Flavopiridol (Alvocidib) HCl

Katalog-Nr.S2679 Charge:S267904

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Technische Daten

Formel

C21H20ClNO5.HCl
Molekulargewicht 438.3 CAS-Nr. 131740-09-5
Löslichkeit (25°C)* In vitro DMSO 88 mg/mL (200.77 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Lösungsmittel einzeln und der Reihe nach zum Produkt hinzufügen.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml bedeutet schwer löslich oder unlöslich.
* Bitte beachten Sie, dass Selleck die Löslichkeit aller Verbindungen intern testet und die tatsächliche Löslichkeit geringfügig von veröffentlichten Werten abweichen kann. Dies ist normal und ist auf geringfügige Batch-zu-Batch-Variationen zurückzuführen.
* Versand bei Raumtemperatur (Stabilitätstests zeigen, dass dieses Produkt ohne Kühlmaßnahmen versendet werden kann.)

Vorbereitung von Stammlösungen

Biologische Aktivität

Beschreibung Flavopiridol (Alvocidib) HCl konkurriert mit ATP, um CDKs einschließlich CDK1, CDK2, CDK4 und CDK6 mit einer IC50 von ~ 40 nM in zellfreien Assays zu hemmen. Es ist 7,5-mal selektiver für CDK1/2/4/6 als für CDK7. Flavopiridol wurde ursprünglich zur Hemmung von EGFR und PKA gefunden. Flavopiridol HCl induziert Autophagy und ER-Stress. Flavopiridol HCl blockiert die HIV-1-Replikation. Phase 1/2.
Ziele
CDK1
(Cell-free assay)		 CDK2
(Cell-free assay)		 CDK4
(Cell-free assay)		 CDK6
(Cell-free assay)		 CDK7
(Cell-free assay)
40 nM 40 nM 40 nM 40 nM 300 nM
In vitro Flavopiridol hemmt zunächst den epidermalen Wachstumsfaktorrezeptor und die Proteinkinase A (IC50 = 21 und 122 μM). Später wird gezeigt, dass Flavopiridol die Zellproliferation bei physiologisch relevanteren Konzentrationen (IC50 = 66 nM) hemmt, wenn Flavopiridol im Panel von 60 menschlichen Tumorzelllinien des National Cancer Institute Development Therapeutics Program getestet wird. Flavopiridol induziert einen G1-Arrest mit Hemmung von CDK2 und CDK4 in menschlichen Brustkarzinomzellen auf zeit- und konzentrationsabhängige Weise. Eine kurzzeitige Behandlung mit Flavopiridol (ca. 12 Stunden) induziert Apoptose in hämatopoetischen Zelllinien, einschließlich SUDHL4, SUDHL6 (B-Zelllinien), Jurkat und MOLT4 (T-Zelllinien) und HL60 (myeloid). Im Koloniekultur-Assay fungiert Flavopiridol als hochwirksame zytotoxische Verbindung mit einem mittleren IC70 von 8 ng/mL in 23 menschlichen Tumormodellen. Eine aktuelle Studie zeigt, dass die Flavopiridol-Behandlung eine erhebliche AKT-Ser473-Phosphorylierung in der menschlichen Glioblastom-Zelllinie T98G induziert.
In vivo Bei der maximal tolerierten Dosis von 10 mg/kg/Tag, die p.o. an den Tagen 1-4 und 7-11 verabreicht wird, bewirkt Flavopiridol eine Tumorregression bei PRXF1337 und eine für 4 Wochen anhaltende Tumorstase bei PRXF1369. Nach Behandlung mit 7.5 mg/kg Flavopiridol als Bolus intravenös (IV) oder intraperitoneal an 5 aufeinanderfolgenden Tagen erfahren 11 von 12 fortgeschrittenen subkutanen (s.c.) menschlichen HL-60 Xenografts eine vollständige Regression, und die Tiere bleiben mehrere Monate nach einem Behandlungszyklus mit Flavopiridol krankheitsfrei. SUDHL-4 s.c. Lymphome, die mit Flavopiridol in einer Dosis von 7.5 mg/kg als Bolus IV über 5 Tage behandelt wurden, erfahren entweder eine starke (zwei von acht Mäusen) oder eine vollständige (vier von acht Mäusen) Regression, wobei zwei Tiere länger als 60 Tage krankheitsfrei bleiben. Die gesamte Wachstumsverzögerung beträgt 73.2%. Die tägliche IV- oder IP-Verabreichung von Flavopiridol führt zu Spitzenplasmakonzentrationen von etwa 7 µM, gefolgt von einem progressiven Abfall auf etwa 100 nM innerhalb von 8 Stunden.

