Bleomycin sulfate

UT-SCC-12A und UT-SCC-12B sind beide resistenter gegenüber Bleomycin sulfate mit IC50 von 14,2 nM bzw. 13 nM. [1] Alveoläre Makrophagen, die 18 Stunden lang mit 0,01 μg/mL bis 1μg/mL dieser Verbindung inkubiert wurden, sezernieren signifikant mehr Fibroblasten-Wachstumsfaktor als Makrophagen, die ohne diese Chemikalie inkubiert wurden. Makrophagen, die mit dieser Verbindung stimuliert wurden, produzieren weiterhin signifikante Mengen an Fibroblasten-Wachstumsfaktor, selbst nachdem diese Chemikalie entfernt und durch frisches (Bleomycin sulfate-freies) Medium ersetzt wurde. Die Sekretion von Fibroblasten-Wachstumsfaktor durch diese Verbindung-stimulierte alveoläre Makrophagen wird durch Cycloheximid und die 5-Lipoxygenase-Inhibitoren NDGA (Nordihydroguajaretsäure) und BW755c gehemmt, was nicht nur einen Bedarf an Proteinsynthese, sondern auch an Metaboliten des 5-Lipoxygenase-Wegs des Arachidonsäurestoffwechsels für die volle Expression der Aktivität anzeigt. [2] Diese Chemikalie (400 µg/mL) Inkubation für 24 Stunden verringert die Lebensfähigkeit von NTera-2-Zellen und erhöht die Caspase-3-, -8- und -9-Aktivitäten, Bax- und zytoplasmatische Cytochrom c-Spiegel und verringert die Bcl-2-Spiegel. [3] Bei instabilen Aberrationen bleibt die klastogene Wirkung dieser Verbindung auf ADIPO-P2-Zellen mindestens 10 Tage nach der Exposition bestehen. Die durch diese Chemikalie induzierte Telomerinstabilität in Säugetierzellen hält nach der Exposition mehrere Generationen an. Darüber hinaus deutet das Auftreten von Telomerfusionen in den mit dieser Verbindung exponierten Zellen 10 Tage nach der Behandlung darauf hin, dass diese Chemikalie eine verzögerte Telomerinstabilität induzieren kann. [4]

Tag 7 nach Bleomycin sulfate, CD45+ Zellen in BALf in NOX-/- sind 1,7-fach > WT, von denen 57% Mf sind, die bis Tag 21 in WT um 67% und in NOX-/- um 83% abnehmen. [5]

• Zelllinien

  ADIPO-P2 cells

• Konzentrationen

  2.5 μg/mL

• Inkubationszeit

  30 minutes

• Methode

  ADIPO-P2 cells are grown in D-MEM high glucose medium supplemented with 20% fetal calf serum, penicillin (100 U/mL) and streptomycin (100 μg/mL) at 37 °C and 5% CO₂ atmosphere. Cells are cultured as monolayer in TC25 Corning flasks containing 1.5 × 10⁵ cells/mL. For each experiment, two flasks are set up, one for the control and one for the treated culture. During the log phase of growth ADIPO-P2 cells are treated with a 30 minutes pulse of 2.5 μg/mL of Bleomycin sulfate. Control cultures are set up in parallel but not exposed to this compound. Time of exposure and concentration of this chemical are chosen according to previous studies carried out in our laboratory with mammalian cells exposed to it. At the end of the pulse treatment with this compound, the cells are washed twice with Hank's balanced salt solution and kept in culture with fresh culture medium until harvesting. Cells are continuously maintained in culture during 5 passages or subcultures after treatment. Subcultivation is carried out whenever the cultures became confluent (approximately 4 × 10⁵ cells/mL of culture medium). To estimate cell growth, at the time of subcultivation cells are collected by trypsinization, an aliquot of about 200 μL stained with 0.4% trypan blue, and the number of viable cells is determined. Cells are then suspended in fresh culture medium and dispensed into new culture flasks containing 1 × 10⁵ cells/mL to continue growing. The rest of the cells is discarded or dispensed in another flask for cytogenetic analysis, which is performed at 18 hours and 10 days after the end of treatments. To analyze chromosomal aberrations, colchicine (0.1 μg/mL) is added to cell cultures during the last 3 hours of culture. Chromosome preparations are made following standard procedures. After harvesting, cells are hypotonically shocked, fixed in methanol:acetic acid (3:1), spread onto glass slides and processed for PNA-FISH. Two independent experiments are carried out.

• Tiermodelle

  CD-1 mice

• Dosierungen

  5 mg/kg, 2 ml/kg

• Verabreichung

  Administered via i.t.