D-Luciferin Potassium Salt

Katalog-Nr.S6580 Charge:S658004

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Technische Daten

Formel

C11H7KN2O3S2

Molekulargewicht 318.41 CAS-Nr. 115144-35-9
Löslichkeit (25°C)* In vitro Water 16 mg/mL (50.24 mM)
DMSO 8 mg/mL (25.12 mM)
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.

0.400mg/ml (1.26mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.

0.400mg/ml (1.26mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 8 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung D-Luciferin ist das natürliche Substrat des Enzyms Luciferase (Luc), das die Produktion des typischen gelb-grünen Lichts von Glühwürmchen katalysiert. Die 560 nm Chemilumineszenz dieser Reaktion erreicht innerhalb von Sekunden ihren Höhepunkt, wobei die Lichtausbeute proportional zur Luciferasekonzentration ist, wenn das Substrat Luciferin im Überschuss vorhanden ist. Das Luciferase (luc)-Gen ist ein beliebtes Reportergen für die Forschung und das Screening von Wirkstoffen. Chemilumineszente Techniken sind praktisch hintergrundfrei, was das luc-Reportergen ideal für den Nachweis einer geringen Genexpression macht. Zusätzlich zu seiner Rolle als Reporter der Genexpression wird Luciferase häufig in einem extrem empfindlichen Assay für ATP verwendet.
In vitro

1.Beispielprotokoll für In-vitro-Biolumineszenz-Bildassays
a) Bereiten Sie eine 100 mM (100-200X) Luciferin-Stammlösung in sterilem Wasser vor. Gut mischen. Sofort verwenden, oder Einzelportionen herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, Lichtexposition vermeiden.
b) Bereiten Sie eine 0,5-1 mM Arbeitslösung von D-Luciferin in vorgewärmtem Gewebekulturmedium vor.
c) Aspirieren Sie das Medium von kultivierten Zellen.
d) Geben Sie die Luciferin-Arbeitslösung zu den Zellen und inkubieren Sie die Zellen 5-10 Minuten bei 37℃ direkt vor der Bildgebung.
2.Beispielprotokoll für In-vivo-Biolumineszenz-Bildassays
a) Bereiten Sie eine 15 mg/mL Luciferin-Stammlösung in DPBS, ohne Mg2+ und Ca2+, vor. Gut mischen.
b) Filtrieren Sie die Lösung steril durch einen 0,2 μm Filter. Sofort verwenden, oder Einzelportionen herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, Lichtexposition vermeiden.
c) Injizieren Sie das Luciferin intra-peritoneal (i.p.) 10-15 Minuten vor der Bildgebung mit 150 mg/kg (oder 10 μL/g der Luciferin-Stammlösung) des Tierkörpergewichts.
Hinweis: Eine kinetische Studie des Luciferins sollte für jedes Tiermodell durchgeführt werden, um den Zeitpunkt des Spitzensignals zu bestimmen.
3.Beispielprotokoll für Luciferin-Reporterassays
a) Bereiten Sie eine 100 mM Luciferin-Stammlösung in sterilem Wasser vor. Sofort verwenden, oder Einzelportionen herstellen und bei -20℃ lagern, Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, Lichtexposition vermeiden.
b) Bereiten Sie eine 1 mM Arbeitslösung von D-Luciferin mit 3 mM ATP, 1 mM DTT und 15 mM MgSO4 in 25 mM Tricine-Puffer pH 7.8 vor.
c) Pipettieren Sie 5-10 μL Zelllysat in eine Mikroplatte. Verwenden Sie Lyse-Reagenz oder Puffer ohne Lysat als Blindwert.
d) Luminometer mit Luciferin-Arbeitslösung vorbereiten.
e) Injizieren Sie 200 μL Luciferin-Arbeitslösung ohne Verzögerung und mit einer Integrationszeit von 10 Sekunden.

Protokoll (aus Referenz)

Tierstudie:

[2]

  • Tiermodelle

    Female NCI Athymic nu/nu nude mice

  • Dosierungen

    3 mg/100 μL

  • Verabreichung

    i.p.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25992288/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33485378/

Sellecks D-Luciferin Potassium Salt Wurde zitiert von 4 Publikationen

Carbenoxolone disodium suppresses the migration of gastric cancer by targeting HDAC6 [ Future Med Chem, 2023, 15(4):333-344] PubMed: 36946221
A magneto-controlled biocatalytic cascade with a fluorescent output [ Org Biomol Chem, 2022, 20(9):1869-1873] PubMed: 35156979
Leronlimab, a humanized monoclonal antibody to CCR5, blocks breast cancer cellular metastasis and enhances cell death induced by DNA damaging chemotherapy [ Breast Cancer Res, 2021, 23(1):11] PubMed: 33485378
KDM4A-mediated histone demethylation of SLC7A11 inhibits cell ferroptosis in osteosarcoma [ Biochem Biophys Res Commun, 2021, 550:77-83] PubMed: 33689883

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