Alectinib (CH5424802)

Katalog-Nr.S2762 Charge:S276206

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Technische Daten

Formel

C30H34N4O2
Molekulargewicht 482.62 CAS-Nr. 1256580-46-7
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 6 mg/mL (12.43 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Alectinib ist ein potenter ALK-Inhibitor mit einem IC50-Wert von 1,9 nM in zellfreien Assays, empfindlich gegenüber der L1196M-Mutation und höherer Selektivität für ALK als PF-02341066, NVP-TAE684 und PHA-E429.
Ziele
ALK (F1174L)
(Cell-free assay)		 ALK
(Cell-free assay)		 ALK (R1275Q)
(Cell-free assay)
1 nM 1.9 nM 3.5 nM
In vitro Der Dissoziationskonstanten (KD)-Wert von CH5424802 für ALK im ATP-kompetitiven Modus beträgt 2,4 nM. CH5424802 hat eine erhebliche Hemmwirkung sowohl gegen natives ALK als auch gegen L1196M mit Ki von 0,83 nM bzw. 1,56 nM. CH5424802 verhindert die Autophosphorylierung von ALK in NCI-H2228 NSCLC-Zellen, die EML4-ALK exprimieren. CH5424802 unterdrückt auch die Phosphorylierung von STAT3 und AKT, aber nicht die von ERK1/2. CH5424802 hemmt die Phosphorylierung von STAT3 an Tyr705 vollständig. CH5424802 ist vorzugsweise wirksam gegen NCI-H2228-Zellen, die EML4-ALK exprimieren, aber nicht gegen ALK-Fusions-negative NSCLC-Zelllinien, einschließlich HCC827-Zellen (EGFR-Exon-19-Deletion), A549-Zellen (KRAS-Mutante) oder NCI-H522-Zellen (EGFR-Wildtyp, KRAS-Wildtyp und ALK-Wildtyp) in Monolayer-Kultur. CH5424802 löst einen apoptotischen Marker – Caspase-3/7-ähnliche Aktivierung – in NCI-H2228-Sphäroidzellen aus. CH5424802 blockiert das Wachstum von zwei Lymphomlinien, KARPAS-299 und SR, mit NPM-ALK-Fusionsprotein, beeinflusst aber nicht das Wachstum einer HDLM-2-Lymphomlinie ohne ALK-Fusion. CH5424802 zeigt eine hohe Zielselektivität und die stärkere antiproliferative Aktivität gegen KARPAS-299. CH5424802 hemmt KAPRAS-299 mit einer IC50 von 3 nM und KDR mit einer IC50 von 1,4 μM. Die metabolische Stabilität von CH5424802 ist sehr hoch.
In vivo Die orale Verabreichung von CH5424802 hemmt das Tumorwachstum dosisabhängig mit einer ED50 von 0,46 mg/kg und führt zu einer Tumorregression. Die Behandlung mit 20 mg/kg CH5424802 zeigt eine schnelle Tumorregression um 168 %, das Tumorvolumen in jeder Maus beträgt nach 11 Tagen Behandlung (an Tag 28) <30 mm3, ein potenter Antitumoreffekt wird aufrechterhalten und ein erneutes Tumorwachstum tritt während der 4-wöchigen medikamentenfreien Periode nicht auf. Die Halbwertszeit und die orale Bioverfügbarkeit von CH5424802 bei Mäusen betragen 8,6 Stunden bzw. 70,8 %. Bei einer wiederholten Dosis von 6 mg/kg erreichten die mittleren Plasmaspiegel 1,7, 1,5 und 0,3 nM 2, 7 und 24 Stunden nach der Dosis. Die Verabreichung von CH5424802 führt zur Verhinderung des Tumorwachstums und zur Tumorregression. Die Tumorwachstumshemmung bei 20 mg/kg beträgt 119 % für KARPAS-299 und 104 % für NB-1 an Tag 20. CH5424802 hemmt die Phosphorylierung von STAT3 dosisabhängig (2–20 mg/kg). Eine teilweise Abnahme der AKT-Phosphorylierung wird auch in CH5424802-behandelten Xenograft-Tumoren beobachtet.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • Kinase-Inhibitions-Assays in vitro

    Die Hemmfähigkeit gegen jede Kinase außer MEK1 und Raf-1 wird durch die Untersuchung ihrer Fähigkeit, verschiedene Substratpeptide in Gegenwart von CH5424802 zu phosphorylieren, unter Verwendung des zeitaufgelösten Fluoreszenzresonanzenergietransfer-Assays (TR-FRET) oder des Fluoreszenzpolarisations-Assays (FP) bewertet. Die Hemmwirkung gegen MEK1 wird durch die quantitative Analyse der Phosphorylierung eines Substratpeptids durch ein rekombinantes ERK2-Protein in Gegenwart von CH5424802 bewertet. Die Hemmwirkung gegen Raf-1 wird durch die Untersuchung der Fähigkeit der Kinasen, MEK1 in Gegenwart von CH5424802 zu phosphorylieren, bewertet.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    NSCLC, A549 and HCC827 cell lines

