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Biologische Beschreibung
| Spezifität | CD163L1 Antibody [C10D1] weist endogene Konzentrationen des gesamten CD163L1-Proteins nach. |
|---|---|
| Hintergrund | CD163L1, auch bekannt als CD163-Molekül-ähnliches 1 oder M160, ist ein Typ-I-Membranprotein der Scavenger-Rezeptor-Cystein-reichen (SRCR)-Superfamilie der Gruppe B, das mehrere SRCR-Domänen (typischerweise 9–12), ein einzelnes Transmembransegment und einen zytoplasmatischen Schwanz aufweist, der die Endozytose über einen Clathrin-abhängigen Signalweg unabhängig von der Ligandenquervernetzung vermittelt. CD163L1, das aus einer späten evolutionären Duplikation des CD163-Gens hervorgegangen ist, wird auf spezifischen Gewebemakrophagen-Subtypen stark exprimiert (oft kolokalisierend mit CD163), ist aber in Monozyten, Alveolarmakrophagen, Gliazellen und Kupffer-Zellen minimal vorhanden oder fehlt; zwei zytoplasmatische Spleißvarianten beeinflussen zusätzlich seine subzelluläre Lokalisation. CD163L1 dient als endozytischer Scavenger-Rezeptor, der wahrscheinlich bisher unidentifizierte Liganden bindet, um die Clearance zu vermitteln und die Entzündungsauflösung durch entzündungshemmende Signalgebung und Aufrechterhaltung der Gewebehomöostase zu fördern, wodurch es sich von CD163 unterscheidet, das spezifisch Hämoglobin-Haptoglobin-Komplexe aufnimmt. CD163L1 zeigt keine Affinität zu Hämoglobin-Haptoglobin oder getesteten Bakterien und bildet keine bekannten Proteinkomplexe. Seine regulierte Expression während der Monozyten-zu-Makrophagen-Differenzierung unterstützt die Modulation der angeborenen Immunität, mit Krankheitsrelevanz bei entzündlichen Erkrankungen wie Atherosklerose, möglicherweise durch Oxidantien-Clearance ähnlich wie CD163, und in autoimmunen Kontexten durch Dämpfung übermäßiger Immunantworten. |
Nutzungsinformationen
| Anwendung | IHC | Verdünnung |
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|---|---|---|---|---|---|
| Reaktivität | Human | ||||
| Quelle | Rabbit Monoclonal Antibody | MW | |||
| Lagerpuffer | PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 | Lagerung (Ab dem Datum des Erhalts) |
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years | ||
| IHC |
Experimental Protocol：
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
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Referenzen
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