Protokoll (aus Referenz)

Kinase-Assay:[1]
  • Rekombinante CDKs Kinase-Reaktionen

    CDKs-Aktivitäten werden in Mikrotiterplatten wie folgt bestimmt: Vierzig μg Gst-Rb werden mit unterschiedlichen Mengen Flavopiridol und unmarkiertem ATP gemischt. Die Reaktionen werden dann durch Zugabe eines Ammoniumsulfat-Schnitts der S100-Fraktion, die aus Insektenzellen gewonnen wird, die rekombinante menschliche CDKs exprimieren, gestartet. Die endgültigen Reaktionsbedingungen sind 10 mM MgCl2, 50 mM Tris-HCl (pH 7.5) und 1 mM DTT. Die endgültige Konzentration von ATP wird entsprechend angepasst. Radiolabelled ATP wird als Phosphoryl-Donor verwendet. Die Reaktion wird für 2.5 Minuten bei 30 °C nach Zugabe des Enzyms durchgeführt und dann mit der Zugabe von EDTA beendet. Das Gst-Rb wird dann mit Glutathion-Sepharose eingefangen und die eingebaute Radioaktivität wird durch Flüssigszintillationszählung bestimmt.
Zell-Assay:[2]
  • Zelllinien

    SUDHL4, SUDHL6, Jurkat, MOLT4, and HL60

  • Konzentrationen

    0, 100 500, 5000 nM

  • Inkubationszeit

    14 hours

  • Methode

    Cells grown at a density of 1 × 106 cells/mL are exposed to Flavopiridol for different concentrations and time periods. DNA is extracted. Briefly, cells are washed once with cold phosphate-buffered saline (PBS) and lysed with 3 mL lysis buffer (5 mM Tris-HCL [pH 7.5]; 20 mM EDTA; 0.5% Triton X-100) for 15 minutes at 4 °C. The chromatin of the cell lysates is isolated by centrifugation (20 minutes at 26,000g, 4 °C). The supernatants containing small DNA fragments are extracted sequentially with phenol, phenol:chloroform (1:1), and chloroform. Nucleic acids are precipitated in 0.5 M NaCl, 90% ethanol at -20 °C overnight. RNA is then digested by bovine RNAaseA (60 μg/mL). After sequential reextraction and reprecipitation, DNA is dissolved in 10 mM Tris-HCL (pH 7.5), 1 mM EDTA, 0.5% sodium dodecyl sulfate (SDS) before electrophoresis on 1.6% agarose gel.

Tierstudie:[4] [6]
  • Tiermodelle

    Human prostate cancer xenografts, PRXFI337 and PRXFI369, grown s.c. in nude mice [4] Human promyelocytic leukemia HL-60, human B-cell follicular lymphoma SUDHL-4, and acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)-r

  • Dosierungen

    10 mg/kg/d [4]; 7.5 mg/kg/d [6]

  • Verabreichung

    p.o.[4]; i.p. or i.v. [6]

Referenzen

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12165651/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8674031/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9427698/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9815683/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22391209/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9516149/

Kundenproduktvalidierung

<p>Comparative efficacy of anticancer therapies (Flavopiridol, vincristine, daunorubicin, et al.) in NMC vs non-NMC cell lines. Mean IC50 (± s.e.m.) of the indicated agents in three NMC (PER-403, PER-624, and PER-704) and two non-NMC cell lines (PER-535 and SAOS2), ***P<0.001, unpaired t-test, corrected for multiple testing.</p>

Daten von [ Br J Cancer , 2014 , 110(5), 1189-98 ]

RPMI-8226 cells were treated with the indicated CDK inhibitors for 8 hours. Western blots are shown. The following drug concentrations were used: SLM6 at 250 nM, flavopiridol at 250 nM, roscovitine at 5 uM, purvalanol A at 10 uM, and alsterpaullone at 5 uM.

