CX-5461 (Pidnarulex)

Es wird festgestellt, dass CX-5461 (Pidnarulex) die rRNA-Synthese (Pol I IC50=142 nM; Pol II IC50 > 25 ",mu"M; Selektivität ~200-fach) in HCT-116-Zellen selektiv hemmt. Diese selektive Hemmung wird in zwei anderen menschlichen soliden Tumorzelllinien bestätigt: Melanom A375 (Pol I IC50 = 113 nM; Pol II IC50 > 25 ",mu"M) und Pankreaskarzinom MIA PaCa-2 (Pol I IC50=54 nM; Pol II IC50 ~25 mM). Es besitzt eine 250- bis 300-fache Selektivität für die Hemmung der rRNA-Transkription im Vergleich zur DNA-Replikation und Protein-Translation. Die Verbindung zeigt eine breite antiproliferative Wirksamkeit in einem Panel von Krebszelllinien in menschlichen Krebszelllinien, hat aber minimale Auswirkungen auf die Lebensfähigkeit nicht-transformierter menschlicher Zellen. Der mediane EC50-Wert über alle getesteten Zelllinien beträgt 147 nM, während alle normalen Zelllinien EC50-Werte von etwa 5.000 nM aufweisen. Die Bewertung der antiproliferativen Dosis-Wirkungs-Beziehung für HCT-116-, A375- und MIA PaCa-2-Zelllinien ergibt EC50-Werte von 167, 58 und 74 nM. Es induziert Autophagie und Seneszenz in soliden Tumorkrebszellen, anstatt Apoptose, durch einen p53-unabhängigen Prozess. [1]

CX-5461 (Pidnarulex) ist oral bioverfügbar und zeigt in vivo Antitumoraktivität gegen menschliche solide Tumoren in murinen Xenograftmodellen. Diese Verbindung zeigt eine signifikante MIA PaCa-2 TGI mit einem TGI von 69 % am Tag 31. Ebenso zeigt sie eine signifikante A375 TGI mit einem TGI von 79 % am Tag 32. [1]

• Pol I- und Pol II-Transkriptionsassay

  Zwei kurzlebige RNA-Transkripte (Halbwertszeiten ~20-30 Minuten), eines von Pol I und ein weiteres von Pol II produziert, werden mittels qRT-PCR als Maß für CX-5461 (Pidnarulex)-bezogene Effekte auf die Transkription quantifiziert. Die 45S prä-rRNA diente als Pol I-Transkript und die mRNA für das Protoonkogen c-myc diente als vergleichendes Pol II-Transkript. Es ist bekannt, dass sowohl die Pol I- als auch die Pol II-Transkription durch allgemeinen zellulären Stress beeinflusst werden. Um die potenziellen Auswirkungen eines solchen Stresses zu minimieren, werden die Zellen nur für eine kurze Zeit (2 Stunden) Testsubstanzen ausgesetzt. Dies ist ausreichend Zeit, damit diese Transkripte um mehr als 90 % reduziert werden, wenn diese Verbindung ihre Synthese beeinflusst.

• Zelllinien

  panel of cancer and normal cell lines

• Konzentrationen

  0-2 μM

• Inkubationszeit

  96 hours

• Methode

  Cells are plated on 96-well plates and treated the next day with dose response of CX-5461 (Pidnarulex) for 96 hours. Cell viability is determined using Alamar Blue and CyQUANT assays

• Tiermodelle

  5 × 10⁶ MIA Paca-2 and A375 cancer cells are subcutaneously inoculated in the right flank of 5- to 6- week-old female athymic mice

• Dosierungen

  50 mg/kg

• Verabreichung

  CX-5461 is administered orally once daily or every 3 days.