Chaetocin

In SL-2 Drosophila-Gewebekulturzellen bewirkt Chaetocin die Hemmung von SU(VAR)3-9 und der Anzahl der an Lys9 dimethylierten H3-Moleküle und hemmt auch das Zellwachstum. [1]

In menschlichen HepG2-, Hep3B- und Huh7-Hepatomzellen hemmt diese Verbindung HIF-1-vermittelte hypoxische Reaktionen. [2]

Es hemmt auch potent die Proliferation und Koloniebildung in einer Vielzahl von Krebszelllinien mit IC50 von 2-10 nM. [3]

Bei Hepa 1c1c-7-Tumor tragenden Mäusen hemmt Chaetocin (0,25 mg/kg, i.p.) das Tumorwachstum durch Deregulierung der HIF-1[alpha]-vermittelten Angiogenese. [2]

Bei SKOV3-Tumor tragenden Nacktmäusen verzögert diese Verbindung (0,25 mg/kg, i.p.) das Tumorwachstum signifikant mit minimalen Anzeichen von Toxizität. [3]

• Methylierungsassays

  Sofern nicht anders angegeben, werden die Reaktionen wie folgt durchgeführt: 1 g gereinigtes Enzym (dSU(VAR)3-9 213; GST-hSUV39H1(82-412); GST-ncDIM5(19-318) und GSTmG9a(621-1000); dPRSET7(1-691); His-SET7/9(109-366) oder im Baculovirus-Expressionssystem exprimierter Enzymkomplex (dE(z), dSU(Z)12, dp55, dESC)) wurden 30 Minuten lang mit 1 g eines Peptids, das die ersten 19 Aminosäuren von H3 plus einen zusätzlichen Cysteinrest (ARTKQTARKSTGGKAPRKQC) enthält, in einem Gesamtvolumen von 40 μl in BC25 (10 mM HEPES pH 7,6, 25 mM NaCl, 1 mM EDTA, 10 % Glycerin) inkubiert. Alle Enzyme außer dem E(z)-Komplex hatten eine ähnliche spezifische Aktivität zwischen 5-10 nmol/min/mg. Für den E(z)-Komplex ist die spezifische Aktivität etwa 5-10-mal niedriger, was wahrscheinlich auf eine unvollständige Bildung des vollständigen Komplexes zurückzuführen ist, der für die höchste Aktivität erforderlich ist. Als Methyldonor ist S-Adenosyl[methyl-3H]methionin (SAM) in der Reaktion in einer Endkonzentration von 40 M mit einer spezifischen Aktivität von 0,3 Ci/mmol vorhanden. Die Reaktionen werden durch Zugabe von 1/10 Volumen 100%iger Essigsäure gestoppt und der Einbau von Radioaktivität wird durch Auftragen von 30 μl der Reaktion auf P81-Filterpapier und anschließendes Szintillationszählen gemessen. Für das Inhibitorscreening werden 1 μl dieser Verbindung mit einer Konzentration von 10 g/l zu jeder Reaktion gegeben. In den Fällen, in denen PRSET7 oder der E(z)-Komplex als Enzym verwendet wird, ersetzten rekombinante Nukleosomen (1 g) bzw. rekombinantes H3 (1 g) das H3-Peptid als Substrat.

• Zelllinien

  HEK293T

• Konzentrationen

  125 nM

• Inkubationszeit

  24 h

• Methode

  Cells were treated with chaetocin (125 nM) or DMSO for 24 h.

• Tiermodelle

  Hur7 tumor-bearing mice, Hepa 1c1c-7 tumor-bearing mice

• Dosierungen

  0.25 mg/kg

• Verabreichung

  i.p.