Daten von [ Mol Cancer Ther , 2012 , 11(11), 2321-2330 ]

<p>(C) In vivo treatment of Tg:Pomc-Pttg;Pomc-eGFP embryos with small-molecule CDK inhibitors (50μM) or 0.2% DMSO as control from 18 to 40 hpf. One hundred to one hundred fifty embryos were treated with each compound. Representative images of live embryos are shown with gross morphology (Right) and pituitary Pomc-GFP–positive cells at higher magnification (Left) at 40 hpf. Embryos exposed to flavopiridol developed early developmental defect before pituitary POMC cell ontogeny occurs. (D) Relative expression of pituitary Pomc-eGFP fluorescence analyzed using Volocity 5.2 software (Improvision; mean ± SE of relative expression, n = 7). (E) R-roscovitine specifically suppresses expansion of pituitary POMC cells overexpressing zPttg from 18 to 48 hpf. Double transgenic Tg:Pomc-Pttg;Prl-RFP embryos were generated by breeding Tg:Pomc-Pttg fish with a previously generated PRL-RFP transgenic line, in which RFP was targeted to pituitary lactotrophs by a zebrafish Prolactin promoter (34). Representative fluorescent microscopy of pituitary POMC-eGFP (a and b) and PRL-RFP (c and d) expression in live Tg:Pomc-Pttg; Pomc-eGFP and Tg:Pomc-Pttg;Prl-RFP embryos treated with 0.2% DMSO (a and c) or 50 μM R-roscovitine (b and d). (F) Relative expression of pituitary POMC-eGFP or PRL-RFP fluorescence were analyzed (mean ± SE of relative expression; n = 10). Results represent one of three similar experiments;*P < 0.02 and **P < 0.000005. (Scale bar, 50 μm.)</p><div><div> </div></div><p> </p>

Daten von [ PNAS , 2011 , 108, 8417 ]

Sellecks Flavopiridol (Alvocidib) HCl Wurde zitiert von 61 Publikationen

Monoallelically expressed noncoding RNAs form nucleolar territories on NOR-containing chromosomes and regulate rRNA expression [ Elife, 2024, 13e80684] PubMed: 38240312
From co-delivery to synergistic anti-inflammatory effect: Studies on chitosan-stabilized Janus emulsions having chloroquine phosphate and flavopiridol in Complete Freund's Adjuvant induced arthritis rat model [ Int J Biol Macromol, 2023, 258(Pt 1):128776] PubMed: 38114014
Claspin is Required for Growth Recovery from Serum Starvation through Regulating the PI3K-PDK1-mTOR Pathway in Mammalian Cells [ Mol Cell Biol, 2023, 43(1):1-21] PubMed: 36720467
Lamin A/C phosphorylation at serine 22 is a conserved heat shock response to regulate nuclear adaptation during stress [ J Cell Sci, 2023, 136(4)jcs259788] PubMed: 36695453
Brd4-dependent CDK9 expression induction upon sustained pharmacological inhibition of P-TEFb kinase activity [ Biochem Biophys Res Commun, 2023, 671:75-79] PubMed: 37295357
The super elongation complex drives transcriptional addiction in MYCN-amplified neuroblastoma [ Sci Adv, 2023, 9(13):eadf0005] PubMed: 36989355
Single-cell T cell receptor sequencing of paired human atherosclerotic plaques and blood reveals autoimmune-like features of expanded effector T cells [ Nat Cardiovasc Res, 2023, 2(2):112-125] PubMed: 38665903
Nuclear oligo hashing improves differential analysis of single-cell RNA-seq [ Nat Commun, 2022, 13(1):2666] PubMed: 35562344
p300/CBP sustains Polycomb silencing by non-enzymatic functions [ Mol Cell, 2022, 82(19):3580-3597.e9] PubMed: 36206738
Discovery of a large-scale, cell-state-responsive allosteric switch in the 7SK RNA using DANCE-MaP [ Mol Cell, 2022, S1097-2765(22)00114-9] PubMed: 35320755

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