ENMD-2076 L-(+)-Tartaric acid

Katalog-Nr.S2018 Charge:S201801

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Technische Daten

Formel

C25H31N7O6
Molekulargewicht 525.56 CAS-Nr. 1291074-87-7
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (190.27 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
30%PEG400 0.5%Tween80 5%propylene glycol

Validiert von Selleck Labs. Sollten Sie Anpassungen an dieser Formulierung benötigen, wenden Sie sich an unser Vertriebsteam für kundenspezifische Tests.

 30.000mg/ml (57.08mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung ENMD-2076 L-(+)-Tartaric acid ist die Weinsäure von ENMD-2076, mit selektiver Aktivität gegen Aurora A und Flt3 mit einer IC50 von 14 nM und 1,86 nM, 25-fach selektiver für Aurora A als Aurora B und weniger potent gegenüber VEGFR2/KDR und VEGFR3, FGFR1 und FGFR2 und PDGFRα. Phase 2.
Ziele
FLT3 RET Aurora A VEGFR3/FLT4 Src Mehr anzeigen
1.86 nM 10.4 nM 14 nM 15.9 nM 20.2 nM
In vitro ENMD-2076 zeigt Aktivität gegen mehrere Kinasen, die an Angiogenesis beteiligt sind, einschließlich FLT3, RET, FLT4/VEGFR3, SRC, NTRK1, CSF1R/FMS, LCK, VEGFR2/KDR, FGFR1/2 und PDGFRα mit IC50 von 1,86-120 nM. ENMD-2076 hemmt das Wachstum einer Vielzahl menschlicher solider Tumor- und hämatopoetischer Krebszelllinien mit IC50 von 0,025-0,7 μM, was Apoptose und G2/M-Phasen-Arrest induziert. ENMD-2076 induziert Regression oder vollständige Hemmung des Tumorwachstums in Tumor-Xenograft-Modellen, die von Brust-, Darm-, Melanom-, Leukämie- und multiplem Myelom-Zelllinien abgeleitet sind. ENMD-2076 ist das L (+)-Tartrat-Salz von ENMD-981693. ENMD-2076 zeigt signifikante Zytotoxizität gegen Myelomzelllinien (IM9, ARH-77, U266, RPMI 8226, MM.1S, MM.1R, NCI-H929) und primäre Zellen mit IC50 von 2,99 bis 7,06 μM, was Apoptose induziert. ENMD-2076 zeigt eine geringe Zytotoxizität gegenüber hämatopoetischen Vorläufern. ENMD-2076 hemmt den Phosphoinositid-3-Kinase/Akt-Weg und reguliert Survivin und den X-chromosomalen Inhibitor der Apoptose herunter. ENMD-2076 hemmt auch Aurora A- und B-Kinasen und induziert einen G2/M-Zellzyklusarrest.
In vivo ENMD-2076 hat anhaltende hemmende Wirkungen auf die Aktivierung von Flt3 sowie VEGFR2/KDR und FGFR1/2 im HT29-Xenograft-Modell. ENMD-2076 könnte die Bildung neuer Blutgefäße verhindern und gebildete Gefäße im MDA-MB-231-Xenograft-Modell zurückbilden. Die orale Behandlung mit ENMD-2076 (50, 100, 200 mg/kg pro Tag) hemmt das Tumorwachstum in H929-Humanplasmozytom-Xenografts, mit einer signifikanten Reduktion von Phospho-Histon 3 (pH3), Ki-67 und Angiogenesis sowie einem signifikanten Anstieg von gespaltener Caspase-3.
Merkmale Multifunktionelles Molekül: Multitarget-, antiproliferative, pro-apoptotische und anti-angiogene Aktivität.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • Kinase-Assays

