CHIR-98014

Katalog-Nr.S2745 Charge:S274501

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Technische Daten

Formel

C20H17Cl2N9O2
Molekulargewicht 486.31 CAS-Nr. 252935-94-7
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 32 mg/mL (65.8 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung CHIR-98014 (CT98014) ist ein potenter GSK-3α/β-Inhibitor mit einer IC50 von 0,65 nM/0.58 nM in zellfreien Assays, mit der Fähigkeit, GSK-3 von seinen engsten Homologen Cdc2 und ERK2 zu unterscheiden.
Ziele
GSK-3β
(Cell-free assay)		 GSK-3α
(Cell-free assay)
0.58 nM 0.65 nM
In vitro CHIR-98014 hemmt humane GSK-3β mit einem Ki von 0,87 nM. Diese Verbindung ist sehr wirksam bei der Prävention von murinem und Ratten-GSK-3. Obwohl es als einfacher kompetitiver Inhibitor der ATP-Bindung fungiert, zeigt es eine 500- bis >1000-fache Selektivität für GSK-3 gegenüber 20 anderen Proteinkinasen, einschließlich Cdc2, ERK2, Tie-2 und KDR. Dieser Inhibitor verhindert Cdc2 mit einer IC50 von 3,7 μM. Es zeigt jedoch eine ähnliche Potenz gegen die hochhomologen ɑ- und β-Isoformen von GSK-3. Bemerkenswert ist, dass es stark zwischen GSK-3 und seinen engsten Homologen CDC2 und ERK2 diskriminierte. Die Exposition von Insulinrezeptor-exprimierenden CHO-IR-Zellen oder primären Rattenhepatozyten gegenüber zunehmenden Konzentrationen dieser Chemikalie führt zu einer zwei- bis dreifachen Stimulation des GS-Aktivitätsverhältnisses über dem Grundwert. Die Konzentrationen, die zu einer halbmaximalen GS-Stimulation (EC50) führen, betragen 106 nM und 107 nM für CHO-IR- und Rattenhepatozyten.
In vivo GSK-3-Inhibitor CHIR-98014 aktiviert das GS-Aktivitätsverhältnis in isoliertem Typ-I-Skelettmuskel von insulinsensiblen schlanken Zucker- und von insulinresistenten ZDF-Ratten. Soleus-Muskel, isoliert von ZDF-Ratten, zeigt eine signifikante Insulinresistenz für die Aktivierung von GS, reagierte aber auf 500 nM dieser Verbindung im gleichen Ausmaß (40 % Zunahme) wie Muskel von schlanken Zucker-Ratten. Bemerkenswerterweise ist die GS-Aktivierung durch Insulin plus diese Chemikalie im Muskel von schlanken Zucker-Ratten additiv und im Muskel von ZDF-Ratten größer als additiv. Die totale GS-Aktivität wird weder durch diesen Inhibitor noch durch Insulin in diesen Zellen und Muskeln verändert. In der Zwischenzeit beeinflusst diese Verbindung die Insulin-Dosis-Wirkungsbeziehung im Muskel von schlanken Tieren nicht. Die Reduktion der Hyperglykämie und die verbesserte Glukoseentsorgung sind nicht auf db/db-Mäuse und ZDF-Ratten beschränkt, da ähnliche Ergebnisse bei ob/ob-Mäusen, diätinduzierten diabetischen C57BL/6-Mäusen und glukoseintoleranten SHHF-Ratten beobachtet werden, die mit dieser Chemikalie behandelt wurden. Zusätzlich verringert diese Verbindung die Phosphorylierung (Ser396) des Tau-Proteins im Kortex und Hippocampus von postnatalen Ratten.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:

[1]
  • Kinase-Assays

    Polypropylen-96-Well-Platten werden mit 300 μL/Well Puffer (50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM Dithiothreitol, 25 mM β-Glycerophosphat, 1 mM NaF, 0,01 % BSA, pH 7,5) gefüllt, der Kinase, Peptidsubstrat und alle Aktivatoren enthält. CHIR-98014 oder Kontrollen werden in 3,5 μL DMSO zugegeben, gefolgt von 50 μL ATP-Stammlösung, um eine Endkonzentration von 1 μM ATP in allen zellfreien Assays zu erreichen. Nach der Inkubation werden dreifache 100-μL-Aliquote auf Combiplate-Acht-Platten übertragen, die 100 μL/Well 50 μM ATP und 20 mM EDTA enthalten. Nach 1 Stunde werden die Wells fünfmal mit PBS gespült, mit 200 μL Szintillationsflüssigkeit gefüllt, versiegelt, 30 Minuten stehengelassen und in einem Szintillationszähler gezählt. Alle Schritte werden bei Raumtemperatur durchgeführt.
Zell-Assay:

[1]
  • Zelllinien

    CHO-IR cells

  • Konzentrationen

    0.01-10 μM

  • Inkubationszeit

    30 min

  • Methode

    CHO-IR cells expressing human insulin receptor are grown to 80% confluence in Hamm’s F12 medium with 10% fetal bovine serum and without hypoxanthine. Trypsinized cells are seeded in 6-well plates at 1 × 106 cells/well in 2 mL of medium without fetal bovine serum. After 24 hours, medium is replaced with 1 mL of serum-free medium containing GSK-3 inhibitor CHIR 98014 or control (final DMSO concentration 0.1%) for 30 min at 37 °C. Cells are lysed by freeze/thaw in 50 mM tris (pH 7.8) containing 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 100 mM NaF, 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, and 25 μg/mL leupeptin (buffer A) and centrifuged 15 min at 4 °C/14000 g. The activity ratio of GS is calculated as the GS activity in the absence of glucose-6-phosphate divided by the activity in the presence of 5 mM glucose-6-phosphate.
Tierstudie:

[1]
  • Tiermodelle

    db/db mice with 8-9 weeks

  • Dosierungen

    30 mg/kg

  • Verabreichung

    Subcutaneously

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12606497/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17906685/

Kundenproduktvalidierung

<p>Differentiation of hESCs along the vascular. (B) FACS analysis showing the percentage of cells expressing CD34, PDGFRa, and KDR after 4 days of differentiation using our differentiation protocol in H9 hESC line. Similarly, an analysis was provided for the H1 hESC line using the same protocol but with CHIR98014 as the GSKi.</p>

Daten von [ Stem Cells Dev , 2013 , 22, 1893-90 ]

<p> </p><div>T (Brachyury) and b-catenin expression in hESCs after GSKi treatment. (C) Immunofluorescence analysis of OCT4 and brachyury in hESCs after 24 h of GSKi treatment. Top row: H1-hESCs treated with basal media alone without any GSKi, middle row: H9 hESCs treated with CHIR99021, bottom row: H1-hESCs treated with 2 mM CHIR98014. (D) 20 · magnification of bcatenin expression in H1-hESCs after 24 h of GSKi treatment. Top row: hESCs treated with basal media alone without any</div><div>GSKi, middle row: hESCs treated with CHIR99021, bottom row: hESCs treated with CHIR98014. All scale bars represent 200 mm.</div>

Daten von [ Stem Cells Dev , 2013 , 22, 1893-90 ]

<p>T (Brachyury) and b-catenin expression in hESCs after GSKi treatment. (B) Comparison of transcription profiles for T and CXCR4 in hESCs treated using CHIR99021 at 5mM and a different GSKi, CHIR98014 at 2mM. Although gene expression levels were different, the transcription profiles for both genes were approximately similar for both GSKis with T upregulating and peaking at day 1, while CXCR4 begins up-regulating at day 2.</p>

Daten von [ Stem Cells Dev , 2013 , 22, 1893-90 ]

<p>Western blotting (D) in U937 cells following 16-hour exposure to BEZ235/ABT-737 (0.5 μmol/L each) in the presence or absence of BIO, MeBIO, or CHIR-98014 (2 μmol/L each).</p>

, , Cancer Res, 2013, 73(4):1340-51.

Sellecks CHIR-98014 Wurde zitiert von 58 Publikationen

Sulforaphane-cysteine inhibits α-tubulin/PD-L1/PFKFB4 axis leading to apoptosis in human glioblastoma [ Med Oncol, 2025, 42(8):333] PubMed: 40659958
Generation of an induced pluripotent stem cell line from a malignant melanoma patient who developed the immune checkpoint inhibitor-related myasthenia gravis, myositis, and myocarditis overlap syndrome [ Stem Cell Res, 2025, 87:103797] PubMed: 40795579
Pantethine ameliorates dilated cardiomyopathy features in PPCS deficiency disorder in patients and cell line models [ Commun Med (Lond), 2025, 5(1):323] PubMed: 40745475
Nociceptor-immune interactomes reveal insult-specific immune signatures of pain [ Nat Immunol, 2024, 25(7):1296-1305] PubMed: 38806708
RNA m6A modification regulates L1 retrotransposons in human spermatogonial stem cell differentiation in vitro and in vivo [ Cell Mol Life Sci, 2024, 81(1):92] PubMed: 38363375
Identification of novel neuroprotectants against vincristine-induced neurotoxicity in iPSC-derived neurons [ Cell Mol Life Sci, 2024, 81(1):315] PubMed: 39066803
PIM1 drives lipid droplet accumulation to promote proliferation and survival in prostate cancer [ Oncogene, 2024, 43(6):406-419] PubMed: 38097734
Enhancing Maturation and Translatability of Human Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes through a Novel Medium Containing Acetyl-CoA Carboxylase 2 Inhibitor [ Cells, 2024, 13(16)1339] PubMed: 39195229
Inhibition of DNMT3B expression in activated hepatic stellate cells overcomes chemoresistance in the tumor microenvironment of hepatocellular carcinoma [ Sci Rep, 2024, 14(1):115] PubMed: 38168140
Characterization of the BH1406 non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line carrying an activating SOS1 mutation [ Transl Lung Cancer Res, 2024, 13(11):2987-2997] PubMed: 39670010

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