  • Konzentrationen

    0-1 μM

  • Inkubationszeit

    5 days

  • Methode

    Cells including NSCLC, A549 and HCC827 are seeded in 96-well plates overnight and incubated with various concentrations of CH5424802 for the indicated time. For spheroid cell growth inhibition assay, cells are seeded on spheroid plates, incubated overnight, and then treated with compound for the indicated times. The viable cells are measured by the Luminescent Cell Viability Assay. Caspase-3/7 assay is evaluated using the Caspase-Glo 3/7 Assay Kit.
Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    SCID or nude mice bearing NCI-H2228

  • Dosierungen

    20 mg/kg

  • Verabreichung

    Oral administration

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21575866/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22225917/

Kundenproduktvalidierung

Sensitivity of the H3122 cell line to ALK inhibitors (crizotinib and alectinib). To examine the sensitivity of ALK inhibitors, used an MTT assay. The experiment was performed in triplicate. (A) Growth inhibitory effect of crizotinib. The H3122 cell line was sensitive to crizotinib under a normoxic state, compared with a hypoxic state. The graphs, mean of independent triplicate experiments; error bars, SD. (B) IC50 of ALK inhibitors. The IC50 values of both inhibitors in the H3122 cell lines were significantly higher under hypoxia than under normoxia (crizotinib, *P=0.028 and alectinib, *P=0.0035). *P<0.05.

Daten von [ Int J Oncol , 2014 , 45(4), 1430-6 ]

<p>Western blotting data of NPM/ALK-transformed BaF3 cells, both wild-type and L1196M-mutant, treated with CH5424802 for 4 hours. The blot shows phospho-ALK signal (Y1604), as an indicator of NPM/ALK activation.</p>

, , Prof. Gambacorti from Università degli Studi di Milano Bicocc

<p>Cell growth data, performed by tritiated thymidine uptake assay, using NPM/ALK wild-type -transformed BaF3 cells.CH5424802 demonstrated a very good ability to block NPM/ALK-transformed BaF3 cells proliferation with an IC50 of 3 nM.</p>

, , Prof. Gambacorti from Università degli Studi di Milano Bicocc

Immunoblot analysis of full-length DCTN1-ALK proteins. An expression vector encoding DCTN1-ALK cDNA was introduced into H1299 lung cancer cells, which do not express endogenous ALK. The transfectants were then exposed to crizotinib and alectinib. Levels of phosphorylation at tyrosine 1604 were determined 24 hours after treatment with 0, 0.2, 1.0, or 5.0 μM of each drug.

Daten von [ , , Oncologist, 2017, 22(2):158-164 ]

Sellecks Alectinib (CH5424802) Wurde zitiert von 114 Publikationen

RNase1-driven ALK-activation is an oncogenic driver and therapeutic target in non-small cell lung cancer [ Signal Transduct Target Ther, 2025, 10(1):124] PubMed: 40246819
Targeting proteostasis in multiple myeloma through inhibition of LTK [ Leukemia, 2025, 10.1038/s41375-025-02682-8] PubMed: 40634511
Novel selective strategies targeting the BCL-2 family to enhance clinical efficacy in ALK-rearranged non-small cell lung cancer [ Cell Death Dis, 2025, 16(1):194] PubMed: 40113795
MED12 mutation induces RTK inhibitor resistance in NSCLC via MEK/ERK pathway activation by inflammatory cytokines [ Cell Mol Life Sci, 2025, 82(1):314] PubMed: 40833497
Evaluation and modification of tumor cell isolation techniques from malignant effusions for rapid drug sensitivity testing [ Mol Oncol, 2025, 19(9):2474-2490] PubMed: 40525275
Evaluation and modification of tumor cell isolation techniques from malignant effusions for rapid drug sensitivity testing [ Mol Oncol, 2025, 10.1002/1878-0261.70072] PubMed: 40525275
Ferristatin II protects nucleus pulposus against degeneration through inhibiting ferroptosis and activating HIF-1α pathway mediated mitophagy [ Int Immunopharmacol, 2025, 147:113895] PubMed: 39752759
Efficacy of amivantamab, a bi-specific antibody targeting EGFR and MET, in ALK-rearranged non-small-cell lung cancer cell lines [ Lung Cancer, 2025, 201:108415] PubMed: 39922174
A high-throughput screening platform to identify MYCN expression inhibitors for liver cancer therapy [ Front Oncol, 2025, 15:1486671] PubMed: 40027135
Brigatinib activates inflammasomes: Implication for immune-related adverse events [ Toxicol Appl Pharmacol, 2025, 498:117310] PubMed: 40122348

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