Fludarabine

Fludarabine hemmt effizient die Proliferation von RPMI 8226-Zellen mit einer IC50 von 1,54 μg/mL. Die IC50 dieser Verbindung gegen MM.1S- und MM.1R-Zellen beträgt 13,48 μg/mL bzw. 33,79 μg/mL. Im Gegensatz dazu sind U266-Zellen resistent gegen diese Chemikalie mit einer IC50 von 222,2 μg/mL. Diese Verbindung führt zu einer erhöhten Anzahl von Zellen in der G1-Phase des Zellzyklus, begleitet von einer gleichzeitigen Reduktion von Zellen in der S-Phase des Zellzyklus in einer zeitabhängigen Weise. Sie induziert einen Zellzyklus-Block und löst Apoptose in MM-Zellen aus. Sie löst eine zeitabhängige Spaltung von Caspase-8, -9, und -3, -7 aus, gefolgt von einer PARP-Spaltung. Sie erhöht die Expression von Bax auf zeitabhängige Weise, während die Expression von Bak sich nicht ändert. Nach Exposition gegenüber dieser Chemikalie für 12 Stunden zeigen RPMI 8226-Zellen einen Verlust des Membranpotenzials, wobei 61,05 % der Zellen eine geringe Fluoreszenz von Rhodamin 123 exprimieren, verglichen mit 8,62 % der Zellen in der unbehandelten Kontrolle. [1] Um die Löslichkeit zu verbessern, wird es als Monophosphat (F-ara-AMP, fudarabine) formuliert, das bei intravenöser Infusion sofort und quantitativ zum Mutternukleosid dephosphoryliert wird. Im Zellinneren erfolgt eine Rephosphorylierung, die zu Fluoroadenin-Arabinosid-Triphosphat (F-ara-ATP) führt, dem wichtigsten zytotoxischen Metaboliten von F-ara-A. [2] Es kann auch eine proinflammatorische Stimulation monozytischer Zellen induzieren, bewertet durch erhöhte Expression von ICAM-1 und IL-8-Freisetzung. [3] Diese Verbindung beeinflusst das Wachstum von Ovarialkarzinomzelllinien nicht, während sie eine ausgeprägte und dosisabhängige Hemmung der Proliferation in Melanomzelllinien induziert. [4] Es ist ein Inhibitor von STAT1, der STAT1 spezifisch reduziert, ohne andere Mitglieder der STAT-Familie zu beeinflussen[5]. Zusätzlich zur zytoplasmatischen Akkumulation induziert wiederholtes Cisplatin in niedriger Dosis (RLDC) die HMGB1-Expression, die durch STAT1-Knockdown stark unterdrückt wird. Konsistent unterdrückt diese Chemikalie die HMGB1-Expression während der RLDC-Behandlung dosisabhängig in RLDC-behandelten Nieren-Tubuluszellen[5].

Mit PBS behandelte Tumore wachsen schnell auf etwa das 10-fache ihres ursprünglichen Volumens in 25 Tagen an, während die Tumore, die mit Fludarabine bei 40 mg/kg behandelt wurden, weniger als das 5-fache zunahmen. Ein signifikanter Antitumor-Effekt von 40 mg/kg dieser Verbindung auf das RPMI8226-Tumorwachstum wird gezeigt. RPMI8226-Tumore, die am Tag 10 mit 40 mg/kg dieser Chemikalie behandelt wurden, zeigen eine Zunahme apoptotischer Zellkerne. Diese Verbindung ist wirksam bei der Unterdrückung von RPMI8226-Myelom-Xenografts in SCID-Mäusen. [1]

• Zelllinien

  Dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines

• Konzentrationen

  2 μg/mL

• Inkubationszeit

  24 hours

• Methode

  After treated with Fludarabine or control, dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines (5 × 10⁵ cells) are washed twice in phosphate-buffered saline (PBS) and fixed with 70% ice-cold ethanol, then centrifuged and suspended in PBS containing 100 μg/mL RNase A. After incubated for 30 minutes at 37 ºC, samples are resuspended in 25 μg/mL propidium iodide. Flow cytometry is performed on a FACSCalibur automated system. Apoptosis is determined by Annexin V-FITC apoptosis detection kit, according to the manufacturer's instructions. For TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling) assay, cells are analyzed by flow cytometry using the in situ cell death detection kit.

• Tiermodelle

  Severe combined immunodeficient (SCID) mice bearing RPMI 8226 cells

• Dosierungen

  40 mg/kg

• Verabreichung

  Administered via i.p.