RAD001 (Everolimus)

Katalog-Nr.S1120 Charge:S112029

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Technische Daten

Formel

C53H83NO14
Molekulargewicht 958.22 CAS-Nr. 159351-69-6
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (104.36 mM)
Ethanol 100 mg/mL (104.36 mM)
Water Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Everolimus ist ein mTOR Inhibitor von FKBP12 mit einer IC50 von 1,6-2,4 nM in einem zellfreien Assay. Everolimus induziert Zell-Apoptose und Autophagy und hemmt die Proliferation von Tumorzellen.
Ziele
FKBP12
(Cell-free assay)		 mTOR (FKBP12)
(Cell-free assay)
1.6-2.4 nM 1.6 nM-2.4 nM
In vitro Everolimus zeigt eine immunsuppressive Aktivität, die mit der von Rapamycin vergleichbar ist. Diese Verbindung konkurriert mit immobilisiertem FK 506 um die Bindung an biotinyliertes FKBP12 und zeigt eine hemmende Wirkung auf eine Zwei-Wege-MLR, die mit Milzzellen von BALB/c- und CBA-Mäusen mit einer IC50 von 0,12-1,8 nM durchgeführt wurde. Es zeigt auch antiangiogene/vaskuläre Effekte bei VEGF-induzierter HUVEC-Proliferation mit einer IC50 von 0,12 nM und bFGF-induzierter HUVEC-Proliferation mit einer IC50 von 0,8 nM. Eine aktuelle Studie zeigt, dass diese Chemikalie dosisabhängige hemmende Effekte auf die Gesamtzellen und die Stammzellen der BT474-Zelllinie und der primären Brustkrebszellen mit einer IC50 von 156 nM bei Gesamtzellen von primären Brustkrebszellen und 71 nM bei Gesamtzellen von BT474-Zellen zeigt. Darüber hinaus führt die Kombinationstherapie mit dieser Verbindung und Trastuzumab zu einer signifikant erhöhten Hemmung des Wachstums von Krebsstammzellen, wobei die Hemmrate um mehr als 50 % erhöht wird.
In vivo Everolimus (0,1 bis 10 mg/kg) hemmt dosisabhängig das Wachstum des primären (Ohr) und der Lymphknotenmetastasen von B16/BL6-Melanomen, mit einer verringerten Gesamtzahl von Gefäßen und reduzierten reifen Gefäßen. In einem Xenograft-Tiermodell von BT474-Stammzellen zeigt diese Verbindung signifikante Reduktionen der mittleren Tumorgrößen (590,6 mm3) im Vergleich zur Kontrollgruppe mit einer Tumorgröße von 698 mm3. Darüber hinaus verringert die Kombinationstherapie mit dieser Verbindung und Trastuzumab die Xenograft-Tumorgröße (410,8 mm3) signifikant stärker als die Behandlung mit dieser Verbindung allein.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • FKBP12 Bindungstest & Gemischte Lymphozytenreaktion (MLR)

    FKBP12 Bindungstest: Die Bindung an das FK 506-Bindungsprotein (FKBP12) wird indirekt mittels eines ELISA-artigen Kompetitionstests bestimmt. FK 506 ist in jedem einzelnen Experiment als Standard enthalten, und die hemmende Aktivität wird als relative IC50 im Vergleich zu FK 506 ausgedrückt (rIC50 = IC50 dieser Verbindung/IC50 FK 506). Gemischte Lymphozytenreaktion (MLR): Die immunsuppressiven Aktivitäten von RAP und seinen Derivaten werden in einer Zwei-Wege-MLR unter Verwendung von Milzzellen von BALB/c- und CBA-Mäusen bestimmt. RAP ist in jedem einzelnen Experiment als Standard enthalten, und die hemmende Aktivität wird als relative IC50 im Vergleich zu RAP ausgedrückt (rIC50 = IC50 dieser Verbindung/IC50 RAP).
Zell-Assay:[3]
  • Zelllinien

    BT474 cell line and the primary breast cancer cells

  • Konzentrationen

    0.001-10 μM

  • Inkubationszeit

    24 hours

  • Methode

    The 3-(4-5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide dye reduction assay (MTT assay) is used to compare the effects of Everolimus or trastuzumab on total breast cancer cells and breast CSCs. The total cells and the stem cells from the BT474 cell line and the primary breast cancer cells are respectively seeded into 96-well plates with different concentrations of the drugs, with five wells for each concentration, and the cells are cultured at 37 °C with 5 % CO2 in an incubator for 24 hours. The concentrations of this compound are 1 nM, 10 nM, 100 nM, 1 μM and 10 μM, and the concentrations of trastuzumab are 0.5 μg/mL, 1 μg/mL, 10 μg/mL, 50 μg/mL, and 100 μg/mL. The combinatorial inhibitory effect of this compound and Trastuzumab on the in vitro growth of breast CSCs is examined by MTT assay as well using 10 μg/mL trastuzumab in combination of increasing concentrations of this chemical (1 nM, 10 nM, 100 nM and 1 μM). After drug treatment for 24 hours, 20 μL MTT [5 mg/mL in phosphate buffered saline (PBS)] is added to each well, and the cells are incubated at 37 °C with 5 % CO2 and saturated humidity for 4 hours. Following the subsequent removal of the supernatant, 150 μL dimethyl sulfoxide (DMSO) is added to each well, and the cells are vortexed for 10 minutes. The light absorbance (OD value) is measured for each well using an ELISA reader. Each experiment is repeated in triplicate, and dose–response curves are plotted. The probit software of the statistical software package SPSS 17.0 for Windows is used to calculate the inhibitory concentration (IC50) of this compound.
Tierstudie:[3]
  • Tiermodelle

