In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml
Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension
15% Captisol
Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.
10.000mg/ml
(19.33mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 15% Captisol clear solution, and mix evenly to form a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich. * Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen. * Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)
Vorbereitung von Stammlösungen
Biologische Aktivität
Beschreibung
Agerafenib (CEP-32496) ist ein hochwirksamer Inhibitor von BRAF(V600E/WT) und c-Raf mit einem Kd von 14 nM/36 nM bzw. 39 nM. Es zeigt auch eine potente Aktivität gegen Abl-1, c-Kit, Ret (c-Ret), PDGFRβ und VEGFR2, hat aber eine insignifikante Affinität zu MEK-1, MEK-2, ERK-1 und ERK-2. Diese Verbindung befindet sich derzeit in klinischen Studien der Phase 1/2.
Agerafenib (CEP-32496) hemmt die Proliferation von A375-Zellen (BRAFV600E) mit einer EC50 von 78 nM. Es zeigt eine empfindlichere Zytotoxizität für Tumorzelllinien (A375, SK-MEL-28, Colo-205, Colo-679 und HT-144), die mutiertes BRAF exprimieren, als für solche, die Wildtyp-BRAF exprimieren (HCT116, Hs578T, LNCaP, DU145 und PC-3). Diese Verbindung hemmt die Phosphorylierung der Mitogen-aktivierten Protein (MAP)/extrazellulären Signal-regulierten (ER) Kinase (MEK) (pMEK) in humanen Melanom (A375) und kolorektalen Karzinom (Colo-205) Zelllinien mit IC50-Werten von 78 nM bzw. 60 nM.
In vivo
Agerafenib (CEP-32496) zeigt eine gute Stabilität in Lebermikrosomenpräparaten von Maus, Hund, Affe und Mensch mit gemessenen intrinsischen Clearance-Werten von <23 (μL/min)/mg und t1/2 > 60 min in allen Assays. Diese Verbindung (30 mg/kg, oral, BID) zeigt Tumorstase und eine 40%ige Inzidenz von partiellen Tumorregressionen (PRs) im Colo-205-Xenograft-Mausmodell, während die 100 mg/kg-Dosisgruppe sowohl Tumorstase als auch eine 80%ige Inzidenz von PRs aufweist. Es (30 mg/kg, oral, BID) führt zu einer 50%igen und 75%igen Hemmung von normalisiertem pMEK in Tumorlysat-Proben zum Zeitpunkt von 2 Stunden bzw. 6 Stunden nach der Dosis, während eine Dosis von 55 mg/kg zu einer 75%igen bis 57%igen Hemmung von pMEK nach 2 Stunden bis 10 Stunden nach der Verabreichung im Colo-205-Xenograft-Mausmodell führt. Es ist oral in mehreren präklinischen Spezies bioverfügbar (>95% bei Ratten, Hunden und Affen). Diese Verbindung (100 mg/kg) führt zur Hemmung von pMEK und pERK und zu anhaltender Tumorstase und Regressionen in BRAF(V600E)-Kolonkarzinom-Xenotransplantaten in Nacktmäusen.
Merkmale
Hohe Bindungsaffinität sowohl für die BRAF (V600E)-Mutation als auch für das verwandte c-Raf, aber keine signifikante Affinität für andere Kinasen des MAPK-Signalwegs.
Kinasen werden auf T7-Phagen oder durch Expression in HEK-293-Zellen produziert und mit DNA markiert. Bindungsreaktionen werden bei Raumtemperatur für 1 Stunde durchgeführt, und der Anteil der Kinase, der nicht an die Testverbindung gebunden ist, wird durch Fang mit einem immobilisierten Affinitätsliganden und Quantifizierung mittels quantitativer PCR bestimmt. Jede Kinase wird einzeln gegen Agerafenib (CEP-32496) getestet. Die Kd-Werte für diese Verbindung werden unter Verwendung von elf seriellen 3-fachen Verdünnungen bestimmt und als Mittelwerte aus Doppelversuchen dargestellt. Die Variabilität zwischen den einzelnen Werten beträgt weniger als das 2-fache.
Cells are seeded at 104 cells per well in DMEM with 10% fetal calf serum and allowed to attach. After washing with PBS, the cells are switched to DMEM with 0.5% of serum and incubated overnight. Agerafenib (CEP-32496) is then added at various concentrations with a final DMSO concentration of 0.5% and incubated for 72 h. At the end of incubation, a Cell Titer Blue is added per instructions, and incubation is continued for 3 hours. Remaining viable cells are quantified by measuring the strength of the fluorescence signal using SoftMax Pro (excitation at 560 nm and emission at 590 nm). IC50 values are derived using a 9-point curve fitted with Igor Pro and are presented as mean values from experiments performed in duplicate. Variability between individual values is less than 2-fold.
Sellecks Agerafenib (CEP-32496) Wurde zitiert von 6 Publikationen
Novel Human-Derived RET Fusion NSCLC Cell Lines Have Heterogeneous Responses to RET Inhibitors and Differential Regulation of Downstream Signaling
[ Mol Pharmacol, 2021, 99(6):435-447]
RET inhibition in novel patient-derived models of RET-fusion positive lung adenocarcinoma reveals a role for MYC upregulation
[ Dis Model Mech, 2020, dmm.047779]
Comparative analysis of the phototoxicity induced by BRAF inhibitors and alleviation through antioxidants.
[ Photodermatol Photoimmunol Photomed, 2019, 10.1111/phpp.12520]
TLR7/8-agonist-loaded Nanoparticles Promote the Polarization of Tumour-Associated Macrophages to Enhance Cancer Immunotherapy
[ Nat Biomed Eng, 2018, 2(8):578-588]
RÜCKGABERICHTLINIE
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VERSAND UND LAGERUNG
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NICHT FÜR DIE ANWENDUNG AM MENSCHEN, FÜR VETERINÄRMEDIZINISCHE DIAGNOSTIK ODER THERAPEUTISCHE ZWECKE.
