In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich. * Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen. * Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)
Vorbereitung von Stammlösungen
Biologische Aktivität
Beschreibung
Beta-Lapachone (β-Lapachone, ARQ-501) ist ein selektiver DNA-Topoisomerase-I-Inhibitor, der keine hemmenden Aktivitäten gegen DNA-Topoisomerase II oder Ligase aufweist. Phase 2.
Ziele
Topo I
IDO1
0.44 μM
In vitro
Beta-Lapachone hemmt die durch DNA topoisomerase I induzierte DNA-Relaxation dosisabhängig. Die Behandlung mit dieser Verbindung (100 nM oder mehr) führt zu einer >95%igen Hemmung der Topo I DNA-Entwindungsaktivität im Vergleich zur DMSO-Kontrolle. Diese Chemikalie (1-5 μM) verursacht eine Blockade in G0/G1 des Zellzyklus und induziert Apoptose, indem sie Topo I an die DNA bindet und die Bewegung der Replikationsgabel in HL-60- und drei menschlichen Prostatakrebszellen (DU-145, PC-3 und LNCaP) blockiert. Es fördert die Migration von Maus-3T3-Fibroblasten und menschlichen endothelialen EAhy926-Zellen über verschiedene MAPK-Signalwege und beschleunigt so die Wundheilung in vitro. Darüber hinaus hemmt diese Verbindung die gereinigte rekombinante IDO1-Aktivität durch unkompetitive Hemmung mit einer IC50 von 0,44 μM, und sie zeigt auch eine überlegene Retention der intrazellulären IDO1-Inhibitionsaktivität mit einer IC50 von 1,0 μM, teilweise abhängig von der Biotransformation durch NQO1. Diese Chemikalie induziert die programmierte Nekrose von NQO1+ Krebszellen durch NQO1-abhängige Bildung reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) und PARP1-Hyperaktivierung. [5]
In vivo
Beta-Lapachone-Behandlung (50 mg/kg) führt zu einer potenten Hemmung des in-vivo-Tumorwachstums in einem Xenograft-Mausmodell des menschlichen Ovarialkarzinoms, und die Kombination dieser Verbindung mit Taxol erzeugt eine synergistische Induktion der Apoptose. Bei normalen und diabetischen (db/db) Mäusen führt die Behandlung mit dieser Chemikalie zu einem schnelleren Heilungsprozess als nur das Vehikel.
Protokoll (aus Referenz)
Kinase-Assay:
Topoisomerase I Katalytischer Aktivitätstest
Topoisomerase I Katalytischer Aktivitätstest: Die enzymatische Aktivität wird durch den DNA-Entwindungstest analysiert. DNA topoisomerase I von TopoGEN (1 Einheit, die als die Enzymmenge definiert ist, die 0,5 μg superhelikaler DNA in 30 Minuten bei 37 °C in den entspannten Zustand umwandelt) wird mit 0,5 μg 6x174 RF DNA, in Gegenwart oder Abwesenheit von Beta-Lapachone, in 20 μL Relaxationspuffer (50 mM Tris (pH 7,5), 50 mM KCI, 10 mM MgCl2, 0,5 mM Dithiothreitol, 0,5 mM EDTA, 30 μg/mL Rinderserumalbumin) für 30 Minuten bei 37 °C inkubiert. Die Reaktionen werden durch Zugabe von 1% SDS und Proteinase K (50 μg/mL) gestoppt. Nach einer weiteren 1-stündigen Inkubation bei 37 °C werden die Produkte durch Elektrophorese in 1% Agarosegel in TAE-Puffer (0,04 M Trisacetat, 0,001 M EDTA) getrennt. Das Gel wird nach der Elektrophorese mit Ethidiumbromid gefärbt. Das fotografische Negativ wird mit einem NIH-Bildanalyse-System gescannt.
IC50 calculations for each cell line are determined by DNA amount (IS) and anchorage-dependent colony formation (CF) assays. For the CF assay, cells are seeded at 500 viable cells/well in 6-well plates and incubated overnight, then treated with equal volumes of media containing beta-lapachone at final concentrations ranging from 0.005 to 50 μM in half-log increments (controls were treated with 0.25% DMSO, equivalent to the highest dose of this compound used) for 4 hour or for continuous 12-hour exposures. Plates (3 wells/condition) are stained with crystal violet, and colonies of >50 normal-appearing cells are enumerated. IC50 values for various cells are calculated using drug doses with numbers of colonies surrounding 50% of control. For DNA assays, plates are harvested for IC50 determinations 8 days after treatment using a CytoFluor 2350 fluorescence measurement system. Six-well samplings are included in the calculation of DNA fluor units for each dose. A graph of this chemical dose versus percentage control DNA in fluor units is used to calculate each IC50. All experiments are repeated at least twice, each in duplicate.
High‑throughput screening identification of a small‑molecule compound that induces ferroptosis and attenuates the invasion and migration of hepatocellular carcinoma cells by targeting the STAT3/GPX4 axis
[ Int J Oncol, 2023, 62(3)42]
Potential drug discovery for COVID-19 treatment targeting Cathepsin L using a deep learning-based strategy
[ Comput Struct Biotechnol J, 2022, 20:2442-2454]
Kinetics of γH2AX and phospho-histone H3 following pulse treatment of TK6 cells provides insights into clastogenic activity
[ Mutagenesis, 2021, geab014]
Nitazoxanide, an anti-parasitic drug, efficiently ameliorates learning and memory impairments in AD model mice.
[ Acta Pharmacol Sin, 2019, 10.1038/s41401-019-0220-1]
Predictions of genotoxic potential, mode of action, molecular targets, and potency via a tiered multiflow® assay data analysis strategy
[ Environ Mol Mutagen, 2019, 60(6):513-533]
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