    Cultured BT474 stem cells are injected beneath the left breast pad of BALB/c nude mice.

  • Dosierungen

    ≤2 mg/kg

  • Verabreichung

    Administered via p.o.

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9723437/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19223496/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22492237/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16033851/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18708754/

Kundenproduktvalidierung

Cytoskeleton organisation of 786-O SuR treated with NVP-LDE225 (2.5 uM), everolimus (1 uM), and their combination for 24 h was analysed by confocal microscopy. Actin-based structures were revealed by rhodaminated phalloidin staining (red fluorescence). Localisation of focal adhesion points was obtained by immunofluorescent staining of p-paxillin (green fluorescence). Merged row images show overlapping of p-paxillin and actin signals. Moreover, all captures were shown in transmitted light. Scale bars, 10 um.

Daten von [ Br J Cancer , 2014 , 111(6), 1168-79 ]

Treatment of the BRAFi-resistant melanoma cells with the mTOR inhibitor RAD001 did lead to substantial decrease of S6 phosphorylation in the 3 BRAFi-resistant lines K028PR, M34PR, and K029PR; however, such an inhibition failed to elicit any inhibitory effect on the expression of PD-L1.

Daten von [ Clin Cancer Res , 2013 , 19(3),598-609 ]

Effects on PI3K signaling. Tumor cells were treated with DMSO, BEZ-235 (5uM, 1uM), BKM-120 (5uM, 1uM), RAD-001(5uM, 1uM) or cyclopamine (2.5uM, 1uM) for 3 hr. Cells were lysed and protein was analyzed for phosphorylation of AKT and S6 (pAKT and pS6) or for GAPDH by Western blotting.

Daten von [ Cancer Cell , 2012 , 21(2), 155-67 ]

The phenotype of nuclear blebbing was improved in RAD001 and rapamycin treated HGPS fibroblast cells. Cells were stained with DAPI (blue), laminA/C antibody (red), and progerin antibody (green) to show nuclear location and morphology. The treatment duration is for seven weeks. Mock: vehicle (DMSO, 0.025% v/v); Rap: 0.68 uM rapamycin, Rad: 0.1 uM RAD001. (Scale bar: 10 um)

Daten von [ Aging (Albany NY) , 2012 , 4(2), 119-32 ]

Sellecks RAD001 (Everolimus) Wurde zitiert von 798 Publikationen

Proteogenomic characterization of non-functional pancreatic neuroendocrine tumors unravels clinically relevant subgroups [ Cancer Cell, 2025, 43(4):776-796.e14] PubMed: 40185092
Ataluren improves hematopoietic and pancreatic disorders in Shwachman-Diamond syndrome patients: a compassionate program case-series [ Nat Commun, 2025, 16(1):8189] PubMed: 40897730
System analysis links SMARCD3 regulons to growth signaling and MEK inhibitor response in everolimus-resistant ER+ breast cancer cells [ Cell Rep Med, 2025, 6(11):102425] PubMed: 41260207
Haploinsufficiency of miR-143 and miR-145 reveal targetable dependencies in resistant del(5q) myelodysplastic neoplasm [ Leukemia, 2025, 39(4):917-928] PubMed: 40000845
Pancreatic Neuroendocrine Tumors Secrete Apolipoprotein E to Induce Tip Endothelial Cells That Remodel the Tumor-Stroma Ratio and Promote Cancer Progression [ Cancer Res, 2025, 85(15):2805-2819] PubMed: 40623046
Targeting the MYC oncogene with a selective bi-steric mTORC1 inhibitor elicits tumor regression in MYC-driven cancers [ Cell Chem Biol, 2025, 32(8):994-1012.e11] PubMed: 40803322
YAP1 promoter-associated noncoding RNA affects Ewing sarcoma cell tumorigenicity by regulating YAP1 expression [ Cell Mol Biol Lett, 2025, 30(1):63] PubMed: 40414844
Increased fatty acid delivery by tumor endothelium promotes metastatic outgrowth [ JCI Insight, 2025, 10(9)e187531] PubMed: 40198126
Molecular control of PDPNhi macrophage subset induction by ADAP as a host defense in sepsis [ JCI Insight, 2025, e186456] PubMed: 39903516
A phase II trial of mTORC1/2 inhibition in STK11 deficient non small cell lung cancer [ NPJ Precis Oncol, 2025, 9(1):67] PubMed: 40069402

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