Capsazepine

Capsazepine (CPZ) zeigt in einer Konzentration von 94,2 µg/ml (IC50-Konzentration dieser Verbindung) eine statistisch signifikante Hemmung des Osteoklastenwachstums und der Proliferation[2]. Diese Verbindung wandelt die NKA in Na-ATPase um. Sie hemmt die K+-abhängige Aktivität, lässt aber die Na-ATPase in Verbindung mit dem Na+-Transport zu. CPZ hat keine Wirkung auf die in Abwesenheit von K+ gemessene Na-ATPase. Diese Chemikalie hemmt auch die Para-Nitrophenylphosphatase-Aktivität, wenn auch mit einer geringeren Affinität. Sie reduziert stark den Steady-State-EP-Spiegel, und die Na+-Affinität für die Phosphorylierung nahm nach der CPZ-Behandlung um das 3-fache ab. Zusammenfassend blockiert diese Verbindung einen Na+/K+-Zyklus in der NKA, lässt aber einen Na+-Zyklus intakt, wodurch die Transportstöchiometrie der Pumpe reduziert wird[3]. Diese Chemikalie hemmt die Osteoklastenbildung und den Knochenabbau dosisabhängig in Knochenmark-Osteoblasten-Kokulturen und RANKL-generierten Osteoklastenkulturen. Sie unterdrückt auch die RANKL-induzierte IκB- und ERK1/2-Phosphorylierung und verursacht die Apoptose reifer Osteoklasten und hemmt auch die alkalische Phosphataseaktivität und die Knochenknotenbildung in Kalvarien-Osteoblastenkulturen[4].

Eine Vorbehandlung mit Capsazepine verhindert den Anstieg des Atemwegswiderstands und verringert den Anstieg der Gewebedämpfung während der Endotoxämie. Diese Verbindung mildert auch Lungenschäden durch eine Reduzierung des kollabierten Bereichs des Lungenparenchyms, der durch Lipopolysaccharid (LPS) induziert wird.

• Zelllinien

  Murine macrophage cell line RAW 264.7

• Konzentrationen

  94.2 µg/ml

• Inkubationszeit

  72 h

• Methode

  The cells are plated and treated with different concentrations of the test compounds and allowed to proliferate for 72 h. After 72 h of proliferation the cells are fixed in 10% formalin saline (50 μl/well) for 30 min. Then the cells are stained with crystal violet (0.05% w/v) for 30 min. The wells are then washed thoroughly with distilled water to remove any unbound dye and destained with Sorenson's buffer (0.1 M sodium citrate in 50% ethanol, pH 4.2). The absorbance of the extracted stain is measured at 540 nm.