-Assay werden 9 µL Reaktionspuffer (50 mM MOPSO, pH 7,0, 100 mM NaCl, 4 mM MgCl₂, 0,1 % BSA) verwendet, der 7,5 ng His-getaggtes N-terminal trunkiertes p110α- oder p110β-Protein oder 25 ng gereinigtes humanes p110γ-Protein enthält. Die Reaktion wird durch Zugabe von 5 µL einer 40-µM-ATP-Lösung gestartet, die 20 µCi/mL [³³P]-ATP enthält. Nach 2 Stunden Inkubation bei Raumtemperatur wird die Reaktion durch Zugabe von 5 µL einer 25-mM-EDTA-Lösung beendet. Die Platten werden gewaschen und anschließend 25 µL Ultima Gold™ Szintillationscocktail hinzugefügt. Die in das immobilisierte PI-Substrat eingebaute Radioaktivität wird mit einem BetaPlate Liquid Scintillation Counter bestimmt.

• Zelllinien

  A series of cancer cell lines

• Konzentrationen

  ~5 μM

• Inkubationszeit

  72 hours

• Methode

  Cell proliferation over a 72-hour period is determined using the CellTiter-Glo® luminescent cell viability kit. Briefly, cells are plated in separate microtiter plates. Following an overnight incubation at 37ºC, luminescence values in the t=0 hour plates are determined. Test compounds diluted in growth medium are added to the t=72 hour plates, and the cells are then incubated for 72 hours at 37ºC. Luminescence values are determined with a Wallac 1420 Victor2™ 1420 multilabel HTS counter after a 10-minute reaction with CellTiter-Glo® solution. The percentage inhibition of cell growth is calculated by subtracting the luminescence values in the t=0 hour plates from the corresponding values in the t=72 hour plates. Differences in values between drug-treated cells and controls are used to determine the percentage inhibition of cell growth.

• Tiermodelle

  Rats bearing KPL4 or HCT116 xenografts

• Dosierungen

  6 mg/kg

• Verabreichung

  i.v.