Cetuximab (anti-EGFR)

Katalog-Nr.A2000 Batch: A200011

Technische Daten

CAS-Nr.	205923-56-4
Formel	100 mM Pro-Ac, 20 mM Arg, pH5.0
Isotyp	Human IgG1
Quelle	CHO cells
Lagerung (Ab dem Datum des Erhalts)	Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles
Reinheit	99%
Proteinkonzentration:	8.1mg/ml
Endotoxinspiegel	＜1EU/mg

Biologische Aktivität

Beschreibung	Cetuximab, ein neuartiger molekularer Wirkstoff, ist ein inhibitor von EGFR monoklonaler humanisierter Antikörper, der mit der extrazellulären Bindungsstelle von EGFR interagiert, um die Ligandenstimulation zu blockieren. MW: 145,781 KD.
In vitro	Die Cetuximab-Behandlung erhöht das mitochondriale Priming von EGFR-exprimierenden HeLa-Zellen, nicht aber in EGFR-exprimierenden MDA-MD-231-Zellen.
In vivo	C225 verstärkte die Antitumoraktivität mehrerer Chemotherapeutika in Maus-Xenograftmodellen. Cetuximab entfaltet seine Antitumorwirksamkeit durch multiple Mechanismen, zu denen die Hemmung des Zellzyklusfortschritts durch Arrest in der G1-Phase und eine verringerte Zellzahl in der S-Phase gehören. Der Zellzyklusarrest in der G1-Phase induziert auch Apoptose durch die Induktion und Aktivierung proapoptotischer Moleküle. Cetuximab allein und in Synergie mit Carboplatin führte zu einer Verringerung der Tumorgröße, der metastatischen Ausbreitung und der MVD in NCI-N87-Tumoren mit EGFR-Zelloberflächenexpression und dem Fehlen von Mutationen in BRAF und K-ras, während Cetuximab minimale In-vitro-Effekte und keine In-vivo-Behandlungswirksamkeit in Tumoren hatte, die von MKN-45 stammen, bei denen der Phänotyp ebenfalls BRAF und K-ras Wildtyp war, die aber nur eine schwache zytoplasmatische EGFR-Proteinexpression aufwiesen.

Protokoll (nur als Referenz)

Zell-Assay:	Zellen wurden bei einer Dichte von 1 x 10⁶/50 μL in Lysepuffer (0,25 M Tris-HCl, 2 % Natriumdodecylsulfat, 4 % β-Mercaptoethanol, 10 % Glycerin, 0,02 % Bromphenolblau) lysiert, der mit 1 X Protease/Phosphatase-Inhibitor-Cocktail ergänzt wurde. Zelllysate wurden dann auf Polyacrylamidgele mit Natriumdodecylsulfat geladen. Nach der Elektrophorese wurden Proteine auf Polyvinylidendifluorid (PVDF)-Membranen übertragen. Die transblottierten Membranen wurden 1 Stunde lang blockiert und dann über Nacht bei 4 °C mit geeigneten primären Antikörpern inkubiert. Am nächsten Tag wurden die Membranen dreimal für insgesamt 30 Minuten gewaschen und dann 1 Stunde lang in Dunkelheit bei Raumtemperatur mit IRDye 680RD Donkey anti-Rabbit IgG (H + L) oder IRDye 800CW Donkey anti-Mouse IgG (H + L) inkubiert. Nach weiteren drei Waschschritten wurden Immunoblot-Membranen gescannt und die Bandenintensität quantifiziert.
Tierstudie:	Ziel: Antitumoraktivität von Cetuximab in einem murinen Magenkrebsmodell Tiermodelle: Nacktmausmodell für menschlichen Magenkrebs (CD-1/nu-nu Mäuse) Formulierung: 0,9 % NaCl Dosierungen: 1 mg/kg Verabreichung: i.p. Referenz: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22011788 Ziel: Untersuchung des Zusammenhangs zwischen den EGFR-Spiegeln und dem Ansprechen auf Cetuximab-Behandlung in humanen Krebs-Xenograftmodellen Tiermodelle: Weibliche athymische Nacktmäuse wurden s.c. mit ~1 mm3 großen Tumorfragmenten implantiert Formulierung: PBS Dosierungen: 0,25, 0,5 oder 1 mg/Maus Verabreichung: i.p. Referenz: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27186886 Cetuximab kann bei Nacktmäusen, verschiedenen Krebszelllinien und anderen verwandten Assays angewendet werden (Nur als Referenz)

Zell-Assay:

Zellen wurden bei einer Dichte von 1 x 10⁶/50 μL in Lysepuffer (0,25 M Tris-HCl, 2 % Natriumdodecylsulfat, 4 % β-Mercaptoethanol, 10 % Glycerin, 0,02 % Bromphenolblau) lysiert, der mit 1 X Protease/Phosphatase-Inhibitor-Cocktail ergänzt wurde. Zelllysate wurden dann auf Polyacrylamidgele mit Natriumdodecylsulfat geladen. Nach der Elektrophorese wurden Proteine auf Polyvinylidendifluorid (PVDF)-Membranen übertragen. Die transblottierten Membranen wurden 1 Stunde lang blockiert und dann über Nacht bei 4 °C mit geeigneten primären Antikörpern inkubiert. Am nächsten Tag wurden die Membranen dreimal für insgesamt 30 Minuten gewaschen und dann 1 Stunde lang in Dunkelheit bei Raumtemperatur mit IRDye 680RD Donkey anti-Rabbit IgG (H + L) oder IRDye 800CW Donkey anti-Mouse IgG (H + L) inkubiert. Nach weiteren drei Waschschritten wurden Immunoblot-Membranen gescannt und die Bandenintensität quantifiziert.

Tierstudie:

Ziel: Antitumoraktivität von Cetuximab in einem murinen Magenkrebsmodell
Tiermodelle: Nacktmausmodell für menschlichen Magenkrebs (CD-1/nu-nu Mäuse)
Formulierung: 0,9 % NaCl
Dosierungen: 1 mg/kg
Verabreichung: i.p.
Referenz: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22011788

Ziel: Untersuchung des Zusammenhangs zwischen den EGFR-Spiegeln und dem Ansprechen auf Cetuximab-Behandlung in humanen Krebs-Xenograftmodellen
Tiermodelle: Weibliche athymische Nacktmäuse wurden s.c. mit ~1 mm3 großen Tumorfragmenten implantiert
Formulierung: PBS
Dosierungen: 0,25, 0,5 oder 1 mg/Maus
Verabreichung: i.p.
Referenz: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27186886

Cetuximab kann bei Nacktmäusen, verschiedenen Krebszelllinien und anderen verwandten Assays angewendet werden (Nur als Referenz)

Referenzen	https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27313893/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35447071/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22011788/

Referenzen

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27313893/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35447071/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22011788/

Kundenproduktvalidierung

Daten von [Data independently produced by , , J Thorac Oncol, 2018, 13(6):810-820]

Mice showed progression disease to first-line treatment were randomized 1:1 to the two arms of treatment and were treated until onset of progression disease or until the end-time of experiment in case of response (fixed to 52 weeks from the start of first-line therapy ), as indicated in in the Materials and Methods section. Growth curves of HCC827 xenografts treated in secondline with osimertinib plus selumetinib or cetuximab are represented as changes in the values of volumes as percentage compared to baseline tumor volume at the time of progression diasease to first-line (defined as 100%) for each case. Median tumor volume at PD2 was of 348 mm³.

Daten von [Data independently produced by , , ]

Sellecks Cetuximab (anti-EGFR) Wurde zitiert von 58 Publikationen

Artesunate Nanoplatform Targets the Serine-MAPK Axis in Cancer-Associated Fibroblasts to Reverse Photothermal Resistance in Triple-Negative Breast Cancer [ Adv Mater, 2025, e2502617]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=40528526
Prolonging lung cancer response to EGFR inhibition by targeting the selective advantage of resistant cells [ Nat Commun, 2025, 16(1):7853]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=40846697
Oncogenic RARγ isoforms promote head and neck cancer proliferation through vinexin-β-mediated cell cycle acceleration and autocrine activation of EGFR signal [ Int J Biol Sci, 2025, 21(1):1-16]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=39744424
A novel MIR100HG transcript enhances tumorigenesis by inducing BCLAF1-mediated alternative splicing in colorectal cancer [ Cell Commun Signal, 2025, 23(1):328]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=40635045
LPS-induced extracellular AREG triggers macrophage pyroptosis through the EGFR/TLR4 signaling pathway [ Front Immunol, 2025, 16:1549749]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=40292295
Potassium Iodide Induces Apoptosis in Salivary Gland Cancer Cells [ Int J Mol Sci, 2025, 26(11)5199]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=40508009
Sprinkling in extra validation for high-value PTMs and therapeutic Abs with MILKSHAKE Western blots and Sundae ELISAs [ N Biotechnol, 2025, 89:11-19]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=40482963
Bioluminescence-based assays for quantifying endogenous protein interactions in live cells [ J Biol Chem, 2025, 301(8):110454]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=40617353
The RASAL2 variant promotes aberrant RAS signaling and resistance to anti-EGFR therapy in colorectal cancer [ Sci Rep, 2025, 15(1):31076]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=40849341
Base editing screens define the genetic landscape of cancer drug resistance mechanisms [ Nat Genet, 2024, 10.1038/s41588-024-01948-8]	https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=39424923

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