    Rekombinante Aurora A- und B-Kinaseenzyme und geeignete PanVera Z'-Lyte-Kinase-Assay-Kits werden gekauft. Die Assays werden in Kinase-Assay-Puffer (50 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 5 mM EGTA, 0,05% Brij-35) durchgeführt, ergänzt mit 2 mM DTT. Die Aktivitäten werden bei einer ATP-Konzentration bestimmt, die dem scheinbaren Km für jedes Enzym entspricht, und einer Enzymkonzentration, die nach 1 Stunde zu einer Phosphorylierung des Peptidsubstrats von ungefähr 30% führt. Dosis-Wirkungs-Kurven der relativen Enzymaktivität versus ENMD-2076-Konzentration werden mit Grafit geplottet und zur Berechnung der IC50-Werte verwendet. Die Potenz der freien Base von ENMD-2076 gegen ein ausgewähltes Panel von 100 Kinaseenzymen wird mithilfe des SelectScreen-Kinase-Profiling-Service bestimmt. Die ATP-Konzentrationen liegen beim scheinbaren Km für jedes Enzym oder bei 100 μM, wenn der scheinbare Km nicht erreicht werden konnte. Die prozentuale Hemmung wird bei einer freien Base-Konzentration von ENMD-2076 von 1 μM bestimmt; für Kinasen, bei denen eine signifikante Hemmung festgestellt wird, werden die IC50-Werte durch die Erstellung vollständiger 10-Punkt-Dosis-Wirkungs-Kurven bestimmt.
Zell-Assay:[1]
  • Zelllinien

    Human leukemia cell lines including MV4;11, U937, Kasumi, MO7e, HL-60, TF-1, Jurkat, K562, THP-1, Hel 92.1.7; Solid tumor cell lines and HUVEC including PANC-1, HCT116, A549, HT-29, MCF7, PC-3, BXPC-3 and HUVEC

  • Konzentrationen

    ~125 μM

  • Inkubationszeit

    48 or 96 hours

  • Methode

    The antiproliferative effect of ENMD-2076 on adherent tumor cell lines is measured by plating 500 cells per well in a 96-well plate and incubating with ENMD-2076 for 96 hours. Cellular proliferation is measured using the sulforhodamine B assay. The leukemia-derived, nonadherent cell lines are assayed by plating 5 × 103 cells per well in a 96-well plate. The cells are incubated with ENMD-2076 for 48 hours and then survival is assayed using the Alamar Blue reagent. To measure the effect of ENMD-2076 on VEGF- and fibroblast growth factor (FGF)-induced proliferation of human umbilical vein endothelial cell (HUVEC), cells are serum starved for 6 hours, then treated with ENMD-2076 free base, and stimulated with 5 ng/mL bFGF or 25 ng/mL VEGF (R and D Systems) for 72 hours. Cell proliferation is measured using WST-
Tierstudie:[1]
  • Tiermodelle

    Tumor models including HCT-116, HT29, CT-26, A375, MDA-MB-231, H929, OPM-2, MV4;11 and HL60 are established in CB.17 SCID or NCr nude mice.

  • Dosierungen

    ~300 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered orally

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20560971/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21177375/

Kundenproduktvalidierung

<p>Breast cancer cells line MDA-MB-231 were treated with the indicated concentrations of ENMD-2076.</p> <div> <div> </div> </div> <p> </p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

<p>ENMD-2076 has benn tested it on two different neurobiastoma cell lines(SK-N-BE(2) and CHP-134),being calculated the IC50 by a WST-1(Roche) proliferation assay, as shown in the table below. Its in vitro activity is in the micromolar range and has a comparable effect on both lines.VX-680 was used as standard, and it proved more potent on CHP-134 cells.</p> <div> <div> </div> </div> <p> </p>

, , Dr. Antonino Maria Sparta ,University of Trento

<p>Neurospheres were obtained growing CHP-134 cells in a selective medium (DMEMF12, B27, EGF, bFGF, L-Glut). The cells were grown in 96-well plates to confluence and treated with ENMD-2076 for 24 h. The toxic effect was measured by a WST-1 chromogenic assay. It appears that the bulk cell line is more sensitive to treatment that the neurospheres.</p> <div> <div> </div> </div> <p> </p>

, , Dr. Antonino Maria Sparta ,University of Trento

<p>SDS-PAGE of CHP-134 cells extracts after 24 h exposure to the indicated drug and concentration. N-myc levels were evaluated and compared to beta actin used as house-keeping protein. Aurora A blockade seems to diminish N-myc expression or stability.</p>

, , Dr. Antonino Maria Sparta, University of Trento

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